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《郑州大学》 2003年
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食管鳞癌标本中C-myc、Rb、p16和CD44v6表达的定位分析

郭坤  
【摘要】: 食管上皮癌变被认为是一个多因素、多阶段、多基因变异积累及其相互作用的结果,形态学上食管上皮癌变可以经过基底细胞单纯增生(hyperplasia,HP)、不典型增生(dysplasia,DYS)、原位癌(carcinoma in situ,CIS)发展成浸润癌(invasive squamous cell carcinoma,SCC),其分子学机制尚不十分清楚。目前,采用不同的分子生物学技术,从不同水平对食管癌的研究正广泛而深入的进行着,其中免疫组化技术仍具有其独特的、不可代替的作用。此外,无论是“单纯取点”还是“由点到线”的取材方法,都会不同程度的丧失一些重要的内在信息。本研究旨在参考其它实验方法和结果的基础上,应用“由点到面”的思维,把免疫组化的范围扩展至食管癌全标本,同时检测C-myc、Rb、p16、CD44v6在食管癌标本不同区域(食管正常粘膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌)中的表达情况及其相互关系,并对结果进行定位分析,更加全面、精确的展现蛋白在不同区域的分布,从而加深对食管癌变分子学机制的了解,为进一步探讨食管癌的发生发展机制提供一定的参考价值。 材料与方法: 本研究对45例手术切除的食管鳞癌全标本进行研究,标本充分展开固定后,沿其长轴以间隔0.5cm的距离将食管切成数个长条组织,并顺次编号A,B,C,D……,随后将每长条组织从食管上端开始以间隔2.0cm的距离将其切成小块组织,并依次编号A_1,A_2,A_3,……,B_1,B_2,B_3,……,故每块小组织约为2.0cm×0.5cm大小。所有组织均经石蜡包埋、连续切片,进行组织病理学检查,部分切片做免疫组化枪查。依据组织病理学结果,绘制食管标本不同病变区域分 郑州大学2003年硕卜论文食管鳞燕标本中c一myc、Rb、pl6和cU闷4v6表达的定位分析 布平面图;免疫组化采用链霉卵白素一辣根过氧化物酶复合物(sP)法,检测c一myc、 Rb、P16、CD44v6蛋白在不同区域(正常粘膜、单纯增生、不典型增生、原位 癌及浸润癌)的分布情况。统计学分析采用wi Icoxon秩和检验和xZ检验,检验 标准取Q=0 .05。 结果: 1.45例食管鳞癌标本中有35例标本可见食管粘膜单纯增生(HP)、不典型增生 (DYS)、原位癌(CIS)到浸润癌(S Cq连续或间断的分布于整个食管,余下的 10例缺乏HP~DYS~CIS~SCC的连续病变,其中7例显示单纯增生和浸润 癌的分布,2例显示不典型增生和浸润癌的分布,1例仅仅显示浸润癌的分 布。 2.免疫组化测定发现: (l)C一myc阳性表达从食管正常粘膜到浸润癌组织呈渐进性增高伊0.01),C一myc 在正常粘膜上皮与单纯增生组织中的表达有差异俨司.026)。C一myc表达既可 见于细胞核,也可见于细胞浆,细胞浆出现阳性表达例数从DYS一CIS~SCC 逐渐增高,在食管癌组织中C一myc细胞浆阳性表达随着癌组织组织学分级 的升高而增加伊0.01),在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组伊0.01), 并且有随着浸润深度增加而增高的趋势;而c一myc在食管各种病变中的总 阳性率则与性别、年龄、大体分型、组织学分级、浸润深度及淋巴结转移状 况均无相关性。 (2)Rb阳性表达定位于细胞核,从N一HP一DYS一Cls~SCC其阳性表达呈渐 进性降低(P0 .01)。Rb在原位癌与浸润癌中的表达有显著差异(P二0.002)。 此外,在浸润癌中,Rb阴性的24例中C一myc阳性例数达到21例,两者 表达有负相关(尸0.01)。 (3)P16在食管不同病变组织中的表达无渐进性,在不典型增生组织中和在癌组 织中与Rb表达均呈负相关(P0.01)。P16在食管不同病变中的表达与性别、 年龄、大体分型、组织学分级、浸润深度及淋巴结转移状况均无相关性。 (勺CD44v6蛋白阳性主要见于细胞膜,也见于细胞浆,从N一HP一DYs一Cls 一SCC其阳性表达呈渐进性降低伊0.01),且在原位癌与浸润癌中的表达有 显著性差异(P0.01)。CD44v6表达与食管癌组织学分级、浸润深度和淋巴 郑州大学2003年硕卜论文食管鳞燕标本中C一myc、Rb、P16和CD44v6表达的定位分析 结转移状况均有负相关性(P0.01)。 3.通过绘图能直观的显示每一例食管癌大体标本中同一区域不同蛋白表达的 差异、同一种蛋白在不同区域表达的差异及同一种蛋白在同一种病变中表达 的差异。 结论: 1.“由点到面”的组织病理学分析得出:食管癌的形成是经历一系列形态学改 变的过程,食管上皮由单纯增生、不典型增生、原位癌到浸润癌是一个相互 连续的渐进过程。此外,单纯增生、不典型增生和原位癌分布于食管粘膜的 不同区域,进一步证实了食管鳞癌形成的多起点来源。 2.C一myc基因的激活可能是食管癌变的一个早期事件,是癌变原因之一而不是 癌变的结果;C一myc在细胞浆内的表达可能与食管上皮细胞的恶性转化有 关,且C一myc在细胞浆阳性表达比细胞核阳性表达更具侵袭、转移的恶性 生物学行为,可作为判断食管癌恶性程度的一个参考指标。 3.Rb可以在一定程度上反映病变的进程及严重程度。 4.P16虽然在食管癌前病变过程中己发生变化,但可能不是引起癌变的关键基 因
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R735.1

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【参考文献】
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