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《郑州大学》 2010年
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胃肠道间质瘤细胞组织在不同周龄裸小鼠不同部位生长情况比较研究

周斌  
【摘要】: 背景和目的 胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, G IST)作为20世纪80年代才提出的一个新概念,随着分子生物学技术的不断发展与进步,有研究表明,GIST目前已经成为消化道最常见的间叶源性肿瘤,GIST作为一种非定向分化的消化道间质肿瘤,目的就是区别于发生在胃肠道的其他肌源性或神经源性肉瘤,过去由于缺乏特异性的免疫组织化学技术,电镜下单从形态上难以区分肿瘤类别,该类肿瘤常被误诊为平滑肌或神经来源的肿瘤。目前,虽然没有判断GIST良恶性的统一标准,但大多数人认为肿瘤大小及核分裂像是胃肠道间质瘤预后的重要指标,同时,肿瘤是否破溃也对预后产生重要影响。目前,关于GIST的细胞学研究和动物学研究报道较少,本文在建立裸鼠皮下移植瘤模型的前提下,比较在不同周龄个体的裸小鼠不同部位皮下移植瘤生长情况,可为以后其他疾病建立裸鼠荷瘤模型提供参考,并在活体状态下研究胃肠道间质瘤细胞的发生发展和各种生物学特点及筛选各种抗癌药物提供一个必不可少的工具;为进一步实验研究搭建平台。材料与方法 将40只裸小鼠按周龄随机分为两组,每组再以接种部位不同随机分成2组,共四组,取新鲜间质瘤手术标本,无菌条件下分成2cm×2cm×2cm大小组织块,将分离好的间质瘤组织块分别接种于4周龄裸鼠腋下、4周龄裸鼠臀部、8周龄裸鼠腋下、8周龄裸鼠臀部部位,将裸鼠严格饲养在无特定病原体(SPF)环境下,恒温(22-26℃),恒湿(40-60%),每三天记录一次肿瘤生长体积,直至肿瘤长至1cm3,并绘制生长曲线图,处死裸小鼠并观察瘤体形态,内脏有无转移,并行病理组织学和免疫组织化学检测与人胃肠间质瘤标本进行比较;各组计量数据采用x±s表示,运用四格表x2检验,方差分析对数据处理,p0.05表示差异具有统计学意义,SAS软件进行统计学分析。 结果 1.成瘤率:肿瘤接种于4周龄裸鼠腋下部位(100%)较接种于4周龄裸鼠臀部(80%)皮下成瘤率高;接种于4周龄裸鼠腋下部位(100%)较接种于8周龄裸鼠腋下部位(70%)成瘤率高;接种于4周龄裸鼠臀部部位(80%)较接种于8周龄裸鼠臀部部位(40%)成瘤率高;以上p0.05,差异有统计学意义。但肿瘤接种于8周龄裸鼠腋下部位(70%)与接种于8周龄裸鼠臀部部位(40%),p0.05,尚不能说明两者有统计学意义。 2.破溃率:肿瘤接种于4周龄裸鼠臀部部位(10%)较接种于4周龄裸鼠腋下部位(0%)破溃率高;接种于8周龄裸鼠臀部部位(20%)较接种于8周龄裸鼠腋下部位(0%)破溃率高,以上p0.05,差异有统计学意义;而肿瘤接种于8周龄裸鼠臀部部位(20%)与接种于4周龄裸鼠臀部部位(10%)比较,p0.05,尚不能说明两者有统计学意义,并且接种于4周龄裸鼠腋下和8周龄裸鼠腋下部位的肿瘤均没有破溃现象(0%)。 3.软化消失率:肿瘤接种于4周龄裸鼠臀部(10%)较接种于4周龄裸鼠腋下部位(0%)软化率高;接种于8周龄裸鼠腋下(30%)较接种于4周龄裸鼠腋下部位(0%)软化率高;接种于8周龄裸鼠臀部部位(40%)较接种于4周龄裸鼠臀部(10%)软化率高,以上p0.05,差异有统计学意义;而肿瘤接种于8周龄裸鼠臀部(40%)较接种于8周龄裸鼠腋下(30%),两者软化率比较,p0.05,尚不能说明两者有统计学意义。 4.肿瘤生长速度:肿瘤接种于4周龄裸鼠腋下部位体积长至1cm3的时间(21.00±2.00天)较接种于8周龄裸鼠腋下(27.86±1.46天)所需时间短;接种于4周龄裸鼠臀部(25.33±1.58天)较接种于8周龄裸鼠臀部(31.50±3.00天)所需时间短,以上p0.05,差异有统计学意义;而肿瘤接种于4周龄裸鼠腋下部位与接种于4周龄裸鼠臀部的肿瘤比较;接种于8周龄裸鼠腋下部位与接种于8周龄裸鼠臀部部位的肿瘤比较,生长速度差异没有统计学意义(p0.05) 结论 本实验将不同部位不同周龄裸小鼠移植瘤情况做一比较,得出如下结论: 1.裸鼠周龄越小,标本成瘤率越高,且接种于腋下部位较臀部部位成瘤率高;周龄越大,成瘤率越低,且接种于不同部位的标本成瘤率无显著差别。 2.不论裸鼠周龄大小,接种于臀部部位的肿瘤破溃率大于腋下部位的肿瘤破溃率。研究还发现:周龄越大的裸鼠,不论肿瘤接种部位如何,瘤体自行软化消失率越高,但在周龄较小的裸鼠身上,臀部移植瘤自行消失率高于腋下移植部位。 3.不论接种部位如何,周龄越小的裸鼠,移植瘤生长速度越快;但对于相同周龄的裸鼠,不论接种部位如何,肿瘤生长速度都没有明显差异。GIST组织块在裸小鼠身上的生长情况的对比研究,为以后在活体状态下研究胃肠道间质瘤细胞的发生、发展和各种生物学特点及筛选各种抗癌药物提供一个必不可少的工具;为其他肿瘤疾病建立荷瘤模型提供参考,为进一步实验研究搭建一个平台。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735

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