干细胞转录调控因子SOX2在食管鳞癌中的表达与临床预后的关系

【摘要】：背景 在发展中国家,尤其是中国,食管鳞癌是常见的恶性肿瘤。在世界范围内,食管鳞癌的发病率和死亡率很高,在中国常见恶性肿瘤导致的死亡中占第四位。最近的流行病学调查发现,食管鳞癌的发生率在增加。尽管治疗食管鳞癌的方法不断提高,但是食管鳞癌患者的预后仍然很差,5年生存率仍然很低。食管鳞癌的预后差与缺乏早期的诊断策略有关,大多数病人确诊时疾病已进入中晚期,放化疗并不能提高患者的总生存期(OS),这促使研究者寻找新的分子预后标记来确定有高危因素的患者,以期达到改善食管鳞癌患者预后的目的。 正常细胞经过多次的基因突变发生恶变,从而导致肿瘤的发生。理论上来讲,细胞的分化程度越低,越容易发生癌变,据此推测,干细胞是最易发生癌变的细胞。肿瘤中也有肿瘤干细胞的存在。肿瘤干细胞也称为癌干细胞,是指在肿瘤细胞中占有极小的一部分,但却具有自我更新、向多种细胞分化的能力等干细胞样的特性。大多数肿瘤干细胞处于静止状态,因此,虽然他们在肿瘤组织中所占的比例极少,但却能够逃避化疗药物的杀伤作用,因为化疗药物仅对快速分裂的细胞发挥攻击作用。所以人们认为肿瘤干细胞是导致肿瘤耐药、复发的根源,在肿瘤的发生发展及转移中发挥着重要作用。 干细胞转录调控因子SOX2属于B组SOX (SRY-like HMG box)基因家族的一员,具有高度稳定性的DNA结合域,发挥调节细胞分化及增殖的功能,对维持胚胎干细胞的全能性和自我更新以及诱导干细胞的传代至关重要。人和鼠在大脑上皮和后神经管(包括神经管、海马、小脑和脊髓)的整个发育过程都有SOX2的表达。另外,在眼睛发育过程中,尤其是晶状体、视神经网膜和视神经的发育过程中,存在SOX2的持续表达。内胚层衍生的器官,比如气管、食管、胃等在胚胎发育过程中有SOX2的表达。在食管中,SOX2在细胞的分化和形态的形成过程中发挥重要作用。肿瘤细胞,尤其是低分化和未分化的肿瘤细胞,其细胞表型与胚胎干细胞有许多相似之处,比如均具有分裂增殖和自我更新的能力,这些相似性说明肿瘤细胞中基因的表达参与了干细胞性状的调控。越来越多的研究表明,干细胞转录调控因子SOX2在肿瘤组织中有表达。目前已证实的有乳腺癌、肝癌、软组织肉瘤、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、生殖细胞瘤以及肺癌等。据报道,SOX2可促进多种肿瘤的转移；有研究者发现,在乳腺癌和前列腺癌细胞中,SOX2通过Wnt/β-catenin通路促进上皮细胞向间充质细胞转化,从而促使肿瘤发生转移。故SOX2可能在肿瘤的发生发展及转移中发挥重要作用。 干细胞转录调控因子SOX2在不同分化程度的食管鳞癌细胞系和食管鳞癌组织中的表达情况以及SOX2在食管鳞癌发生发展过程中发挥的作用,国内外的报道仍然较少。本研究旨在通过检测SOX2在高、中、低分化三株食管鳞癌细胞系和不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达情况,来分析SOX2的表达与食管鳞癌患者的临床病理因素及预后的关系,希望能够为食管鳞癌患者的早期诊断和预后的判断提供理论依据。 目的 检测干细胞转录调控因子SOX2在高、中、低分化三株食管鳞癌细胞系和不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达情况,分析SOX2的表达与食管鳞癌患者临床病理因素及预后的关系,为食管鳞癌的早期诊断和判断患者预后提供理论依据。 方法 分别采用免疫细胞化学、Western-blot、Real-time PCR的方法检测干细胞转录调控因子SOX2在高、中、低分化三株食管鳞癌细胞系(KYSE450、KYSE140、 KYSE70)中的表达情况；另外,采用免疫组织化学的方法检测SOX2在79例食管鳞癌组织中的表达情况,并结合食管鳞癌患者8年的随访资料,分析SOX2的表达与食管鳞癌患者的临床病理特征及预后的关系。 结果 1免疫细胞化学、Western-blot、Real-time PCR的结果均显示： SOX2在高、中、低分化三株食管鳞癌细胞系(KYSE450、KYSE140、KYSE70)中均有不同程度的表达。 2免疫组织化学的结果显示：SOX2在食管鳞癌组织的胞核中表达。48(60.76%)例为阴性或弱阳性,19(24.05%)例为中等阳性,12(15.19%)例为强阳性。 3干细胞转录调控因子SOX2的表达水平仅与食管鳞癌的分化程度负相关,而与性别、年龄、淋巴结转移、血管侵犯、TNM分期等其他临床病理因素无相关性。另外,SOX2的表达还与患者的总生存负相关,是影响食管鳞癌患者预后的独立危险因素,其相对风险度为1.962。 结论 1干细胞转录调控因子SOX2在高、中、低分化的三株食管鳞癌细胞系和不同分化程度的食管鳞癌组织中均有不同程度的表达。 2干细胞转录调控因子SOX2的表达水平与食管鳞癌的分化程度呈负相关,是影响食管鳞癌患者预后的独立危险因素,与食管鳞癌患者的不良预后相关。