收藏本站
《郑州大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

熊果酸对食管癌KYSE150细胞增殖、凋亡的影响及其机制

卢丹  
【摘要】: 背景及目的 食管癌是目前对人类健康和生命构成严重威胁的恶性肿瘤之一,在各种恶性肿瘤导致的死亡中食管癌占第六位,在我国一些高发地区居于各种恶性肿瘤的首位。近10年来,对其病因和发病机制的研究虽已取得重大进展,但迄今尚未完全阐明,发病率和死亡率在部分地区仍居高不下。食管癌是恶性程度最高的胃肠道肿瘤之一,全世界每年约有三十万人死于此疾病。我国开展食管癌外科治疗及化学治疗已有数十年,尽管食管癌的化学治疗对改善预后有着极其重要的意义,然而临床疗效较好的药物并不多,因此寻找一种有效安全的药物成为食管癌化疗的热点之一。 熊果酸作为一种存在于多种中草药中的生物活性成分,已被证明具有抗肿瘤、抗炎、止痛、护肝、抗高血压、降血糖、抗氧化、保护心脑血管等药理作用,并有望成为一种高效低毒的多用途新药。大量研究表明,熊果酸可诱导子宫内膜癌、大肠癌、前列腺癌、肺癌、淋巴瘤等多种恶性肿瘤细胞凋亡,在一定程度上揭示了熊果酸的抗肿瘤效应,但关于熊果酸对食管癌的作用却少有研究。本实验观察了熊果酸在体外对食管癌细胞系KYSE150的作用,研究熊果酸是否对食管癌细胞系KYSE150具有增殖抑制作用,及熊果酸对食管癌细胞凋亡及周期分布的影响,并进一步探讨其作用的分子机制,为进一步研究熊果酸抗肿瘤的相关分子机制打下良好的基础。 材料和方法 1细胞增殖抑制实验(熊果酸对人食管癌细胞作用的体外实验研究):采用MTT法,将对数生长期的KYSE150细胞调整细胞浓度为1.0×105/ml(常规培养人食管癌细胞系KYSE150细胞),待贴壁生长后分为三组:①实验组:加入熊果酸使终浓度为10、20、30、40、50μmol/L;②阴性对照组:加入RPMI-1640培液;O溶剂对照组:加入0.1%DMSO。每组设4个复孔,分别于熊果酸干预24、48、72小时后,检测各组细胞增殖抑制率的差异。 2细胞凋亡率和细胞周期的测定常规培养人食管癌细胞系KYSE150细胞,对照组加入RPMI-1640培养液,实验组加熊果酸使其终浓度为40μmol/L。分别于24、48、72小时干预后收集各对照组和实验组的3瓶KYSE150细胞,采用流式细胞仪检测KYSE150细胞凋亡率及细胞周期分布的情况。 3 Bcl-2, Bax和CyclinD1 mRNA在熊果酸处理前后的表达变化采用RT-PCR检测常规培养人食管癌细胞系KYSE150细胞,对照组加入RPMI-1640培养液,实验组加入终浓度为10、20、30、40、50μmol/L的熊果酸作用于细胞48小时后,各收集对照组和实验组3瓶KYSE150细胞,用RT-PCR技术检测Bcl-2, Bax和CyclinD1 mRNA表达情况。 4数据应用SPSS 13.0软件统计分析,率的统计学分析采用X2检验,多组间的比较采用单因素方差分析。以α=0.05为检验水准,当P0.05为差异有统计学意义。 结果 1 MTT:结果表明熊果酸对食管癌KYSE150细胞具有增殖抑制作用,且呈浓度及时间依赖性,差异有显著性(P0.05)。熊果酸处理24、48和72小时后的IC50分别为84.14μmol/L,36.72μmol/L和25.06μmol/L。50μmol/L熊果酸作用72小时后,KYSE150细胞增殖几乎停止。 2 FCM:结果表明经40μmol/L熊果酸作用KYSE150细胞后,随着时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,S期细胞的比例逐渐下降,G0/G1期细胞的比例逐渐增加,主要呈现G0/G1期阻滞,并存在时间依赖性。 3 RT-PCR:结果表明经熊果酸作用KYSE150细胞48小时后,随着药物浓度的增加Bcl-2 mRNA表达降低,Bax mRNA表达增加,Bcl-2/Bax比值降低,CyclinD1 mRNA表达降低。 结论 1 MTT试验结果提示熊果酸在体外具有抑制人食管癌细胞株KYSE150增殖的作用,且具有时间剂量依赖性。 