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《郑州大学》 2010年
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猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究

史平玲  
【摘要】: IgG Fc受体(Fcγreceptors,FcγRs)可特异亲和免疫球蛋白IgG(IgG, Immunoglobulin G)Fc片段,是非常重要的免疫细胞表面分子,在机体免疫防御中有很重要的作用,是细胞免疫和体液免疫的桥梁。研究发现FcγRs具有修复炎性损伤、吞噬作用、抗体依赖细胞毒作用、释放炎性介质和调节B细胞活性等功能,是哺乳动物免疫应答的重要组成部分。FcγRs是治疗自身免疫性疾病、过敏、癌症等免疫疾病理想的药物靶标。 家畜FcγRs的研究比人与小鼠滞后,但近年来也有很大进展,一些家畜FcγRs基因先后被克隆,生物学特性方面研究也取得进步。猪IgG Fc受体由三类分子组成:FcγRⅠ(CD64).FcγRⅡ(CD32).FcγRⅢ(CD 16).其中FcγRⅢ(CD16)为50-80 kDa的膜糖蛋白,在巨噬细胞、肥大细胞和PMN细胞中都有表达,是唯一在NK细胞上表达的Fc受体。FcγRⅢ有两个Ig样胞外区结构域,是中低亲和力受体。猪FcγRⅢA是首个克隆的家畜FcγRⅢ基因,在多形核细胞(PMN, polymorphonuclear)中为45 kDa糖蛋白,其胞内区与FcRγ链或其它亚基相连,只有通过共转染FcRγ链,才能在细胞表面表达FcγRⅢA. 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以母猪流产和仔猪呼吸障碍为主要特征的传染病,是困扰中国和世界养猪业的主要传染病。PRRSV具有抗体依赖性增强作用(ADE)、病毒容易变异、存在持续感染性及免疫抑制等免疫特性,其中ADE是困扰PRRS防控的最主要问题。目前有关PRRS ADE的分子机制研究较少。 ADE主要由Fc受体介导,为研究猪FcγRⅢ在介导PRRS ADE中的作用,本研究构建了猪FcγRⅢ和FcRγ链基因真核表达质粒,共转染Marc-145细胞,通过潮霉素B和G418连续双抗性筛选和克隆获得一株稳定表达猪FcγRⅢ的Marc-145细胞系。用PRRSV BJ-4株与1600倍稀释的抗PRRSV IgG等体积混合后感染克隆化的Marc-145细胞系,与空白对照相比,有抗体存在时PRRSV感染获得的PRRSV病毒量更高,证明了猪FcγRⅢ能够介导PRRSV抗体依赖增强作用.本试验通过研究PRRSV和Fc受体之间的相互作用,初步揭示PRRSV抗体依赖增强作用的分子机制,为研制开发新型疫苗、新型免疫佐剂和抗病毒药物提供理论依据,为进一步研究打下基础。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.28

【参考文献】
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