收藏本站
《郑州大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

幽门螺杆菌iceA基因相关的致病机制

马一君  
【摘要】:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一种专寄生于人胃黏膜的革兰阴性微需氧菌,世界上至少有50%人口感染H. pylori。许多研究表明,H. pylori感染后可导致胃炎和消化性溃疡等疾病,而且是胃癌、初级B淋巴瘤、硬化性胆管炎等疾病的重要因素。H. pylori的感染和发病涉及多个毒力因子。H.pylori接触胃粘膜上皮后可诱导表达一种毒力相关因子----粘膜接触诱导因子,是独立于cagA和vacA之外的一个重要毒力相关基因,由iceA (induced by contact with epithelium, iceA)基因编码,包括iceA1、iceA2两种等位基因。该基因可能通过调控相关毒素基因的表达等机制,参与Hp的致病作用。有研究发现,iceA基因与消化性溃疡及IL-8的黏膜浓度增高显著相关,而IL—8在H. pylori所致相关性炎症及疾病中发挥着重要作用。虽然国内外研究人员针对iceA基因与H. pylori所致临床疾病的相关性进行了大量研究,认为iceA基因(包括iceA1和iceA2基因)是慢性胃炎和十二指肠溃疡特异性相关基因,是一种与炎症和免疫损伤有关的毒力因子。但是iceA基因生物学功能及其致病机制仍不十分清楚。 研究首先利用郑州市慢性萎缩性胃炎患者幽门螺杆菌临床分离株MEL-H.pylori 27,对iceA基因进行了克隆和序列分子特征分析;又根据同源重组原理,利用分子生物学方法进行了Hp27 iceA基因的插入失活突变,构建了iceA基因的Hp27突变株;然后进一步比较遗传背景相同的野生株和构建的Hp27 iceA基因突变株的重要特性,包括菌株的尿素酶活性、与细胞体外共培养时对胃粘膜上皮细胞的形态特征、细胞周期、增殖、凋亡等特性的影响;比较野生株和突变株对细胞的黏附性以及诱导细胞产生炎性细胞因子IL—8能力等炎症相关因素。为阐明iceA基因的功能及参与Hp致病的分子机制奠定了重要的实验基础。 方法 1幽门螺杆菌菌株的培养及基因组DNA的制备 将临床分离株MEL-Hp27(Hp27)接种于布氏平板上,37℃微需氧条件下培养。3d后收获细菌,提取基因组DNA。 2 Hp27 iceA基因的克隆 2.1引物设计及PCR扩增 参照GenBank公布的H.pylori菌株的iceA基因及其上下游核苷酸序列设计引物,用于扩增包括iceA基因在内的基因序列,扩增片段长度约790 bp。 2.2 iceA基因克隆与测序 PCR产物回收纯化后与pMD19-T载体连接并转化大肠杆菌DH5α,筛选含重组质粒的阳性克隆,测序并分析。 2.3基因序列特征分析 从GenBank上检索H.pylori菌株的iceA基因的同源基因序列,用Clustal W软件对检索到的基因序列进行多重序列比较,应用MEGA4.0等软件对基因及相应氨基酸序列进行同源比较,并构建系统发生树进行分析。 3 iceA基因打靶载体的构建 3.1将重组质粒pMD19-T-iceA及质粒pBluescript SKⅡ(一)分别酶切并连接,构建重组质粒pBS-iceA。 3.2将重组质粒pBS-iceA和卡那霉素抗性基因扩增产物酶切并连接,构建出带卡那霉素抗性标记的突变打靶载体pBS-iceA-km。 4 iceA基因突变株的构建与鉴定 采用电穿孔方法将打靶载体pBS-iceA-km电转化入受体菌株野生型Hp27中,在普通布氏平板上培养48h,然后转涂于含卡那霉素布氏平板上继续培养3-5d,筛选出iceA基因突变株,经PCR及测序进行鉴定。 5野生株和iceA基因突变株特性比较 5.1采用尿素酶活性诊断试剂,检测和比较野生株Hp27和Hp27 iceA插入失活突变株的尿素酶活性差异。 5.2将细菌与SGC7901细胞共同培养一定时间,观察和比较细胞形态学变化。 5.3采用MTT比色法,检测野生株Hp27和Hp27 iceA插入失活突变株对SGC7901细胞增殖活性的影响并分析比较。 5.4流式细胞仪检测野生株、突变株与SGC7901细胞共培养一定时间后细胞周期的改变并分析比较。 