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离子束介导海藻糖合成酶基因转入小麦的抗旱性研究

李莉  
【摘要】: 根据小麦生产的发展现状和低能离子束介导转基因的原理以及海藻糖这一在自然界广泛存在的非还原性双糖在提高植物抗逆性方面的研究进展,以海藻糖-6-磷酸合成酶基因为基础,以提高小麦抗旱性为目的进行了相关的研究。 在试验中首先构建了海藻糖-6-磷酸合成酶基因(tps1基因)的植物表达载体,经酶切和PCR验证,确认tps1基因已构建到质粒pCAMBIA1303上。在建立了适合于品种为豫麦52的小麦成熟胚愈伤诱导和分化的组织培养体系和潮霉素抗性筛选体系后,借助低能离子束介导技术进行了遗传转化,即将带有tps1基因的植物表达载体导入小麦成熟胚,经过愈伤抗性筛选过程获得了一批再生植株。PCR检测结果显示有10株再生小麦呈阳性。在选择不同离子注入剂量和不同浸泡DNA时间的条件下,得到了不同的转化率,其中在注入剂量为1×10~(17)Ar~+/cm~2,浸泡时间为20h时,转化率达到最高值(1.20%)。在对再生小麦进行的抗旱性实验中,观察到转基因小麦受干旱胁迫的影响明显小于对照小麦。本实验为利用离子束技术将tps1基因转入小麦,培育抗旱耐盐的小麦新品种进行了有益的探索。


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