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《郑州大学》 2003年
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牛肾上腺髓质嗜铬细胞蛛网膜下腔移植对大鼠的镇痛作用

史帅涛  
【摘要】: 背景和目的 肾上腺髓质嗜铬细胞移植于病人蛛网膜下腔,能产生镇痛作用。但人的嗜铬细胞来源困难,限制了其在临床的广泛应用,学者们转而寻求用动物细胞取代人的细胞进行异种移植。牛的肾上腺髓质细胞与人的髓质细胞有相似的功能,且来源广泛,易分离获取而被采用。国内学者也对牛肾上腺髓质嗜铬细胞用于大鼠移植进行了研究,但其描述多停留在痛觉行为学改变上。本实验采用分离纯化的牛肾上腺髓质嗜铬细胞(BCC),移植入大鼠脊髓蛛网膜下腔,观察BCC对大鼠急、慢性痛的镇痛效应,以及镇痛效应持续的时间;观察注射纳洛酮和酚妥拉明后对BCC引起的镇痛效应的影响;同时检测大鼠脑脊液中儿茶酚胺及脑啡肽含量的变化,直接反映BCC分泌所引起的镇痛效应,探索其镇痛机制,为异种嗜铬细胞的临床应用提供理论依据。 方法 采用胶原酶消化、密度梯度离心及二次接种纯化等方法获得高纯度的BCC。BCC的纯度用多巴胺β羟化酶(DβH)抗体进行免疫组化染色来鉴定。活率用0.4%台盼蓝染色鉴定。 动物分组:80只成年Sprague-Dawley大鼠,随机分为移植组和对照组。移植组大鼠作为牛嗜铬细胞移植的受体,向蛛网膜下腔植入20μ 1BCC悬液,含细胞4×10~7个;对照组大鼠,植入等量的DMEM液。每组又分为4个亚组(2周组、4周组、6周组和8周组)。 热痛阈测定:用甩尾试验检测大鼠对急性热刺激的反应,单次切断时间不超过15秒,共测试3次,取平均值。以移植手术前痛阈为基础痛阈,单次切断时间为最大耐受痛阈,求出抗热 郑州大学2003届硕士研究生学位论文 伤害效应。计算公式为:抗热伤害效应二(本次热痛闽一基础热痛闭)/(最大耐受痛闽 一基础热痛闽)x 10既。移植组和对照组在接受移植术后,每周测量一次,共测8周。 福尔马林实验:移植手和周后,大鼠右狈垢爪掌狈组皮下注射50 p 15%的福尔马林,人 工评估法测量注射福尔马林后一个小时以内的痛觉行为,娜;冲扣为一个时间段,每个时间段 取1分钟进行各级瘩翩了为持续时间的记录,并进钓劝口权评分。痛反应平均加权评分二艺pt /6O,其中p为大鼠伤害性痛行为的评分,t为该行为的持续时间(秘。以痛反应平均加权 评分作为大鼠伤害性行为的乎剖际来进行分析。观察者不知道实验分组及给药清况。阻街济日试 验:移植手才招周后,移植组大鼠随机分为三个亚组,每亚组10只,在注射尼古丁前,分别皮 下注射纳洛酮(2叹扩喃)、酚妥拉明(1 omg/kg)和生理盐水。然后进行福尔马材喇激试验。 观察两种药物刘福尔马林诱发的痛觉反应的影响。 用恒流泵将人工脑脊液灌入蛛网膜下腔,冰浴下收集脑脊液灌流液约lml,沸水灭活、离 心后,上清液冷冻干燥,并保存于币0℃待测。放射免疫技术(RIA)检测亮氨酸脑叫瞰含量; 高效液相色谱(HP旧检测儿茶酚胺含量。 结果 1.急性热刺激反应:对照组几乎为零,而移植组第一周抗热伤害效应为。.6368,第二 周为0.6735,以后几周呈下降趋势,至第八周降至0.456。移植组抗热伤害效应明显高于汉寸 照组(P0 .05),并持续8周;八周组抗热伤害效应小于二周组(P0 .05)。说明B优植入大鼠 的蛛网膜下腔对大鼠的急性痛有镇痛作用,且这种作用随时间而祠妈马。 2.福尔马林试验:移植组第一时相的急性痛反应评分和第二时相的慢性痛反应评分均 低于对照组(P0 .01)。而在静息期,两组评分无显著差别(P0 .05)。说明植入的B戊刘大 鼠福尔马材冲0激试验的急性痛阶启吓日慢险痛阶段都育铲生镇痛作用。阻断试验中,急性期的 镇痛效应能被阿片受体拮抗剂纳洛酮翻转,也能被a:受体阻断剂酚妥拉明部分翻转 (P0 .05)。而慢性期的镇痛效应不明显(P0 .05)。