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《郑州大学》 2010年
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农杆菌介导的Ac/Ds转座系统转化甘蓝型油菜的研究

徐娟  
【摘要】: 突变体是指某个基因发生变异或某个性状发生可遗传变异的材料,我们可以利用这些突变材料来分离和鉴定基因的功能油菜是世界上最重要的油料作物之一,长期以来对其研究的主要目标就是要阐明控制其重要农艺性状的遗传基础并克隆相关基因。但近年来有关构建油菜突变体库的研究却鲜见报道,这无疑阻碍了油菜功能基因组学的发展。为开展油菜功能基因组学研究使得大规模构建油菜突变体库显得日益迫切。自玉米Ac/Ds转座子系统发现以来,已经被成功应用于水稻、拟南介、番茄、烟草等多种异源植物进行基因的分离与克隆。利用Ds因子可以在Ac转座酶的作用下发生跳跃的特性,探索将此系统应用在油菜中来构建突变体库,为研究油菜基因功能提供研究材料。近十年来,油菜在转基因方面取得了重大进展,油菜的转基因研究和分子克隆取得了令人瞩目的成就,使油菜的品质和种质资源得到改良。农杆菌介导法是油菜遗传转化最常用的方法,它是一种纯生物的天然转基因方法,操作简单,成本低,使它成为目前应用最广泛的遗传转化方法之一。 本研究利用农杆菌介导法将含有Ac元件的质粒pUbiAc及含有Ds元件的质粒pDsBar1300分别转化甘蓝型油菜中双6号的子叶柄与下胚轴,经过筛选、生根、驯化、移栽,分别获得了10株转化Ac的卡那霉素抗性植株和28株转化Ds的潮霉素抗性植株。PCR检测发现,在10株Ac转化植株中有1株为阳性苗,阳性率为10%;在28株Ds转化植株中有21株阳性苗,阳性率为75%。该结果为我们下一步构建油菜突变体群体及开展油菜功能基因组学研究将可能开辟一个新的途径。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S565.4

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