2流式细胞结果提示,熊果酸作用人食管癌细胞株KYSE150细胞后,可以明显影响其细胞周期,将KYSE150细胞阻滞于G0/G1期,其机制为熊果酸降低了食管癌细胞周期调节关键基因CyclinD1 mRNA的表达。 3流式细胞术分析显示熊果酸可以诱导人食管癌细胞株KYSE150凋亡。其机制为熊果酸减少Bcl-2 mRNA和增加Bax mRNA的表达水平,降低Bcl-2/Bax的比值,是熊果酸对食管癌发挥抗肿瘤作用的分子机制。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735.1

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 张奕颖;邓涛;胡志芳;张秋萍;张静;江华;;熊果酸抑制胃癌细胞SGC7901增殖和诱导细胞凋亡的机制[J];癌症;2006年04期
2 樊明文,王茜,边专,范兵;熊果酸对人舌鳞癌细胞株TSCCa的抑制作用及其机制探讨[J];武汉大学学报(医学版);2004年01期
3 张静,邓涛,陈会敏,胡志芳,张奕颖,罗和生,张秋萍;熊果酸抑制胃癌细胞BGC-823增殖并诱导凋亡[J];武汉大学学报(医学版);2005年03期
4 张秋萍,谢珞琨,邓涛,胡志芳,陈会敏,谭锦泉;熊果酸促进K562细胞凋亡[J];基础医学与临床;2004年04期
5 李希波;孙雪飞;尹秋伟;王德江;;熊果酸体内抗肺癌作用机制探讨[J];山东大学学报(医学版);2007年02期
6 吴其年,黄炜,黄敏珊,张志凌,罗惠玲,张东方,杨凤仪;熊果酸对人乳腺癌细胞增殖、凋亡和细胞内游离Ca~(2+)的影响[J];肿瘤学杂志;2004年03期
7 郑杰,周传农,萧枫,王秀琴;Rb、p16、细胞周期素D1蛋白在食管癌中的表达及其意义[J];中华病理学杂志;1996年06期
8 ;Effects of ursolic acid and oleanolic acid on human colon carcinoma cell line HCT15[J];World Journal of Gastroenterology;2002年03期
9 ;Anti-hepatoma activity and mechanism of ursolic acid and its derivatives isolated from Aralia decaisneana[J];World Journal of Gastroenterology;2006年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李晓昀,苏敏,黄天华;食管癌相关基因研究进展[J];癌变.畸变.突变;2001年01期
2 关爽;卢静;刘静波;;杜香熊果酸提取物对小鼠遗传损伤的保护作用[J];癌变.畸变.突变;2009年01期
3 李宏杨;刘飞;张凤琴;李小龙;刘国民;;冬青科苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸含量的测定[J];安徽农业科学;2010年14期
4 王春雷,芦柏震,侯桂兰;熊果酸抗肿瘤作用研究进展[J];安徽医药;2005年10期
5 沈为栋,廖金辉,李康华,黎岳南,沈明;Rb与cyclinD_1在骨肉瘤中的表达及其意义[J];癌症;2000年06期
6 李扬,丘钜世,梁惠珍,罗灿峤,朱全胜,曾瑜;骨肉瘤中Rb、p16、CDK_4、cyclinD_1蛋白的表达及其意义[J];癌症;2000年06期
7 吴梨;赵伟;杨瑞金;;从枇杷叶中分离提取熊果酸的研究进展[J];北京工商大学学报(自然科学版);2011年06期
8 施峰;贾晓斌;贾东升;陈彦;黄洋;许巧梅;;白花蛇舌草预防肺癌物质基础研究[J];中华中医药杂志;2010年03期
9 刘毅敏;张定林;肖湘;刘海红;赵先英;;熊果酸抗肿瘤作用及其机制研究进展[J];重庆医学;2012年04期
