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《郑州大学》 2010年
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PLGF、Bcl-2及FasL在胎儿生长受限中的研究

张林东  
【摘要】: 胎儿生长受限(fetal growth restriction,简称FGR)是指孕37周后,胎儿出生时体重小于2500g;或者低于同孕龄平均体重的两个标准差;或者低于同孕龄正常体重的第10个百分位数。其发病率2.75%~15.53%不等,并且围产儿的死亡率为正常儿的4~6倍,是引起围产期的重要并发症之一,居围产儿死亡原因第二位。他不仅导致胎儿发育异常,远期也影响儿童期及青春期的体能与智能发育,心血管及糖尿病等患病率也明显升高。胎儿生长受限的病因在国内外已有较多的研究,但目前病因仍不十分明确。 目的 为探讨FGR孕妇母血、脐血中胎盘生长因子(placenta growth factor,PLGF)水平及胎盘组织中的Bcl-2 (B-cell lymphoma/lenkemiaz, Bcl-2)与FasL (Fasrymndrit Fas, FasL)表达情况,以及探讨三者间的相关性及其在FGR发生中的作用。 材料与方法 1研究对象 选择郑州大学第三附属医院2008年7月至2009年5月住院分娩的FGR孕妇40例,同期住院的正常孕妇(对照组)30例。两组孕妇平均年龄为(27.35±2.46)岁,平均孕龄为(38.52±1.28)周。所有孕妇均为单胎、初产妇、月经周期规律、排除肝肾功能异常、无任何妊娠合并症和并发症、无宫缩、剖宫产分娩者。 2标本采集 孕妇分娩前抽取肘静脉血3ml,胎儿娩出后立即抽脐静脉血3ml。标本采集后经离心(3000r/min,10 min),吸取上清液后放入-80℃冰箱冻存待检。胎盘自然娩出后迅速取母体面中央(避免钙化灶)处约1.0cm×1.0cm×1.0cm小块组织,标本采集后立即用生理盐水冲洗,洗净血液后置入10%甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片。常规HE染色,分别观察胎盘组织形态以判断切片好坏。 3结果判定 用酶联吸附试验(ELISA)检测两组脐血、母血血清中PLGF浓度,用免疫组化SP法检测胎盘组织中Bcl-2、FasL表达。以PBS液代替一抗作阴性对照,并设阳性对照,实验步骤严格按照产品说明书操作。 胎盘组织中细胞膜和/或细胞浆呈黄色或棕黄色颗粒者为阳性表达,以阳性区平均灰度值为检测指标。每张免疫组化切片随机选取5个具有代表意义的高倍视野(10×40),计算其阳性区平均光密度值。采用上海山富科学仪器有限公司的Biosens Digatal Imaging Systerm对两指标进行灰度值分析。 4统计学方法 采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析,所有数据均采用(x±s)表示,并且对数据进行正态性检验,两个均数间比较采用t检验,两因素相关性采用直线相关分析。检验水准a=0.05。 结果 1两组研究对象一般资料比较:FGR组与对照组相比,年龄和孕周的差异无统计学意义(P0.05)。 2 PLGF在两组母血、脐血中的表达比较:FGR组与对照组相比,FGR组明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。 3 Bcl-2在两组胎盘组织中的表达:在正常组胎盘组织中Bcl-2阳性表达于细胞胞浆或细胞膜,在FGR中相对于正常组织显示弱阳性低表达。FGR组和对照组胎盘组织每高倍镜视野平均灰度值分别为(59.77±9.77)、(79.45±7.19);
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