提示植入的B优分泌的胆洲哪洪和儿茶 酚胺类活性成分参与镇痛过程的调节,但两种物质的作用机韦怀同;植入的B优对急性痛阶 第2页 摘要 段和慢性痛阶段的镇痛机制也不同。 3.脑脊液灌流液中亮氨酸脑叫瞅的含童:移植组大鼠脑脊液中亮氨酸脑叫汤冶量在二 周组为17.08 pg/ml,四周组为13.35 pg/ml,六周组为11.53 pg/ml,八周组为12.25pg/ml, 对照组含量最高为7.13Pg/m1。对照组亮氨酸脑叫哪冶量明引氏于移植组(P0 .01)。移植 组亮氨酸脑叫敝含量总体呈下降趋势。二周组亮氨酸脑叫哪冶量高于2调组(P0 .05),但 相邻组别之间相比较无明显差别(P0 .05)。 4.脑脊液灌流液中儿茶酚胺的含量:移植组大鼠脑脊液中儿茶酚胺含量在二周组为 1590.14ng/ml、四周组为1445.44ng/ml、六周组为1173.15ng/m1、/调组为983.82ng/m1, 对照组含量最高为637.77。对照组儿茶酚胺含量明引氏于移植组(P(0.01)。移橙卿L茶 酚胺含量总体呈下降趋势。二周组儿茶酚胺含量高于六周红呀口八周组(P0 .05),但相邻组 别之间相比较无明显差别(P0.05)。 结论 1.纯化的阳喇灌叭大鼠蛛网膜下腔,对急性痛动物模型翅尾试验有明显的韧甫效果, 对慢性痛动物模型福尔马林试验也有明显的镇痛作用,且这种镇痛作用随时间逐枷翻马。 2.福尔马林试验的急性痛阶段可以招啊片类受体拮抗剂纳洛酮所翻转,也育劫妓a:受体 拮抗
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R329

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 Gregory Johnson MD ,梁万年,耿荣;慢性疼痛[J];中国全科医学;2002年09期
2 王丽梅,陈连璧,张秀琳,赵建华;同种异体肾上腺髓质植入蛛网膜下腔治疗大鼠慢性痛的实验研究[J];山东医科大学学报;2001年04期
3 吕捷,张进禄,赵春礼,段春礼,徐群渊;牛嗜铬细胞体外培养及其分泌多巴胺的测定[J];首都医科大学学报;2000年03期
4 郑恒兴,吕岩,秦秉志;足底伤害性刺激条件下大鼠腰骶髓SP、CGRP、L-ENK样神经成分的变化[J];神经解剖学杂志;1996年01期
5 王航;NMDA受体和一氧化氮在外周传入冲动的产生和脊髓背角内痛信号传递中的作用[J];山西医科大学学报;2000年S1期
6 马骏毅;在脊髓水平由去甲肾上腺素和5-羟色胺引起的抗痛作用中阿片样物质只对前者起介导作用:大鼠福尔马林试验的电生理观察(英文)[J];山西医科大学学报;2000年S1期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王文;蔡锦方;;药物缓释微囊化技术在周围神经修复中应用的研究进展[J];实用医药杂志;2006年08期
2 张晓英;杨国栋;佘永华;蔡昌平;;疼痛模型大鼠下丘脑和脊髓P物质的含量变化[J];四川解剖学杂志;2008年01期
3 于巍;刘德明;;微囊技术及其在神经损伤修复中的应用[J];四川解剖学杂志;2008年01期
4 孙雪,奚廷斐;海藻酸钠微囊制备方法及应用的研究[J];生物医学工程与临床;2005年06期
5 梁宜;方剑乔;;5-羟色胺痛觉调制与针灸镇痛相关研究[J];上海针灸杂志;2009年08期
6 郑恒兴,武胜昔,吕葆真,秦秉志;足底伤害性刺激条件下大鼠腰骶髓背根节内SP mRNA和α-CGRP mRNA的表达[J];神经解剖学杂志;1997年02期
7 李杨;袁斌;唐敬师;;电刺激和损毁丘脑中央下核对大鼠福尔马林诱发伤害性行为的影响(英文)[J];生理学报;2007年06期
8 董惠均,赵鹏,王卉,贾士儒;均聚氨基酸及其应用[J];食品科学;2003年03期
9 周国兴;余清平;刘求梅;彭薇;曾志成;;福尔马林致痛对大鼠脊髓和背根神经节的P2X3的影响[J];现代生物医学进展;2007年07期