10 王晓芹;曹波;高宁;;熊果酸诱导人急性白血病细胞凋亡及其作用机制[J];第三军医大学学报;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 李科;吾鲁木汗.那孜尔别克;陈功锡;姚福成;恩特马克.布拉提白;;HPLC法检测药用白花泡桐熊果酸及木犀草素的含量[A];2010植物提取物与营养及应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
2 虞燕霞;梁中琴;顾振纶;殷江临;;熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及周期的影响[A];2010年江苏省药学大会暨第十届江苏省药师周大会论文集[C];2010年
3 张晓喻;张宏;黄春萍;陶宗娅;崔盛;黄洪;;枇杷花的调查和研究进展[A];第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集[C];2007年
4 虞燕霞;梁中琴;顾振纶;殷江临;;熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
5 陈武;熊筱娟;李开泉;张绍良;徐军;龚海忠;;乌索酸的化学、药理及临床研究[A];2001’全国药用植物与中药院士论坛及学术研讨会论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王树栋;四种植物源化合物对甜菜夜蛾酚氧化酶的影响及酶免疫学研究[D];山东农业大学;2010年
2 郭万松;熊果酸对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及其机制研究[D];吉林大学;2011年
3 王冠梁;熊果酸通过PPARα/γ信号转导通路改善KKA~y小鼠胰岛素抵抗的机制研究[D];第二军医大学;2011年
4 李爱霞;熊果酸对人舌癌Tca8113细胞增殖、凋亡的影响及机制的实验研究[D];郑州大学;2010年
5 刘含茂;中药活性成分分子印迹聚合物的制备、识别机理与应用研究[D];湖南大学;2009年
6 王雯;反流性食管炎及其并发Barrett食管、食管腺癌的机理研究[D];第二军医大学;2001年
7 陈斌;蓝桉果实活性成分的研究[D];第二军医大学;2002年
8 邢国宏;Ⅰ期低分化肺腺癌基因表达谱及Cyclin D1、MMP-2和pRb表达的临床意义[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
9 刘玉明;蓝桉果实化学成分及质量控制研究[D];第二军医大学;2004年
10 闫天中;前列腺癌雄激素非依赖的发生机理及熊果酸治疗作用的实验研究[D];第三军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李剑萍;熊果酸和环氧化酶-2抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
2 张杰;大鼠肝脏缺血再灌注损伤时齐墩果酸对氧自由基的影响[D];南京医科大学;2009年
3 赵思成;熊果酸对人皮肤鳞癌的抑制作用及机制研究[D];南京医科大学;2010年
4 宋蕾蕾;熊果酸衍生物的合成与表征及抗癌、抗菌活性研究[D];辽宁师范大学;2010年
5 温媛媛;山茱萸中熊果酸的提取分离及其抗氧化活性研究[D];安徽农业大学;2010年
6 张会从;清肺合剂抑瘤及抗转移实验研究[D];浙江中医药大学;2010年
7 王丽梅;散结止痛巴布剂药学及初步药效学的研究[D];山东中医药大学;2010年
8 宋志成;齐墩果酸的结构修饰及活性研究[D];大连理工大学;2011年
9 周冠月;清开灵注射液中多肽含量的快速测定及杂质蛋白的限量检查[D];北京中医药大学;2011年
10 郭宝凤;25-乙酰基-7,8二去氢—升麻醇-3-木糖苷对HepG2的细胞毒性及其作用机制初探[D];北京中医药大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 黄炜,黄济群,张东方,张瑞玲,廖兆全;五环三萜类化合物抗人肺癌细胞侵袭和诱导细胞凋亡的研究[J];中国肺癌杂志;2003年04期
