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《郑州大学》 2010年
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N-乙酰半胱氨酸对大鼠亚硒酸钠性白内障防治作用的实验研究

谭楠  
【摘要】: 研究目的 观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)对亚硒酸钠诱导的大鼠白内障的预防和治疗作用,为白内障的药物防治提供实验依据。对象与方法 (一)预防作用实验 10天龄SD大鼠30只随机分3组: 正常对照组-1(Al组):每日腹腔注射0.1ml/10g体重剂量的生理盐水,1次/日,共注射6天。 亚硒酸钠组(B1组):按3.46mg/kg(即20μmol/kg体重)颈部皮下注射亚硒酸钠,隔日一次,共注射3次。注射亚硒酸钠30分钟内,按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水,共注射6天。 NAC预防组(C1组):给10天龄SD大鼠按3.46mg/kg(即20μmol/kg体重)颈部皮下注射亚硒酸钠,隔日一次,共注射3次。注射亚硒酸钠30分钟内,按0.1ml/10g体重的剂量腹腔注射浓度为2mmol/L的试剂NAC,1次/日。共注射6天。 (二)治疗作用实验 白内障模型制备:10天龄SD大鼠30只,按3.46mg/kg(即20μmol/kg体重)颈部皮下注射亚硒酸钠,隔日一次,共注射3次。将造模成功的大鼠随机分为病理对照组(15只)和NAC治疗组(15只) 病理对照组(B2组):每日腹腔注射0.1ml/10g体重的生理盐水,共注射1月。 NAC治疗组(C2组):按0.1ml/10g体重的剂量腹腔注射浓度为2mmol/L的试剂NAC,1次/日。共注射1月。 正常对照组-2(A2组):选预防实验中5只正常对照组大鼠,继续按0.1ml/l0g体重的剂量腹腔注射生理盐水,1次/日。共注射30天。 大鼠睁眼后裂隙灯下定期观察大鼠晶状体的浑浊情况并拍照;最后一次注药后,分批处死大鼠,取出眼球,分离晶状体。光镜和扫描电镜下观察晶状体上皮组织学和超微结构的改变;免疫组化观察亚硒酸钠对晶状体上皮细胞中caspase-3的影响。生化方法测定亚硒酸钠对大鼠晶状体组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。 结果 小剂量隔日颈部皮下注射20μmol/kg亚硒酸钠溶液均可安全地诱导出大鼠白内障动物模型。 1.裂隙灯观察:亚硒酸钠组和病理对照组大鼠晶状体混浊情况持续性加重,在注药后第3天大部分晶状体核出现环状或尘埃状混浊,七天均形成典型的核性白内障,正常对照组晶状体均保持透明,未见混浊;预防组晶状体混浊程度低于亚硒酸钠组,而高于正常对照组;治疗组大鼠晶状体混浊程度与相应的病理对照组无明显差异。 2.光镜和扫描电镜观察:正常对照组晶状体组织结构基本正常,其他各组晶状体超微组织结构有不同程度的改变。其中预防实验中,亚硒酸钠组损伤最重,NAC预防组次之,正常对照组最轻,三组差别显著。治疗试验中,病理对照组和NAC治疗组无明显差异。 3.免疫组化观察:晶状体上皮细胞caspase-3在正常对照组呈阴性表达,平均光密度为250.319±2.347;NAC预防组呈弱阳性表达,平均光密度值为180.942±4.379,在亚硒酸钠组呈强阳性表达,平均光密度值为70.312±14.216,三组比较差异均有有显著性意义(P0.05);在NAC治疗组和病理对照组均呈强阳性表达,平均光密度值分别为100.467±4.477,71.437±11.329,两组比较,差异无统计学意义(P0.05),但两组分别与正常对照组相比差异具有统计学意义(P0.05) 4.生化指标分析:NAC预防组晶状体中的SOD的活性高于亚硒酸钠组(P0.05),而低于正常对照组(P0.05);NAC治疗组晶状体中的SOD的活性明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P0.05),而与相应的病理对照组比较无明显差异(P0.05)。NAC预防组晶状体中的MDA含量低于亚硒酸钠组(P0.05),而高于正常对照组(P0.05)。NAC治疗组晶状体中的MDA含量与相应的病理对照组比较无明显差异(P0.05)。 结论 1.对SD大鼠皮下小剂量多次注射亚硒酸钠可成功制备硒性白内障模型。 2.亚硒酸钠可引起LECs凋亡 3.NAC可以通过提高晶状体组织中SOD的活性,减少MDA生成,降低caspase-3的活性来减轻亚硒酸钠引起的晶状体损伤。 4.NAC对早期白内障的发生、发展有一定的延缓和预防作用。 5.试剂NAC对于已经形成的硒性白内障无明显的治疗作用。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R776.1

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