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《郑州大学》 2007年
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溶血磷脂酸及其受体在妊娠期高血压疾病的变化及意义

张建好  
【摘要】: 背景和目的 妊娠期高血压疾病是影响妊娠预后最常见的妊娠期特有疾病,直接威胁母体及胎儿的生命安全,是孕产妇和围生儿病率及死亡率的主要原因。迄今为止,妊娠期高血压疾病的病因及病理机制尚不清楚,目前多认为其发病机制可能与血管内皮细胞损伤、自身免疫、凝血系统及纤溶系统失调等有关。正常妊娠随着妊娠进展,孕妇血小板活化程度逐渐加强,而妊娠期高血压疾病的血小板活化更加明显,血液处于病理性的高凝状态,血液流变学明显异常,且与病情严重程度成正比。导致妊娠高血压疾病凝血功能异常的原因及机制至今仍不清楚,多年来一直是产科学者探究的课题之一。溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)是近几年研究较多的一种细胞间磷脂类信号分子,可通过G蛋白耦联受体发挥广泛而多样的生物学功能。研究发现血液中的LPA可以来源于活化的血小板,而血小板的活化聚集促使血栓形成,因此LPA在缺血性脑卒中的诊断及中风预警方面中有重要的价值。而妊娠期高血压疾病患者存在明显的凝血功能异常,患者血中是否存在LPA的异常变化,其变化与妊娠高血压疾病的关系如何,以及LPA与血液凝固异常的关系及作用机制等等问题都是非常值得探讨的课题。本文通过对60例妊娠期高血压疾病患者血浆LPA水平进行检测,并与正常晚期妊娠孕妇进行对比,以分析LPA在妊娠期高血压疾病患者血浆中的变化,以及LPA与该病发生、发展、病情严重程度及预后的关系。同时应用免疫组化技术检测70例妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中LPA受体——内皮分化基因(endothelial differentiation gene,Edg)蛋白Edg4和Edg7的表达情况,以初步探讨LPA在妊娠期高血压疾病的作用机制,该研究内容国内外尚未见报道。 材料与方法 1.选取2005年10月~2006年2月在郑州大学一附院、三附院、郑州市妇幼保健院诊治的妊娠期高血压疾病患者60例(妊娠期高血压20例,子痫前期轻度20例,子痫前期重度20例)、20例正常晚期妊娠孕妇作为研究对象。收集70例妊娠期高血压疾病患者的胎盘检测LPA受体。 2.采用生化法检测各组患者血浆LPA水平:取患者空腹静脉血约4ml,按LPA测定试剂说明的步骤先将血液置于抗凝管中,8000r/min离心10min,准确吸取上清液1ml,然后抽提磷脂成分,浓缩分离,最后加入特定显色剂后置于90℃水浴放置5min,取出后温室放置35min,在波长为636nm处比色。LPA测定试剂由北京泰福仕科技开发公司生产,方法为生化法,仪器采用722型分光光度计。参考值范围:正常<2.9μmol/L,临界值2.9~3.2μmol/L,异常>3.2μmol/L。 3.应用免疫组织化学(SP法)检测该70例妊娠期高血压疾病患者胎盘组织(妊娠高血压疾病组)和20例正常妊娠胎盘组织(对照组)中LPA受体Edg4与Edg7的表达情况,并对结果进行统计分析,并用Shimizu法对其进行定量分析。 4.统计学处理:用统计软件SPSS11.0进行统计分析,测定结果以(?)±S表示,采用单因素方差分析、最小显著差(LSD)t检验及x~2检验进行统计处理,受体表达强度采用校正x~2检验方法,以α=0.05为检验标准。 结果 1.妊娠期高血压疾病患者血浆LPA水平测定 1.1 LPA水平测试结果 20例正常晚期妊娠妇女的血浆LPA平均值为(3.5±0.3)μmol/L,大于临界值3.2μmol/L,较正常非孕妇女升高,P<0.05;妊娠期高血压疾病组血浆LPA水平明显升高,妊娠期高血压组(4.6±0.4)μmol/L、子痫前期轻度组(6.1±0.4)μmol/L、子痫前期重度组(9.0±0.6)μmol/L与正常晚期妊娠妇女相比,P值均<0.05,并且随着妊娠期高血压疾病病情加重,血浆LPA水平进一步升高,具有显著差异,组内P值均<0.05。 1.2 LPA与新生儿体重、阿氏评分及预后: 从试验结果、统计分析及临床资料来看,妊娠期高血压疾病孕妇血浆LPA越高,患者病情越重,表现为血压持续升高,药物治疗效果越差,胎儿宫内窘迫、胎儿发育迟缓的发生率越高,常需提前终止妊娠。新生儿低体重率高,阿氏评分降低,新生儿死亡率增高。我们测定的结果提示:当LPA升高至4.40μmol/L,是发生妊娠期高血压疾病的临界值;当LPA达到5.60μmol/L时妊娠期高血压疾病多已处于子痫前期轻度阶段,应及时采取措施予以治疗:当LPA达到8.50μmol/L,多数患者已发展到子痫前期重度阶段;当LPA超过9.30μmol/时,提示病情严重,药物治疗效果不佳,应及时终止妊娠,以降低围生儿和孕产妇死亡率。 2.溶血磷脂酸(LPA)受体在胎盘组织中的表达情况 2.1表达部位:Edg4与Edg7主要表达于胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞的细胞质和细胞膜,免疫组化染色呈浅黄色或棕黄色。 2.2 Edg4和Edg7在胎盘绒毛滋养细胞中的表达阳性率:正常晚孕组分别为25%和20%,妊娠期高血压组分别为60%和40%,轻度子痫前期组分别为80%和65%,重度子痫前期组分别为83.3%和86.7%。轻度子痫前期组及重度子痫前期组阳性率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05,Edg4:x~2=17.014;Edg7:x~2=22.222);妊娠期高血压组与正常晚孕组比较,差异无统计学意义(P>0.05,Edg4:x~2=5.013;Edg7:x~2=1.905);妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组Edg4、Edg7的阳性表达率随病情加重逐渐升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。 2.3 Edg4和Edg7在胎盘蜕膜细胞中的表达阳性率:正常晚孕组分别为20%和25%,妊娠期高血压组分别为55%和50%,轻度子痫前期组分别为70%和55%,重度子痫前期组分别为83.3%和73.3%。轻度子痫前期组及重度子痫前期组阳性率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05,Edg4:x~2=13.675;Edg7:x~2=17.014);妊娠期高血压组与正常晚孕组比较,差异无统计学意义(P>0.05,Edg4:x~2=5.227;Edg7:x~2=2.667);妊娠高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组Edg4、Edg7的阳性表达率随病情加重逐渐升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 1.妊娠期高血压疾病患者血浆LPA水平明显升高,高于正常妊娠妇女。且与病情有关,LPA水平越高,提示病情越重。 2.妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、Edg7呈高表达。且其表达程度与病情有关,随病情加重,表达程度升高。 3.LPA及其特异性受体Edg4、Edg7可能参与了妊娠期高血压疾病发生发展过程。 4.血浆LPA的水平有望成为妊娠期高血压疾病预测、诊断、病情监测及预后判断的重要临床指标。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R714.2

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