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《郑州大学》 2006年
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马齿苋再生体系的建立及其遗传转化的初步研究

王红艳  
【摘要】:在野生植物中寻找出具有良好抗性的食用类型并对其进行有效的遗传改良将有助于为人类解决蔬菜食用安全问题探索出一条新途径。马齿苋科植物具有广泛的生态适应性、特殊的药用价值和比较好的食味品质,已经引起了一些研究者对其潜在价值的关注。利用现代生物技术对马齿苋科植物进行有效的遗传改良将有助于进一步挖掘其潜在的利用价值。本项研究以马齿苋(Portulaca oleracea L.)为试验材料,在细胞工程水平建立了马齿苋的组织培养、无性系诱导和植株再生体系,研究了马齿苋愈伤组织在其生长周期中多种生理生化指标的变化状态及其特征。在此基础上以马齿苋愈伤组织为受体初步研究了利用根癌农杆菌将GUS基因转化到受体内的多项技术条件,旨在建立起马齿苋的遗传转化体系。本项研究主要获得了如下4个方面的研究结果: 1、研究了马齿苋无性系诱导中的有关技术问题。以马齿苋的幼嫩叶片和茎段为外植体,利用不同的激素组合对马齿苋的愈伤组织诱导、不定芽分化以及不定根产生的效应进行了研究,由此建立了马齿苋组织培养的再生体系。在试验中确定了马齿苋组织培养的适宜培养基的配方,即诱导愈伤组织的培养基成分为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/或MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,其愈伤诱导率均可以达到100%;诱导不定芽分化的培养基成分为MS+6-BA 4.0mg/L+NAA0.2mg/L,其不定芽分化率可以达到87.5%;诱导愈伤组织生根的培养基成分为1/2MS+IBA 2.0mg/L,其不定根分化率可以达到100%。 2、研究了马齿苋愈伤组织的生长周期和生化指标。结果表明:马齿苋愈伤组织的生长周期大约为21天,其生长曲线的变化趋势呈“S”型,可以分为3个时期,即延迟期(0~6天)、指数生长期(6~15天)和稳定期(15~21天)。可溶性蛋白质的变化趋势也与其生长周期的变化趋势相对应。在一个完整的生长周期中马齿苋愈伤组织内的三种保护酶(SOD、CAT和POD)的变化趋势分别呈现出各自的特征性曲线。 3、测定了马齿苋对选择性抗生素(Kan)和抑菌性抗生素(Carb)的敏感性。在筛选抗性愈伤组织时,Kan的适宜浓度为80mg/L;而脱菌培养时Carb浓度为300mg/L。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S647;Q943.1

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【参考文献】
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