收藏本站
《郑州大学》 2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

肺腺癌肿瘤相关抗原的筛选鉴定及克隆表达

杨继要  
【摘要】:肺癌是目前发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,严重危害人类健康。实现对肺癌的有效诊断对提高肺癌患者生存质量、延长寿命意义重大。临床常用的肺癌血清标志物指标在肺部的良性疾患或其它肿瘤中也有不同程度的升高,缺乏对肺癌诊断的特异性。寻找提高肺癌有效诊断率的特异性标志物势在必行,而蛋白质组技术平台的建立为高通量筛选肿瘤标志物提供了有力的技术支持。研究蛋白质组学的3大技术支柱是双向凝胶电泳技术、质谱技术和生物信息学。 肿瘤血清蛋白质组学分析方法是蛋白质组学技术和肿瘤免疫学方法相结合的寻找肿瘤标志物新方法。利用蛋白质组学能同时分离肿瘤细胞大量蛋白质的优势,结合抗原抗体反应高度特异性的特点,高通量筛选出与肿瘤免疫反应密切相关的肿瘤相关抗原,经质谱技术鉴定蛋白质性质;应用基因工程技术,表达出这些肿瘤相关抗原的基因工程产物,评价其抗原性在肿瘤的血清学诊断中的应用价值,为肿瘤早期诊断提供特异性强的检测指标。 本研究采用肿瘤血清蛋白质组学分析方法首先建立肺腺癌组织与肺腺癌患者血清、良性肺病患者血清的蛋白质印迹反应图谱,筛选出反应差异蛋白质点并进行质谱鉴定,获取肿瘤相关抗原的蛋白质信息;应用基因工程技术,克隆并表达出这些肿瘤相关抗原的基因工程产物,最后用肺腺癌血清对表达蛋白的抗原性进行初步鉴定。 材料和方法: 1.肺腺癌肿瘤相关抗原的筛选和鉴定 1.1 双向电泳裂解液提取两例肺腺癌组织可溶性总蛋白,Bradford方法测定蛋白样品浓度,作为分析型凝胶和制备型凝胶的蛋白上样量的依据。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R734.2

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 詹显全,陈主初,关勇军,李萃,何春梅,梁宋平,谢锦云,陈平;双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI-H520蛋白质组成分[J];癌症;2001年06期
2 陈主初;肿瘤蛋白质组学的研究进展[J];癌症;2004年02期
3 李茂玉,肖志强,李萃,吴晓英,冯雪萍,易红,李建玲,陈主初,陈平,梁宋平;小细胞肺癌细胞系NCI-H446蛋白质表达谱的建立[J];癌症;2004年10期
4 张昕,张湘茹;肺癌肿瘤标志物的临床价值[J];癌症进展;2005年02期
5 朱文,邓幼林,周清华,陈晓禾,王艳萍,刘伦旭,车国卫;人高、低转移大细胞肺癌细胞株双向凝胶电泳图像分析[J];中国肺癌杂志;2005年01期
6 ;Proteomic Comparison of Two-Dimensional Gel Electrophoresis Profiles from Human Lung Squamous Carcinoma and Normal Bronchial Epithelial Tissues[J];Genomics Proteomics & Bioinformatics;2003年01期
7 陶华林,李红霞;肿瘤标志物的研究及临床应用进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2005年01期
8 王立顺,冯小黎;肿瘤蛋白质组学研究的技术与策略[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年05期
9 万晶宏,贺福初;蛋白质组技术的研究进展[J];科学通报;1999年09期
10 杨瑞森;肺癌流行病学和早期诊断新技术[J];肿瘤防治杂志;2004年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;外源DNA转染精子的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
3 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
4 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
5 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
6 吕慧贞;张建朋;陈新;刘静;张元湖;;一种改进的鸭梨总RNA提取方法[J];山东农业科学;2007年05期
7 张秀华;王文锋;;微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术的探讨[J];山东农业科学;2009年06期