5.5流式细胞仪检测野生株、突变株与SGC7901细胞共培养一定时间后细胞的凋亡率并分析比较。 6 iceA基因的炎症相关因素研究 6.1 Hp诱导SGC7901细胞分泌细胞因子IL-8的分析 H. pylori27野生株与突变株分别与细胞共培养一定时间,诱导细胞分泌IL-8。收集培养上清液,用ELISA试剂盒定量检测IL-8的浓度并分析。 6.2 H. pylori 27野生株与突变株对胃粘膜上皮细胞的黏附作用分析 野生株与突变株分别与细胞共培养一定时间,用免疫学方法处理,在荧光倒置显微镜下观察,流式细胞仪检测并分析其粘附率。 7统计学分析处理 应用SPSS11.0软件分析各指标数据,计量资料以x±S表示,两组之间的比较采用t检验;多组之间的比较,根据资料特点分别采用单因素方差分析或重复测量的方差分析;两两比较采用最小显著差法(LSD),检验水准取a=0.05。 结果 1幽门螺杆菌分离株MEL-Hp27 iceA基因克隆及分析 成功克隆幽门螺杆菌Hp27菌株iceA基因序列,扩增产物大小约为790 bp;重组质粒pMD19-T-iceA单酶切产生3820 bp片段,双酶切产生3000 bp和820 bp的2个片段;Hp27 iceA基因与大多数美国来源菌株同源性较高,均大于85%,与日本、印度等地区来源菌株同源性小于70%;Hp27 iceA基因一10区(TATA)位于起始密码子ATG上游的17bp处,起始密码子上游—7nt处有一个SD序列,起始密码子和上游cysE基因之间有两个8bp的串联可重复序列,其它地区分离菌株与Hp27 iceA基因特征有差异。 2 MEL-Hp27 iceA基因突变株的构建 采用基因重组的方法将卡那霉素抗性基因插入目的基因序列中,构建了突变打靶载体pBS-iceA-km;通过电穿孔转化方法将突变载体转化进入野生株,筛选出iceA基因突变株。用iceA基因两端序列设计引物分别扩增突变株和野生株的基因组DNA,结果突变株的扩增片段长度比野生株长约800bp,且突变株能扩增出卡那霉素抗性基因片段,野生株则不能。扩增产物的测序结果证明卡那霉素抗性基因插入目的基因序列中。 3野生株和iceA基因突变株尿素酶活性比较 将构建的突变株和野生株分别与尿素酶试剂作用,立即引起明显的颜色改变,野生株25min完全分解尿素酶试剂达到其最大吸光度值,且在此之前其吸光度值均高于突变株组。突变株组在50 min达到其最大吸光度值,且在作用25min后的吸光度值均高于野生株组,但两组之间的差异无统计学意义。 4 iceA基因对SGC7901细胞生长的影响 H.pylori突变株组和野生株组引起相似的细胞形态学改变,细胞拉伸,出现蜂鸟样改变;细菌和细胞共培养12h和18h,与对照组相比细胞活力轻度增加。共培养24h后,与对照组相比细胞活力则下降。在细菌与细胞共培养12h、18h、24h,野生株组和突变株组细胞增殖活性与空白组相比,差异无统计学意义(P0.05);培养30h和36h各组细胞的增殖活性差异有统计学意义(P0.05),其中,培养30h时突变株组的细胞增殖活性高于野生株组(P0.05);与对照组相比,野生株对细胞周期的影响主要表现为G2期的阻滞;而突变株对细胞周期的影响主要表现为S期的阻滞;野生株组和突变株组均可以诱导细胞产生明显凋亡,共培养24h及48h的凋亡率均高于对照组凋亡率(P0.05),但野生株组和突变株组之间凋亡率的差异无统计学意义(P0.05)。 5 iceA基因的炎症相关因素研究 将H.pylori分别与SGC7901细胞共培养8h和24h后,检测诱导IL-8的浓度,野生株组和突变株组与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。共培养8h野生株组和突变株组之间,差异无统计学意义(P0.05),但共培养24h后,野生株组和突变株组间差异有统计学意义(P0.05);荧光显微镜下显示野生株和突变株均迅速粘附在SGC7901细胞表面,野生株和突变株的粘附率分别为32.49±2.96%和25.03±2.74%,但二组间差异无统计学意义(P0.05)。 结论 1来自不同地区的幽门螺杆菌分离菌株iceA基因序列的分子特征有差异。 2 Hp27菌株和Hp27 iceA基因突变株可以抑制SGC7901细胞增殖并诱导细胞凋亡;iceA基因的插入失活突变明显改变细胞增殖和细胞周期特征,对细胞凋亡率和粘附率的影响无统计学意义。 3 Hp27菌株和Hp27 iceA基因突变株均可以诱导SGC7901细胞产生IL-8, iceA基因的插入失活突变导致细胞产生IL-8的浓度明显减少。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R378