10 陈丽娜;尚飞;王晓东;耿勇;姜源;雷亚萍;钱春梅;;微囊化异种细胞免疫隔离作用的研究进展[J];陕西医学杂志;2008年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 马建敏;刘德明;;微囊化雪旺细胞移植研究进展[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年
2 金小亚;陈永平;王晓东;金益辉;朱碧红;;动态监测急性肝衰竭大鼠微囊化肝细胞移植后HMGB1的变化及意义[A];第十次浙江省中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈蕾;非动物源性新型载体的研制及其对磺胺类药残检测特性的影响[D];华南理工大学;2011年
2 崔晓鲁;侧脑室注射抗生长抑素血清在炎症痛及针刺镇痛中的作用机制[D];山东中医药大学;2011年
3 李梢;类风湿性关节炎从“络”辨治及寒热方剂作用机理研究[D];北京中医药大学;2001年
4 贺石生;髓核在坐骨神经痛发病中的作用及其机制研究[D];第二军医大学;2001年
5 朱明伟;APA微囊化BCC脑内移植治疗MPTP帕金森病样猴长期效应的研究:行为、功能影像及组织形态学观察[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
6 徐龙河;APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞移植的镇痛效应及其机理的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
7 刘袖洞;膜乳化内部凝胶化过程及海藻酸钙凝胶珠性能研究[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2002年
8 李晓声;控释抗生素微囊治疗慢性骨髓炎的实验研究[D];中南大学;2003年
9 孝作祥;持续释放内皮抑素及γ-干扰素的微囊化基因工程细胞的抗肿瘤研究[D];浙江大学;2003年
10 廖华;组织工程化人工松果体-大鼠松果体细胞微囊的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴芳;山羊松果体微囊化细胞异体移植的初步研究[D];华中农业大学;2010年
2 赵贞妍;肌筋膜疼痛触发点大鼠模型的肌电特征和病理组织学研究[D];上海体育学院;2010年
3 陈丹;新型基因药物载体材料[D];浙江大学;2010年
4 焦永康;吡虫啉微胶囊制剂的研究[D];河北农业大学;2011年
5 李静;人前脑啡肽原真核表达载体构建及其在HEK293细胞中的表达[D];山西医科大学;2011年
6 魏来;聚谷氨酸苄酯与丙烯酰胺共聚物的制备及体外释药行为研究[D];中北大学;2011年
7 田新玮;蓬草除痹汤对CIA大鼠血清炎性因子影响的实验研究[D];新疆医科大学;2011年
8 战祥毅;中药止痛巴布贴镇痛药效及毒副作用的实验研究[D];辽宁中医药大学;2011年
9 王晓华;针刺镇痛在体外受精—胚胎移植经阴道超声穿刺取卵术中的应用[D];山东中医药大学;2011年
10 陈解元;人前脑啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞系镇痛效应的研究[D];汕头大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 杜彦军;李继硕;秦秉志;;大鼠脊髓后角浅层内六种肽类和5-羟色胺的来源及其功能探讨[J];神经解剖学杂志;1987年01期
2 郑恒兴,吕岩,秦秉志;足底伤害性刺激条件下大鼠腰骶髓SP、CGRP、L-ENK样神经成分的变化[J];神经解剖学杂志;1996年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 史帅涛,臧卫东,李鸣,马钊,薛乐勋,杜百廉;蛛网膜下腔注入牛嗜铬细胞后大鼠脑脊液活性成分的变化[J];郑州大学学报(医学版);2004年04期