8 张学民,王金生;碱裂解法提取质粒DNA方法的改进[J];安徽大学学报(自然科学版);2000年04期
9 林思祖;曹光球;丁国昌;刘宝;;杉木叶片蛋白质提取方法的改良[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年17期
10 倪大虎,向太和,张盘娣,吴家道,杨剑波,贾士荣,余增亮;应用低能离子束将抗菌肽ShivaA基因导入恢复系明恢63的研究(简报)[J];安徽农业科学;2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王在贵;何瑞国;钱世钧;刘朝良;;特异腐质霉纤维素酶的酶谱分析[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 张新妙;马润宇;;用膜结晶技术制备蛋白质晶体的研究[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
3 高娟;唐明森;王艳玲;蒋再学;竺薇;罗满林;;重组猪α干扰素发酵工艺的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 邓利玲;胡小芳;卢明玥;钟耕;;冷榨南瓜子饼蛋白粉酶法水解工艺及其产物性质研究[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
5 李彦臻;杨利国;;奶牛Y精子膜蛋白的提取与分析[A];第三届中国奶牛发展大会论文集[C];2008年
6 徐冬云;江仲文;;红曲霉谷氨酸脱羧酶的性质研究[A];2007年学术年会论文集[C];2007年
7 单彩云;刘春燕;姜振峰;邱红梅;单大鹏;张大伟;胡国华;陈庆山;;温度对黑龙江大豆主栽品种球蛋白的影响[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
8 黄家强;卜夏;李卓娅;龚非力;;人TNFα分泌型、跨膜型和跨膜稳定型重组体的构建表达及杀瘤效应[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
9 潘林萍;杨国龙;毕艳兰;马宇翔;;脂质中的蛋白质与多肽及其对脂质品质的影响[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
10 郝贵杰;沈锦玉;潘晓艺;尹文林;曹铮;;哈维氏弧菌GYC1108-1胞外蛋白酶的制备及免疫原性研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张爱霞;抗GP73、HDGF抗体的制备、夹心ELISA法的建立及临床初步应用[D];南京医科大学;2009年
2 张冬梅;牙龈卟啉单胞菌侵入血管内皮细胞后粘附分子表达及信号调控的研究[D];中国医科大学;2008年
3 成广雷;国内外种子科学与产业发展比较研究[D];山东农业大学;2009年
4 彭莹;土星拟威尔酵母WC91-2菌株嗜杀因子和β-1,3-葡聚糖酶的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 刘伟;怀头鲇Silurus soldatovi早期发育生理生态学研究[D];中国海洋大学;2010年
6 隋建新;单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D];中国海洋大学;2010年
7 张昌明;新疆汉族、维吾尔族及哈萨克族食管癌血清蛋白质指纹图谱研究[D];新疆医科大学;2010年
8 李彧娜;微孢根霉华根霉变种CICIM F0088生淀粉酶系的研究[D];江南大学;2010年
9 郭金玲;酵母全细胞不对称还原法合成光学纯α-羟基酸及其脱氢酶特性的研究[D];江南大学;2010年
10 徐军;富苯丙氨酸碱性短肽的发现及其对蛋白质等电点和免疫交叉反应的影响[D];华南理工大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周晓芬;金黄色葡萄球菌肠毒素B作为免疫佐剂的研究[D];华中农业大学;2010年
2 李浩丽;Bacillus pumilus CN8菌株高效降解猪血Hb酶的分离纯化与降解机制探讨[D];华中农业大学;2010年
3 荣保华;藕带多酚氧化酶性质及藕带保鲜初步研究[D];华中农业大学;2010年
4 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
5 洪伟;酪蛋白中血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的研究[D];安徽工程大学;2010年
6 谢进;抗鹅膏肽的全合成及其活性测定[D];中南林业科技大学;2009年