2 夏国豪;熊果酸抗肿瘤作用研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年06期
3 李振光,彭旭;线粒体与细胞凋亡[J];基础医学与临床;2001年05期
4 王韻,汪炳华,陈丽达,张冀,曹金秀,李小明;花生四烯酸诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤和凋亡[J];基础医学与临床;2004年01期
5 张秋萍,谢珞琨,邓涛,胡志芳,陈会敏,谭锦泉;熊果酸促进K562细胞凋亡[J];基础医学与临床;2004年04期
6 王茜,樊明文,边专,彭彬,范兵;中药NZ有效部位ZD的提取分离及抗炎免疫作用[J];口腔医学纵横;2001年04期
7 王兵,王杰军,徐钧,高勇,许青,陈万生;熊果酸对体外血管形成的抑制作用[J];肿瘤防治杂志;2001年04期
8 刘宇军,王国民,贾永锋,张永康;MTT法在榄香烯乳对人膀胱癌T_(24)细胞体外实验中的应用[J];上海医科大学学报;1997年02期
9 熊筱娟,陈武,李开泉,徐晓清;乌索酸毒性实验研究[J];宜春医专学报;2001年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙绍谦;刘復生;吴遐;古美慈;;五例食管与贲门部双原发癌的病理观察[J];中国肿瘤临床;1964年04期
2 方大维;何天骐;郑国柱;王泰来;朱天荣;;结肠代食管术治疗食管癌中的并发症及死亡原因探讨[J];广东医学;1965年S5期
3 ;全国中西医结合防治食管癌经验交流学习班情况[J];新医学;1972年10期
4 王瑞林;食管癌的药物治疗概况(上)[J];癌症;1982年04期
5 韩学德;崔光辰;孟祥诚;陈茂华;郑庆林;;食管贲门癌X线和手术所见与组织学差异的分析[J];滨州医学院学报;1987年04期
6 邵梦扬;;中药天仙丸治疗食管癌临床疗效观察[J];肿瘤学杂志;1987年S1期
7 王祖浴;;4—4 放射治疗食管癌非模拟机定位方法探讨[J];中国医学物理学杂志;1987年Z1期
8 杨民生,五兆星,王经建,刘金安,万贵良,窦云喜,王爱芬,王冬果,李明鹤,李翠珍,郑安平;1160例食管癌放射治疗10年疗效[J];中华放射肿瘤学杂志;1992年03期
9 周素英;;内镜诊断食管癌250例临床分析[J];川北医学院学报;1993年01期
10 董新军;陈书栋;;食管癌并肺转移生存5年以上2例[J];中国肿瘤临床;1993年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 林东昕;;遗传多态与食管癌[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年
2 王玉分;;PET/CT在食管癌分期诊断中的价值[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
3 王军;韩春;李晓宁;高超;张辛;;食管癌调强放射治疗初期疗效分析[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年
4 ;食管癌高、低发地区食物中几种微量元素含量的測定[A];中国生理科学会第二届全国营养专业学术会议论文摘要汇编[C];1979年
5 汪文莉;李文奇;郭秋峰;宋洪欣;乔玉斗;;锁骨上预防照射对食管癌病人预后的影响[A];中国民政康复医学第五届学术会议论文汇编[C];1999年
6 高剑波;武明辉;杨学华;陈学军;周志刚;郭华;岳松伟;;食管癌螺旋CT征象与uPA表达间关系的研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编(上册)[C];2006年
7 周政华;;氨基酸与食管癌之间的关系及其在治疗中的意义[A];第二届中国西部营养学术会议专题报告及论文摘要汇编[C];2006年
8 高玉仙;;食管癌患者放疗中的心理护理[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