2 李金元;毕好生;江辉;巴秀云;;椎管腔移植嗜铬细胞后脑脊液中脑啡肽及儿茶酚胺浓度的变化[J];中华麻醉学杂志;1998年02期
3 华伟,高宝柱;生物细胞移植治疗慢性疼痛的新进展[J];中国煤炭工业医学杂志;2002年06期
4 丁丽华,于生元;牛嗜铬细胞蛛网膜下腔移植治疗三叉神经痛研究[J];中国疼痛医学杂志;2004年05期
5 李金元;彭书崚;江辉;毕好生;巴秀云;;蛛网膜下腔移植异体嗜铬细胞治疗神经性疼痛的实验研究[J];中华麻醉学杂志;1997年10期
6 杨茂元!430030武汉,李宏莲,毕好生!430030武汉,田玉科!430030武汉,向桂芳!430030武汉,丁素琴!430030武汉;肾上腺髓质和嗜铬细胞植入蛛网膜下腔后的存活能力比较[J];中华麻醉学杂志;2000年05期
7 高宝柱,肖琅,杜智;微囊肾上腺髓质嗜铬细胞蛛网膜下隙移植治疗晚期癌痛病人的疗效观察[J];天津医药;2002年05期
8 宋敏,臧卫东,马钊,李鸣,史帅涛,杜百廉;牛嗜铬细胞植入大鼠蛛网膜下腔的镇痛作用[J];郑州大学学报(医学版);2004年05期
9 冷思宏;嗜铬细胞移植治疗癌症疼痛的进展[J];现代康复;2001年10期
10 常洪山,王俊兰,申月霞;蛛网膜下腔出血患者心电图变化原因分析[J];山东医药;1998年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 程平瑞;孙来保;曹小龙;江伟航;黄政通;董静毅;;病人自控蛛网膜下腔吗啡镇痛治疗难治性晚期癌痛[A];中华医学会疼痛学分会第六届年会论文摘要[C];2005年
2 吴芬培;黄栋堂;杨上帝;何明亮;赵千山;;腰大池持续引流蛛网膜下腔及(或)脑室内出血28例临床分析[A];中国医师协会神经外科医师分会第二届全国代表大会论文汇编[C];2007年
3 胡明品;唐岩峰;秦培顺;何伟;;不同剂量芬太尼对腰硬联合阻滞罗哌卡因分娩镇痛效应的影响[A];2009年浙江省麻醉学学术会议论文汇编[C];2009年
4 章水娟;李萍;;经蝶垂体腺瘤切除术后蛛网膜下腔置管的观察与护理[A];全国外科、神经内外科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2007年
5 付志东;韩涛;;椎管内联合穿刺的临床应用[A];第二十三届航天医学年会暨第六届航天护理年会论文汇编[C];2007年
6 王保平;叶锦平;梅祎民;何士科;张翼;麻伟兴;罗鸣;余锋;黄学才;;1例罂粟碱蛛网膜下腔灌洗治疗大量自发性蛛血致严重脑血管痉挛的病例报告[A];2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编[C];2011年
7 刘彦;周颖;侯树勋;衷鸿宾;;蛛网膜下腔神经祖细胞移植治疗脊髓损伤实验研究[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
8 赵勇东;;8000例蛛网膜下腔注入罗哌卡因对剖宫产患者神经毒性的回顾综述[A];2009年西部麻醉学术论坛论文汇编[C];2009年
9 时宝宪;程介克;;芯片毛细管电泳分离儿茶酚胺和氨基酸神经递质[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
10 周云英;陈琇青;李英雄;;人类嗜铬性肿瘤细胞在长期培养下之形态及生化特徵—尤其著重於轴突之形成[A];海峡两岸电子显微学讨论会论文专集[C];1991年
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1 禾丰;头痛与蛛网膜下腔出血[N];农村医药报(汉);2007年