7 陈晓平;家蚕30kD载脂蛋白19G1的表达和功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
8 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
9 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
10 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭雪君,倪培华,李莉,黄绍光,万欢英,邓伟吾;可疑肺癌病人纤支镜检查标本的p53基因突变检测[J];癌症;2000年03期
2 詹显全,陈主初,关勇军,李萃,何春梅,梁宋平,谢锦云,陈平;双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI-H520蛋白质组成分[J];癌症;2001年06期
3 李萃,陈主初,肖志强,吴晓英,詹显全,李茂玉,冯雪萍,章晓鹏,李建玲,陈平,梁宋平;人肺鳞癌组织及癌旁组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析[J];癌症;2004年01期
4 陈主初;肿瘤蛋白质组学的研究进展[J];癌症;2004年02期
5 车国卫,周清华;肺癌的筛查和早期诊断[J];中国肺癌杂志;2003年06期
6 周清华,王艳萍,车国卫,朱文,陈晓禾,陈晓峰,孙芝琳;人大细胞肺癌细胞系NL9980和L9981的建立及其生物学特性研究[J];中国肺癌杂志;2003年06期
7 鲁卫平;生物信息学的现状和展望[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);2002年05期
8 张彩,田志刚;肿瘤免疫逃逸机制的研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2000年02期
9 万晶宏,贺福初;蛋白质组技术的研究进展[J];科学通报;1999年09期
10 俞利荣,王楠,吴高德,徐永华,夏其昌;人肝癌细胞系BEL-7404和正常肝细胞系L-02表达的蛋白质组双向凝胶电泳分析[J];科学通报;2000年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨梅怀;刘延序;张岩峰;;肺腺癌癌胚抗原计量学的研究[J];中国肿瘤临床;1993年02期
2 鲁继斌,李亚明,王明武,张旭东,尹兴家,石文君,谷文生;~(99m)Tc标记单克隆抗体对荷肺腺癌裸鼠的放射免疫显像研究[J];中国肿瘤临床;1995年02期
3 王鹏,甘恒芳,李澄,石得仁;红皮病伴发肺腺癌一例[J];中华皮肤科杂志;1995年02期
4 于世辉,邢小平,徐世东,徐明旭,刘定干,张贵寅,李载平,李璞;肺腺癌肿瘤抑制基因p53突变位点的研究[J];中华医学遗传学杂志;1995年02期
5 刘景坤;王曼;张哲;;肺腺癌凝集素受体定位观察及意义[J];沈阳部队医药;1996年06期
6 陈家林,张燕萍;不同分子量细胞角蛋白联合检测在肺腺癌及鳞癌鉴别诊断的应用[J];中国肿瘤临床;2001年04期
7 梁静英;异环磷酰胺、阿霉素和顺铂联合方案治疗肺腺癌的临床观察[J];广西中医学院学报;2001年03期
8 何胜利,董竞成,王中吉,陶莉;促血管生成素1、2及Tie-2受体mRNA在肺腺癌中的表达[J];中华结核和呼吸杂志;2003年05期
9 金焰,阎承慧,吴焱,刘艳,张贵寅,李璞,傅松滨;外源性野生型p53基因在两个肺腺癌细胞系中表达及对p16和p21基因的调控[J];中华医学遗传学杂志;2003年05期
10 王征,归嘉伟,郭志强;脾平滑肌肉瘤肺转移并肺腺癌1例[J];中华胸心血管外科杂志;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周承志;欧阳铭;李时悦;秦茵茵;杨峰;张洁霞;;培美曲塞联合阿瓦斯汀三线治疗肺腺癌6例并文献回顾[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
2 夏和顺;;国际肺腺癌多学科分类介绍[A];第22届湖北省肿瘤学术大会论文汇编[C];2012年
3 刘畅;李羲;王杰;熊桂兰;;以多发空洞样改变为主的肺腺癌一例[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年
4 邵艳;洪伟俊;宁允叶;胥武剑;李强;;肺腺癌恶性转化相关蛋白的初步筛查[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
5 叶兆祥;;肺腺癌的新分类及影像学特点[A];天津市抗癌协会肺癌专业委员会2011年学术年会论文集[C];2011年
