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《郑州大学》 2010年
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老年性聋大鼠耳蜗中AQP1,AQP4的表达

申金金  
【摘要】: 目的 老年性聋的患者日益增多,严重影响了老年人的生活质量,但老年性聋的发病机制尚不完全清楚,而水通道蛋白(Aquaporin, AQP)作为水通道主要作用在于参与水分子的跨膜转运,且已被证实在哺乳动物内耳有多种亚型的分布,而且内淋巴容积及内环境的稳定对正常的听力及平衡功能的维持是至关重要的,所以推测AQP对听力功能可能起着重要的作用。本实验通过检测水通道蛋白1 (AQP1)及水通道蛋白4 (AQP4)在老年性聋大鼠耳蜗中的表达情况,以期探讨老年性聋可能的发病机制,为今后研究老年性聋的治疗方法提供科学依据。 材料和方法 将30只成年、健康的Wistar大鼠随机分为两组:实验组和对照组,每组15只。称取每只动物的体重,实验组按照300mg/Kg的计量标准,腹腔注射D-半乳糖溶液(40mg/ml),每天2次,连续4周,对照组按同样的方法每天注射等量的生理盐水。用药前后各组动物都分别进行听性脑干反应(ABR)测试。大鼠腹腔内注射10%水合氯醛,剂量为0.1ml/300g,麻醉成功后,用生理盐水及4%多聚甲醛PBS液依次全身灌注,然后迅速断头,取出听泡并去除大部分多余骨质,在解剖过程中发现有中耳炎病史的大鼠的耳蜗标本弃用,然后将耳蜗标本置于10%EDTA液中脱钙10天,每天更换脱钙液直至耳蜗标本脱钙完全,修剪标本后用石蜡包埋,连续切片,用AQP抗体行免疫组化染色。计算机图像处理系统进行分析,SPSS统计软件进行统计学分析。 结果 实验组于用药后ABR反应阈值明显提高,潜伏期延长。各组动物耳蜗中AQP4于螺旋神经节细胞及Cortis'器Hensen细胞和Claudius细胞中均有分布,且实验组免疫组化阳性反应物的IOD值(积分光密度)比对照组降低,差异有统计学意义(仄O.05)。AQPt则在血管纹处呈阳性反应,但实验组IOD值较之对照组无明显改变(p0.05)。 结论 AQP1、AQP4在大鼠耳蜗中有明确的分布,AQPl在血管纹处呈阳性反应,而AQP4则存在于螺旋神经节细胞及Cortis'器的Hensen细胞和Claudius细胞中。在老年性聋大鼠的耳蜗中,AQP4呈下调的趋势,而AQPl无明显变化。AQP亚型在耳蜗表达水平的变化可能改变耳蜗中的水平衡及内环境的稳定,从而影响其听力功能。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R764

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【参考文献】
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