2 中国医学科学院神经科学研究所副所长教授 吴中学 中国医学科学院北京天坛医院神经介入科博士 刘爱华;当心蛛网膜下藏“炸弹”[N];大众卫生报;2005年
3 陈杏芳;手脚灵便也“中风”[N];大众卫生报;2008年
4 孔庚;病毒性心肌炎运动六注意[N];医药养生保健报;2007年
5 白毅;我国新建成五种脑出血动物模型[N];中国医药报;2005年
6 ;余述南:我已经走出了第一步[N];医药经济报;2004年
7 韩雪江;冠心病人运动中注意啥[N];医药养生保健报;2006年
8 苏魏;中风的真面目[N];民族医药报;2008年
9 全国疼痛诊疗研究中心主任 中日友好医院疼痛科主任医师 樊碧发;疼痛的常见误区[N];中国老年报;2005年
10 刘建民;蛛网膜下腔出血的研究方向[N];健康报;2006年
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1 樊俊;环中脑区蛛网膜与脑池的显微解剖学研究[D];南方医科大学;2011年
2 徐龙河;APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞移植的镇痛效应及其机理的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
3 黄宏平;蓝斑神经元去甲肾上腺素量子化释放的长潜伏期:大鼠脑片膜片钳-电化学联合记录研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2007年
4 王金伟;经颈静脉孔的后组颅神经相关膜性结构解剖及组织学研究[D];南方医科大学;2012年
5 李康安;VEGF反义核酸调控脑脊液源性转移的磁共振监测[D];复旦大学;2006年
6 黄齐兵;蛛网膜囊肿手术适应症及手术方式的研究[D];山东大学;2007年
7 刘力强;PKC抑制剂对蛛网膜下腔出血性脑血管痉挛的防治作用及分子机制的实验研究[D];河北医科大学;2003年
8 田英;儿茶酚胺类激素对THP-1细胞泡沫化的影响及其机理的研究[D];四川大学;2005年
9 王迎松;颈脊髓空洞症时骶棘肌失神经支配、脑脊液流动性改变与胸椎侧凸的相关性研究[D];昆明医学院;2011年
10 回建峰;微囊嗜铬细胞移植治疗疼痛的实验研究和临床应用[D];天津医科大学;2002年
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1 史帅涛;牛肾上腺髓质嗜铬细胞蛛网膜下腔移植对大鼠的镇痛作用[D];郑州大学;2003年
2 张晓慧;牛肾上腺髓质嗜铬细胞的分离纯化及其效果评价[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2004年
3 周玉梅;腰段蛛网膜下腔穿刺联合体位引流治疗术后脑脊液鼻漏[D];南京医科大学;2010年
4 车昊;纳洛酮皮下注射预防蛛网膜下腔吗啡所致皮肤瘙痒的临床观察[D];中国协和医科大学;2010年
5 符晓阳;牛肾上腺髓质细胞培养及药物对其分泌儿茶酚胺的影响[D];郑州大学;2003年
6 龚玲俐;全麻下不同潮气量机械通气对颅内压的影响[D];中南大学;2010年
7 朱德晓;硫化氢对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的影响及其机制研究[D];山东大学;2012年
8 丁丽华;三叉神经痛发病机制的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
9 张丕强;外部性脑积水颅脑B超的动态变化与临床研究[D];河北医科大学;2008年
10 吴宗辉;骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤的临床初步研究[D];重庆医科大学;2011年
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