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李建伏;郭茂祖;;系统发生树构建技术综述[J];电子学报;2006年11期
2 林燕芬;龚四堂;区文玑;潘瑞芳;王凤华;周荣;何婉儿;黄海;陈佩瑜;陈宝心;梁文青;;广州地区儿童感染幽门螺杆菌iceA基因亚型与胃炎的相关性研究[J];广东医学;2007年02期
3 刘彦琦;苏秉忠;宋建忠;;内蒙古地区幽门螺杆菌iceA基因型的分布[J];内蒙古医学杂志;2008年12期
4 张影;朱力;袁静;刘先凯;冯尔玲;王恒樑;朱厚础;;弗氏2a志贺氏菌2457T株yciD基因缺失突变株的构建[J];生物技术通讯;2006年04期
5 庄坤;张军;张玲霞;张沥;张建中;;西安地区幽门螺杆菌iceA1、iceA2和babA2基因型与致病性的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年06期
6 张彩凤;夏永华;韩宇;常廷民;;幽门螺杆菌iceA基因型与胃黏膜病变的相关性[J];世界华人消化杂志;2008年20期
7 张建中,蒋秀高,陈晶晶,孙兆军,盛涛;幽门螺杆菌的低温保存方法[J];华人消化杂志;1998年12期
8 李红艳;夏启胜;徐梅;房青;徐波;陈志华;向青;;MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究[J];中国康复医学杂志;2005年11期
9 卢笛;袁伟建;张桂英;;生存素、Bcl-2在幽门螺杆菌诱导胃癌细胞增殖和凋亡中的表达[J];中华消化杂志;2006年05期
10 张茂俊;何利华;王振宇;周增芬;张建中;;幽门螺杆菌中国菌株致病相关基因cagA、iceA、vacA及HP0519分布分析[J];中华流行病学杂志;2006年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王仙云;郭爱军;熊自忠;;幽门螺杆菌致胃癌的相关研究进展[J];安徽医药;2011年05期
2 向浏欣;谭军;;浅谈系统发生树构建方法[J];才智;2009年20期
3 邓淑华;高巍;杨鹤松;孟艳彬;;MTS/PMS比色分析方法测定LA795细胞活性的实验条件[J];承德医学院学报;2006年04期
4 周颖;黄瑛;邵彩虹;王小卉;张冰峰;;上海地区部分儿童幽门螺杆菌cagA、vacA、iceA基因型别分析[J];中国当代儿科杂志;2010年04期
5 刘清雪;孙宏彬;;基于自适应遗传退火的简约树启发搜索策略[J];电脑知识与技术;2010年32期
6 马一君;段广才;张荣光;张卫东;郗园林;;幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响[J];第三军医大学学报;2010年19期
7 赵建邦;高琳;宋佳;;一种基于代谢路径构建系统发生树的有效方法[J];电子学报;2009年08期
8 樊卫红;李珊姗;刘杰;;儿科病房痰培养肺炎链球菌耐药性分析[J];中国儿童保健杂志;2010年08期
9 林妙端;佘菲菲;;幽门螺杆菌毒力基因与胃癌的研究进展[J];福建医科大学学报;2009年03期
10 林燕芬;龚四堂;区文玑;潘瑞芳;王凤华;周荣;何婉儿;黄海;陈佩瑜;陈宝心;梁文青;;广州地区儿童感染幽门螺杆菌iceA基因亚型与胃炎的相关性研究[J];广东医学;2007年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 邹权;刘晓燕;曲延云;王其聪;;基于仿射空隙罚分和k-band的相似多DNA序列星比对算法[A];Proceedings of 2010 International Conference on Services Science, Management and Engineering(Volume 2)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张荣光;幽门螺杆菌omp11和lpp20基因的克隆及表达产物免疫原性和保护效果研究[D];郑州大学;2004年
