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《郑州大学》 2007年
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T-bet和GATA3在儿童过敏性哮喘脱敏治疗中的变化

阎冰  
【摘要】: 背景与目的: 支气管哮喘是一种常见的呼吸道疾病,其发病机制尚未被完全阐明。已证实其发生过程受到遗传、免疫调控和环境等多重因素的影响。近年来随着对过敏性哮喘研究的深入,越来越多的证据表明过敏性支气管哮喘与Th1/Th2细胞比例失衡密切相关。初始Th细胞分化为Th1型或Th2型细胞需要一些特异性转录因子的相互作用。新发现T-bet和GATA3是在Th细胞分化为Th1细胞和Th2细胞过程中起重要作用的两种转录因子。T-bet属于T盒家族的转录因子,是Th1类细胞分化的关键因子,在初始T细胞分化为Th1细胞过程中被特异性上调表达,促使细胞Th1型应答优势,同时,T-bet也可以抑制GATA3的功能。GATA3属C4锌指结构家族成员,可以诱导Th2型细胞因子的产生,对早期T淋巴细胞形成及Th2细胞的定向分化具有重要作用,同时可以通过下调STAT4和IL-12Rβ2链的途径来抑制Th1型细胞分化。在哮喘患者,主要表现为Th2型细胞的数量增多,使体液免疫应答占优势。B细胞分化成浆细胞,大量产生IgE,诱发Ⅰ型超敏反应,从而引发支气管的慢性炎症。特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)是WHO推荐,哮喘治疗中唯一的对因治疗方法。自1911年Noon和Freeman首先将变应原特异性免疫治疗应用于变态反应临床治疗以来,已经取得了较好的效果,但至今对其治疗机制不甚明了。本研究以哮喘患儿为研究对象,分析SIT治疗前后转录因子T-bet和GATA3在PBMCs(Peripheral Blood Mononuclear Cell外周血单个核细胞)的表达变化,揭示其在SIT中的作用,为哮喘治疗和新药开发提供理论依据。 方法: 本实验选取的36例过敏性哮喘患儿来自郑州大学第一附属医院儿科门诊,其中男性19例,女性17例;年龄6~14岁,平均年龄12.5岁。按照治疗前,治疗15周和治疗51周分为三组,每组12人。所有病例有明确的哮喘病史和症状,符合支气管哮喘诊断标准。皮肤点刺试验尘螨抗原阳性,采用Alutard屋尘螨变应原制剂(ALK丹麦)脱敏方法进行标准化脱敏治疗。分别于治疗前、治疗15周(此时为最大剂量)、治疗51周后采集静脉血,分离外周血单个核细胞,提取总RNA放入-80℃冰箱保存。待RNA收集完成后,将RNA逆转录为cDNA。设计β-actin,T-bet,GATA3三对特异性引物,用荧光PCR的方法分别检测T-bet,GATA3相对β-actin的表达变化,用2~(-ΔΔct)的方法进行分析。 结果: 随着治疗时间的延长,15周时T-bet相对β-actin的表达是治疗前的2.96倍,51周时,是治疗前的0.35倍;15周时GATA3相对β-actin表达,是治疗前的0.75倍;51周时,GATA3相对表达是治疗前的0.09倍。T-bet/GATA3的比值随着治疗的进展逐渐增高。15周时是治疗前的3.78倍,一年时是治疗前的4.69倍。 结论: 本试验表明在脱敏治疗前后患者外周血单个核细胞中转录因子T-bet基因表达水平相对与GATA3升高,表明转录因子T-bet和GATA3在哮喘脱敏治疗中起重要作用。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R725.6

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