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《郑州大学》 2003年
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SV40、JCV和BKV与人胶质瘤病因的相关性研究

王莉  
【摘要】: 胶质瘤是常见的中枢神经系统肿瘤,严重危害着人类健康。目前对于胶质瘤的发生机制研究不明。肿瘤病毒是诱导细胞异常增殖和组织产生肿瘤的主要原因之一。多瘤病毒是一类常见的DNA肿瘤病毒,包括猴多瘤病毒40(Simian virus40,SV40)、人多瘤病毒JC病毒(JC virus,JCV)及BK病毒(BK virus,BKV)等。研究表明,这三种病毒均可诱导不同来源的细胞发生转化并使动物产生多种肿瘤。大T抗原(large tumor antigen,LT)是多瘤病毒主要的表达产物,可以结合肿瘤抑制蛋白P53和PRb并抑制其功能,使与增殖相关的基因表达,导致细胞增殖。本研究旨在通过检测人胶质瘤中SV40、JCV和BKV的表达情况,进一步阐明多瘤病毒与人胶质瘤病因的相关性,为胶质瘤的预防和治疗提供理论依据。 材料与方法:(1)组织标本来源于河南省人民医院2001~2002年手术切除的新鲜胶质瘤标本94例和来源于脑外伤的正常脑组织18例。所有标本一部分采用常规石蜡包埋,另一部分-80℃保存。(2)采用PCR方法检测SV40、JCV和BKV在肿瘤组织及正常脑组织中的病毒DNA;扩增产物经连接、转化、筛选和测序,对病毒基因序列进行分析。(3)采用免疫组织化学SP法检测SV40 LT蛋白表达情况。(4)统计学处理采用SPSS10.0版软件。统计方法采用x~2检验及fisher精确概率计算法,以α=0.05作为检验水准。 结果:(1)PCR结果表明,SV40在胶质瘤的检测阳性率为57.45%,在正常脑组织的阳性率为5.56%,两组之间比较差异有显著性(P<0.05)。胶质瘤中的星形细胞肿瘤、室管膜瘤和少突胶质细胞肿瘤SV40的阳性率分别为53.33%、比,差异无显著性(P>0.05)。JCV在胶质瘤中阳性率为48.94%,在正常脑组织 郑州大学2003年硕士论文 SV4O、JCV和BKV与人胶质瘤病因的相关性研究 中的阳性率为n.11%,两组之间比较差异有显著性(P0.05)。星形细胞肿瘤、 室管膜瘤和少突胶质细胞肿瘤中JCv的阳性率分别为46.67%、54.17%和48%, 与正常脑组织相比差异均有显著性(P0.05)。而三者之间相比,差异无显著 性(P0.05)。BKV在胶质瘤中的阳性率为19.15%,在正常脑组织的阳性率为 27.78%,两组之间比较差异无显著性(P0.05)。星形细胞肿瘤、室管膜瘤和少 突胶质细胞肿瘤中 BKV的阳性率分别为20%、12.5%和24%,三组间相比差异 无显著性,与正常脑组织相比差异也无显著性(P0.05)。 (2)基因序列分析表明,本实验所扩增的SV40及JCV片段与GenBank登 录序列100%同源。三个BKV阳性克隆的两个与Ge五B“正登录序列各有一个碱 基不同,另一个克隆完全同源。经对BKV读码框分析,两个不同碱基均位于基 因序列密码子的第三位,不影响氨基酸的编码。 (3)免疫组织化学显示,正常脑组织中无SV40LT的表达,46.8%的胶质瘤 组织表达LT蛋白,两组相比差异有显著性(P0.05)。星形细胞肿瘤、室管膜瘤 和少突胶质细胞肿瘤中SV40LT的阳性率分别为44.44%、54.17%和44%,与正 常脑组织相比差异均有显著性(P0 .05),而三者之间相比,差异无显著性。n 级、m级和W级星形细胞肿瘤间SV4O的阳性率分别为33 .33%、47.83%和50%, 三组相比差异无显著性(P0.05)。 (4)用于检测 SV4O的免疫组织化学和PCR方法比较,两者有联系(P0 .05), 关联系数rs=0.526;两种方法检测结果差异无显著性(P0.05)。 结论:(1) SV40与人胶质瘤的发生密切相关,提示SV40是胶质瘤发生的 诱因之一,可作为胶质瘤预防和治疗的靶向‘ (2)SV4O在不同组织分级的星形细胞肿瘤中表达无差别,提示SV40与肿 瘤恶性程度无关。 (3)免疫组化及PCR是检测SV40的可靠方法,二者联合使用可作为临床 对 SV4O的检测方法。 (4)JCV与胶质瘤的发生相关,提示JCV可能是胶质瘤发生的诱因之一。 (5) BKV与胶质瘤发生的相关性仍需进一步研究证实。 (6)成功地从人胶质瘤中扩增出SV40、JCV和BKV的部分保守序列片段。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R739.4

【共引文献】
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