2 郭刚;人幽门螺杆菌蒙古沙鼠适应性定植相关蛋白的鉴定及功能研究[D];第三军医大学;2004年
3 燕永亮;斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501的基因组学研究[D];中国农业大学;2005年
4 曾浩;有氧胁迫下幽门螺杆菌球形变异相关蛋白的鉴定及功能研究[D];第三军医大学;2006年
5 段文元;B7-H4 cDNA的克隆、重组腺病毒的制备及其在肿瘤免疫逃逸机制中作用的初步研究[D];第三军医大学;2006年
6 蒋卫东;内皮细胞特异性分泌分子EGF-like domain 7(EGFL7)的初步研究[D];山东大学;2006年
7 徐荣旗;野油菜黄单胞菌野油菜致病变种新的依赖于Ⅲ型分泌系统的效应物的鉴定[D];广西大学;2006年
8 张会东;赖型钩端螺旋体毒力相关基因ompl17的蛋白质功能学研究[D];四川大学;2006年
9 王欣莹;问号钩端螺旋体鞭毛相关基因flhA、flhB和fliR突变株的构建及其功能的初步研究[D];吉林大学;2006年
10 黄志刚;幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)致病的分子机制研究[D];郑州大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卓立;中国滨藜亚科的地理分布与分子系统学研究[D];新疆农业大学;2010年
2 康峰;朱砂安神丸中朱砂的安全性评价[D];贵阳中医学院;2010年
3 周丽;一种新的促进体外培养肝细胞活性及增殖的方法[D];重庆大学;2006年
4 陶利萍;幽门螺杆菌对人胃上皮细胞动力学的影响及其作用机制探讨[D];浙江大学;2007年
5 潘扬莎;中国大头蚁属和盘腹蚁属(膜翅目:蚁科:切叶蚁亚科)昆虫系统分类研究[D];广西师范大学;2007年
6 刘亚强;东方粘虫细胞原代培养及几种天然活性物质的细胞毒性测定[D];西北农林科技大学;2007年
7 陈德超;三水白虎汤对滑膜成纤维细胞增殖和一氧化氮生成的抑制作用[D];南方医科大学;2007年
8 王春路;利用ITS序列和matk序列探讨中国部分原生棕榈科植物的亲缘关系[D];厦门大学;2007年
9 柳旺艳;化合物OCAM抗肿瘤作用的实验研究[D];吉林大学;2008年
10 陈诚;广西两地异盘并殖吸虫分子系统发生研究[D];广西医科大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张莉,林三仁,金珠,叶嗣懋,丁士刚;幽门螺杆菌的cagA基因和iceA基因与胃十二指肠疾病的关系[J];北京医科大学学报;2000年02期
2 李靖炎;削偶合今祖法的提出[J];动物学研究;1992年04期
3 代敏;幽门螺杆菌分子流行病学研究进展[J];国外医学(流行病学传染病学分册);2001年04期
4 严英;幽门螺杆菌毒力因子的研究进展[J];国外医学(流行病学传染病学分册);2002年01期
5 王恒,冯尔玲,史兆兴,姚潇,苏国富,黄留玉;用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因[J];军事医学科学院院刊;2002年03期
6 方蓉,李芳秋,武建国;MTT比色法的条件探讨[J];临床检验杂志;2003年01期
7 汪雪峰;王克霞;李朝品;;淮南地区幽门螺杆菌感染情况及其相关疾病的调查[J];热带病与寄生虫学;2004年02期
8 葛堂栋,冯尔玲,晏本菊,王恒睴,黄留玉;痢疾杆菌酸抗性系统相关基因缺失突变体的构建[J];生物技术通讯;2005年05期
9 张彩凤;林志辉;;幽门螺杆菌iceA、cagA相关性研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;2006年06期