6 李春香;徐朝阳;吕丹;姜君;徐长军;傅松滨;白静;;肺腺癌高低转移细胞株差异蛋白分析[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年
7 李强;;左肺腺癌合并心包积液误诊为AECOPD一例[A];第五届全国中西医结合变态反应学术会议论文集[C];2011年
8 李强;席素婷;;左肺腺癌合并心包积液误诊为AECOPD一例[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
9 周丽娜;吴宁;;同时多原发肺腺癌的CT表现与病理学对照分析[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
10 洪伟俊;宁允叶;胥武剑;邵艳;李强;;组蛋白去乙酰化酶5对肺腺癌H1299细胞迁移的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 高原;或与MiR-21分子有关[N];广东科技报;2009年
2 海飞鱼;探索肺癌突变基因[N];医药经济报;2008年
3 ;三氧化二砷对肺腺癌化学治疗敏感性的影响及其机制[N];中国医药报;2003年
4 健康时报记者 王志胜;一样的肿瘤,不一样治法[N];健康时报;2009年
5 第二军医大学长海医院呼吸科主任 李强;易误诊的肺泡细胞癌[N];健康报;2008年
6 于莉莉;力推尖端课题“出炉”[N];黑龙江日报;2004年
7 张纾难;中医临床禁忌系列讲座:肺积[N];中国中医药报;2003年
8 上海市中医医院石门路门诊部 王维平 主任医师;中西医抗癌之路 殊途同归[N];上海中医药报;2009年
9 张纾难;中医临床禁忌系列讲座:肺积[N];中国中医药报;2003年
10 记者 李天舒 胡德荣;为何不吸烟者也患肺癌[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑华;筛选肺腺癌相关血清自身抗体标志物[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2010年
2 张鹏飞;运用2D-LC-MS/MS结合iTRAQ技术筛选人肺腺癌质膜蛋白质标志物[D];中南大学;2012年
3 李峰生;辐射对肺腺癌细胞侵袭能力的影响及其分子机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
4 李亚光;PI3K-Akt通路与肺腺癌术后患者预后的相关性研究[D];北京协和医学院;2012年
5 陈旭良;mTOR信号通路与手术后肺腺癌[D];北京协和医学院;2012年
6 潘青青;ALK基因在肺腺癌患者支气管镜标本中的检测[D];北京协和医学院;2012年
7 杨寒;γ-H2AX和Ki67蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义[D];北京协和医学院;2010年
8 刘海荣;ER、PR、C-erB-2与肺腺癌的相关性研究[D];山东大学;2012年
9 冯林;1.从人胚胎肺发育研究人原发性肺腺癌预后相关基因表达谱 2.深测序和基因芯片技术用于mRNA表达谱检测的比较研究[D];中国协和医科大学;2010年
10 孙志华;双靶点抑制剂BEZ235克服Gefitinib耐药的肺腺癌H1975细胞的作用及其机制研究[D];华中科技大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周坚;益肺汤联合吉非替尼治疗气阴两虚痰瘀毒结型晚期非小细胞肺腺癌的临床研究[D];湖南中医药大学;2011年
2 李晓燕;支气管上皮细胞基因组DNA拷贝数异常对周围型不吸烟肺腺癌患者鉴别诊断价值的初步探讨[D];中国协和医科大学;2010年
3 吴维栋;eIF4E及PTEN在肺腺癌组织中的表达及相关性研究[D];福建医科大学;2010年
4 宫琳琳;候选抑癌基因Fez1在肺癌中的表达[D];大连医科大学;2004年
5 张志学;肺腺癌中血管内皮生长因子及其受体的表达与血管生成及预后的关系[D];青岛大学;2001年
6 陈董明;细胞周期调控因子CyclinD1、CDK4在肺腺癌、鳞癌中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2003年
7 刘志艳;反义表皮生长因子受体对人肺癌细胞系放射敏感性影响的实验研究[D];天津医科大学;2006年
8 何伟伟;SELDI筛选的肺腺癌血清标志蛋白和传统肿瘤标志物的比较研究[D];上海交通大学;2007年
9 陈园园;肺腺癌多层螺旋CT表现及其病理基础与胸内增大淋巴结关系探讨[D];广州中医药大学;2009年
10 姜振宇;后程加速超分割放疗联合紫杉醇化疗治疗肺腺癌研究[D];山东大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026