9 陈洪岩;刘芝华;;S100A14 G972A基因多态与食管癌遗传易感性的关系[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2007年
10 陈彪;;浅谈中药治疗食管癌的神奇疗效[A];第六届中国科学家论坛论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 唐石初;“感觉”食管癌[N];大众卫生报;2003年
2 记者 陈婉婉;食管癌易感基因首次被发现[N];安徽日报;2010年
3 高书明;食管癌偏爱哪些人[N];民族医药报;2003年
4 南京81医院全军肿瘤中心 副主任医师 张传生;怀疑食管癌 应做哪些检查[N];家庭医生报;2003年
5 马明林;食管癌验方二则[N];民族医药报;2000年
6 通讯员 程守勤;近八成食管癌病人营养不良[N];家庭医生报;2009年
7 通讯员 丁皓 记者 倪秀萍 实习生 徐小杰;食管癌首进“肿瘤杀手”前三[N];南京日报;2010年
8 高春东;认识食管癌[N];中国中医药报;2004年
9 记者 乔地;我科学家发现两个食管癌易感基因[N];科技日报;2010年
10 记者 苏迅 通讯员 朱如海;北大肿瘤中心安阳食管癌研究基地滑县监测站揭牌[N];安阳日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 叶波;食管癌(ADH1B)单核苷酸多态性与食管癌发病风险研究[D];中国协和医科大学;2010年
2 王大虎;端粒酶和PinX1基因在食管癌中的表达及生物学意义[D];河北医科大学;2011年
3 刘亮;耐药基因ABCG2在食管癌中的表达及青蒿琥酯逆转耐药的作用研究[D];河北医科大学;2010年
4 陈晓华;5-氨基乙酰丙酸—光动力疗法对人食管癌效应及其机制研究[D];南方医科大学;2010年
5 任鹏;RNA干扰HIF-1α对食管癌放射敏感性影响的实验研究[D];天津医科大学;2009年
6 李卫东;中国北方食管癌的遗传流行学和分子遗传学研究[D];中国协和医科大学;1997年
7 陈晓;哈萨克族食管癌发病的分子生物学机制研究[D];新疆医科大学;2002年
8 王波;西安和林州市食管癌P53基因突变及其与环境致癌因素之间关系的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
9 许智雄;人食管癌表达下调基因的克隆及其结构分析[D];中国协和医科大学;1999年
10 冯滨;食管癌p73基因表达与突变的研究及临床意义[D];第三军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卢丹;熊果酸对食管癌KYSE150细胞增殖、凋亡的影响及其机制[D];郑州大学;2010年
2 李月考;食管癌组织中△Np73和p73在转录水平的表达状况及相关性研究[D];河北医科大学;2004年
3 孙桢;TFPI-2和SNCG在食管癌中的表达及其与食管癌浸润、转移和细胞凋亡之间的关系[D];郑州大学;2010年
4 赵萌;ERK表达及活化在食管癌进展过程中的作用机制研究[D];河北医科大学;2010年
5 杨荣水;~(18)F-FDG PET/CT在食管癌靶区勾画及评价食管癌早期放疗响应中的应用[D];福建医科大学;2010年
6 陈强;豫西地区食管癌中HPV感染和hTERC基因的关系[D];河南科技大学;2011年
7 陈迪;MRTL通过启动子甲基化抑制FLJ22139基因在食管癌中的表达水平[D];暨南大学;2011年
8 孙凤飞;hPer1、hPer2节律基因对食管癌放射敏感性的影响[D];川北医学院;2011年
9 张翠红;食管癌术前CT扫描与术后病理诊断淋巴结转移对照研究及其预后因素分析[D];河北医科大学;2010年
10 李永春;食管癌组织中MT-3和P53蛋白表达的相关性研究[D];河北医科大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026