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《郑州大学》 2006年
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干细胞体外诱导为类毛细胞的实验研究

王英  
【摘要】:第一部分 神经干细胞的分离培养、鉴定及标记 目的 神经干细胞(NSC)的研究已逐渐成为国内、外基础及临床医学各专业的重要研究课题。NSC是一种成体干细胞,存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统的多个区域,属多能干细胞,在一定的微环境中具有自我更新和向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化的能力,且具有极强的可塑性,利用NSC进行细胞治疗或基因治疗有很好的临床应用前景。豚鼠在耳科学基础研究中具有独特的优势,并得到广大耳科学研究者的广泛应用,建立一种简便、可行的豚鼠NSC培养方法将为NSC在耳科学领域研究的深入开展提供细胞支持,但目前关于豚鼠NSC的培养方法介绍的并不多。本实验旨在建立一种较为简便、可靠的豚鼠NSC分离、培养、标记方法,为耳科学领域NSC的进一步深入研究提供帮助。 材料与方法 分离新生豚鼠海马组织进行NSC的原代、传代培养及诱导分化培养,倒置显微镜下观察培养细胞的形态特征,培养的细胞行Nestin免疫细胞化学,Western Biot检测,对诱导细胞行NSE、GFAP免疫荧光化学观察,以鉴定所培养的细胞为NSC;用荧光染料DAPI标记干细胞,计算原代及传代标记率。 结果 1.原代培养见细胞呈大小不一、悬浮生长的细胞团,边界清晰,细胞团中细胞排列较为致密。光镜下传代培养的细胞形态特点与原代培养无明显差异。2.原代及传代培养的细胞团Nestin阳性表达,诱导分化后的细胞NSE、GFAP阳性表达。3.经荧光染料DAPI标记后,标记成功率可达93.4%,经传代8次后荧
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R329

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