10 胡堃,史兆兴,王恒樑,冯尔玲,黄留玉;Red重组系统在痢疾杆菌基因敲除中的应用研究[J];微生物学报;2003年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张丹;段茂华;孙军德;;耐高糖、高渗透压D-核糖高产菌株的选育及其发酵培养[J];氨基酸和生物资源;2007年01期
2 刘金林;郭毅;谭臣;陈砚;贝为成;陈焕春;;胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxIV基因缺失突变株的构建和鉴定[J];畜牧兽医学报;2008年05期
3 刘小兰;刘剑潇;汤琳;钟华;刘智峰;傅海燕;徐祥民;曾光明;;诱变技术及其在获取生物表面活性剂高产菌中的应用[J];微生物学杂志;2008年03期
4 闵伟红;林小秋;冯琦;曲佳乐;胡耀辉;;抗蛋氨酸结构类似物突变株的筛选[J];吉林大学学报(理学版);2009年04期
5 胡森;郑孝辉;王加兰;张倩;刘文兴;王喜军;乔祖建;刘林涛;高红霞;王君伟;步志高;;马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定[J];中国预防兽医学报;2009年08期
6 Paramesvaran J;陶源;;用两种不同的定向进化策略获得底物特异性提高的一些突变株的酶残基分布[J];中国医药工业杂志;2011年01期
7 覃玲灵;何钢;陈介南;;里氏木霉及其纤维素酶高产菌株的研究进展[J];生物技术通报;2011年05期
8 张用梅,陈宗胜;苏芸金杆菌的选育[J];遗传;1981年01期
9 钱海伦;;沙雷氏菌(Serratia marcescens)色素合成能力接合转移的分析[J];中国药科大学学报;1984年03期
10 ;食品上的应用[J];生物技术通报;1989年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王艳尊;高媛媛;施巧琴;吴松刚;黄建忠;;酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6突变株的构建及hxt1基因的过表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年
2 田从魁;崔承彬;李长伟;;金灰青霉H4的链霉素抗性突变株新产抗肿瘤产物研究[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
3 田从魁;崔承彬;李长伟;;产紫青霉G59的链霉素抗性突变株新产抗真菌产物研究[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
4 古力孜拉;史博;热依汗古丽;吾甫尔·米吉提;;莱茵衣藻(Chlammydomonas reinhardtii)野生型和不同突变株对NaCl抗性检测分析[A];中国第六届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2004年
5 王长军;董瑞萍;潘秀珍;王晶;唐家琪;;突变株的构建及其生物学特性研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
6 何秀萍;刘增然;刘春秀;张博润;;酵母菌细胞自溶突变株的研究[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
7 贝为成;何启盖;方六荣;金梅林;周锐;陈焕春;;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxII基因无药物抗性标记突变株HBC~-/GFP~+的构建及其生物学特性研究[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
8 张辉;肖少波;方六荣;赵骞;薛念波;陈焕春;;伪狂犬病毒UL14基因缺失影响病毒的增殖和细胞间扩散[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
9 张金辉;窦颖;佘薇薇;赵耀;刘平;赵晓东;;人类偏肺病毒F蛋白糖基化位点对其体内外复制能力的影响[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
10 贝为成;何启盖;陈焕春;徐晓娟;洪文洲;方六荣;肖少波;宋云峰;;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌武汉株apxⅡ~-/Amp~r突变株的构建及其安全性和保护性测定[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 知陶;罂粟突变株新发现:强力镇痛不成瘾[N];医药经济报;2004年
2 丹正;功能性大米基尔米实现产业化生产[N];粮油市场报;2005年
3 记者 耿建扩 蔺玉堂;“表达凝血八因子新的重组质粒”成功研制[N];光明日报;2006年
4 岳梅;海正药业诱变育种使阿卡波糖产量增加[N];中国医药报;2005年
5 严少慰;查游离DNA 肺癌有望早发现[N];健康报;2008年
6 新欣;乙肝表面蛋白有望“预告”肝癌发生率[N];医药经济报;2004年
7 王国明;亚健康:生命的隐形杀手[N];中国工商报;2001年
8 记者 张月亭;TG生产菌空间育种效果显著[N];中国食品质量报;2003年
9 庄愉 编译;卡介苗 日见失效 防结核 谁能担纲[N];医药经济报;2002年
10 ;核苷类三剑客比试乙肝用药市场[N];医药经济报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马一君;幽门螺杆菌iceA基因相关的致病机制[D];郑州大学;2010年
2 戴银;鸡MHCⅠ类分子结构与抗病性关系的研究[D];安徽农业大学;2010年
3 崔福爱;BMP-6和VEGF表达载体的构建及其促进成骨作用的实验研究[D];山东大学;2010年
4 常彬霞;细胞色素P450 3A4、谷胱甘肽硫转移酶A1基因转染人肝细胞系的建立及功能测定[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
5 司有辉;谷氨酰胺合成酶GlnA及其转录调节因子GlnR对2型猪链球菌致病力影响的研究[D];华中农业大学;2009年
6 管莹;与HSV-1 UL31相互作用的宿主蛋白TMEM140生物学功能研究[D];北京协和医学院;2011年
7 王文东;致病性大肠杆菌菌壳的研究[D];吉林大学;2010年
8 向隆宽;卡特利链霉菌A520基因文库的构建以及硫霉素生物合成基因的初步研究[D];中国协和医科大学;1998年
9 孙莹;Stat3特异性SiRNA抑制胃癌SGC-7901细胞生长的体内外实验研究[D];吉林大学;2010年
10 吴初新;鱼类PKZ(Protein Kinase Containing Z-DNA Binding Domain)Zα与Z-DNA的结合[D];南昌大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周泉;构建假单胞菌突变株M18GQ携带重组质粒pME6032Phz的工程菌株及响应面法优化吩嗪-1-羧酸发酵条件的研究[D];上海交通大学;2010年
2 李茜;pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒的构建及其在小鼠精子内的表达[D];青岛大学;2010年
3 张战锋;细胞周期依赖性蛋白激酶2重组质粒的构建与表达[D];广州中医药大学;2011年
4 杨锋;重组肾上腺髓质素对大鼠皮瓣缺血再灌注的保护作用[D];南华大学;2011年
5 刘玲娟;DNA甲基转移酶1在同型半胱氨酸致人脐静脉平滑肌细胞增殖中的作用研究[D];宁夏医科大学;2011年
6 杨媚娜;β转化生长因子受体Ⅱ启动子荧光素酶报告基因重组质粒的构建[D];吉林大学;2012年
7 魏溦;成纤维细胞生长因子受体2启动子荧光素酶报告基因重组质粒的构建[D];吉林大学;2012年
8 郝燕霞;IL-24联合顺铂抑制宫颈癌裸鼠移植瘤生长的初步研究[D];山西医科大学;2011年
9 朱凡;副血链球菌粘附素Fap1糖基化相关基因-nss的功能研究[D];河南科技大学;2010年
10 王朝霞;IL-24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨[D];山西医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026