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《郑州大学》 2007年
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体外受精—胚胎移植周期中胚胎染色体非整倍体分析及移植价值探讨

戴善军  
【摘要】: 体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)周期中易发生胚胎染色体非整倍体(aneuploidy)异常。表现为在正常二倍体基础上,染色体数目增加或减少一条甚至多条,最常见的类型为染色体三体型,在高育龄妇女中尤其突出。染色体非整倍体的形成机制一直是医学遗传学研究领域的重要课题,目前认为多数是细胞分裂时期染色体不分离、减数分裂时期染色单体提早分离和染色体丢失引起。染色体非整倍体胚胎由于等位基因间平衡失调,某一等位基因产物减半或增倍,可导致胚胎停止发育、自发流产、死产等而造成妊娠失败,是胚胎移植后着床率降低、流产率升高的重要原因。因此筛查胚胎染色体非整倍体情况,判断其利用价值尤为重要。 目前在IVF-ET过程中,国内外许多学者在受精后16~18h常规观察胚胎原核数目并进行评分,以观察到2个明显原核(pronucleus,PN)或极体作为正常受精的判断标准选择适宜胚胎移植,以未见原核(0PN)、仅见单个原核(1PN)或多个原核作为异常受精的判断标准而将相应胚胎废弃。在临床实践中发现,IVF-ET周期的临床妊娠率偏低,仅为30%~40%左右。已有学者研究发现低妊娠率可能与2PN胚胎的染色体非整倍体异常有关。多数学者认为,异常受精胚胎多存在染色体非整倍体异常,不具有移植价值。而有研究证实,部分异常受精胚胎特别是1PN胚胎可见染色体二倍体,提示为正常受精。有学者认为,在没有正常受精胚胎可供移植的情况下,可选择此类胚胎移植,目前已有移植1PN胚胎出生正常新生儿的报道。多数中心选择D1受精原核为2PN的胚胎移植,而在无2PN胚胎时,是否选择0PN、1PN等异常受精胚胎移植尚存争议。 体外受精胚胎的原核数目观察不能准确的反应胚胎的染色体非整倍体情况,影响了对胚胎移植价值的判断。目前,国内外学者多采用荧光原位杂交法(fluorescent in situ hybridization,FISH)研究体外受精胚胎的13、18、21、X、Y等染色体的单体、三体、等染色体非整倍体分布情况。研究焦点主要集中在高龄妇女、反复流产夫妇的体外受精胚胎的染色体非整倍体异常、多精受精胚胎形成的影响因素和染色体非整倍体异常分布等方面。尽管国内有少数学者研究了单原核胚胎的非整倍体发生情况,但对是否选择其进行移植尚无定论。0PN晚期卵裂胚胎的染色体非整倍体情况及移植价值研究,以及系统判断受精方式、年龄、获卵数、诱导排卵和超促排卵方案等影响因素对体外受精胚胎染色体非整倍体异常形成的影响国内尚未见报道。本研究旨在运用FISH技术检测体外受精胚胎染色体的非整倍体分布并判断其移植价值,为临床在无2PN正常受精胚胎移植的情况下,是否选择0PN、1PN胚胎移植提供理论依据。 目的本研究拟通过FISH技术分析IVF-ET周期中胚胎的21号染色体的非整倍体情况,探讨染色体非整倍体高发的影响因素及临床利用价值,为临床在无正常受精胚胎移植的情况下,是否选择0PN、1PN胚胎移植提供理论依据。 方法研究对象均选自2006年4月~2007年1月郑州大学第一附属医院生殖医学中心经IVF、卵胞浆内单精子显微注射(introcytoplasmic sperm injection,ICSI)技术治疗患者的D3废弃胚胎。用于研究的胚胎均经患者知情同意。收集废弃胚胎,按受精方式分为IVF、ICSI组;根据D1天观察的受精原核数目分为0PN、1PN、2PN、多PN组;按年龄分为<30岁、30~34岁、≥35岁组;按获卵数分为<17枚、≥17枚组;按超排方案分为人工授精(intrauterine insemination,IUI)改IVF方案组、GnRH-a短方案组、GnRH-a长方案组。各组废弃胚胎均采用透明带OCTAX-Laser Shot激光打孔、吸拉法活检卵裂球,进而Tween-20/HCl+甲醇/冰醋酸法裂解固定卵裂球,固定后用21号染色体特异位点探针(locus specific identifier,LSI)杂交行FISH,分析各组胚胎染色体非整倍体分布并比较差异。 所有数据采用SPSS13.0统计软件包进行统计分析,组间的差异采用独立样本的t检验,率的比较采用x~2检验。检验标准取α=0.05,以P<0.05为差异显着性判定标准。 结果 1、胚胎活检 IVF和ICSI周期中活检292只废弃胚胎,共获得289个卵裂球,其中细胞完整、核清楚的卵裂球277只,活检成功率95.8%。 2、卵裂球固定和杂交情况 277只卵裂球细胞固定了250个,235个可见荧光信号,固定率为90.0%,出信号率为94.0%。 3、卵裂球FISH结果 3.1 IVF周期胚胎染色体的非整倍体结果 IVF-ET周期中,0PN组和1PN组的胚胎染色体二体率分别为53.3%、58.1%,无显著差异(P>0.05),但均小于2PN组的73.1%(P<0.05)。染色体多体率在≥3PN组为81.9%,显著高于0PN组的20.0%、1PN组的19.4%、2PN组的11.5%(P<0.05);≥3PN组的染色体二体率为9.1%,显著低于0PN组的53.3%、1PN组的58.1%、2PN组的73.1%(P<0.05)。0PN组和1PN组的胚胎染色体异常率分别为46.7%、41.9%,显著高于2PN组的26.9%(P<0.05),但均低于≥3PN组的90.9%(P<0.05)。 3.2 ICSI周期胚胎染色体的非整倍体结果 ICSI周期的胚胎中,0PN组和1PN组的胚胎染色体二体率分别为45.2%、31.0%,无显著差异(P>0.05)。而2PN组胚胎染色体二体率为70.9%,显著高于其余各组(P<0.05)。≥3PN组中,染色体二体率为29.0%,显著低于2PN组(P<0.05),多体发生率为67.8%,显著高于其余三组(P<0.05)。0PN组和1PN组的胚胎染色体异常率分别为55.8%、69.0%,显著高于2PN组的29.1%(P<0.05)。 3.3受精方式与染色体异常 IVF周期胚胎中,1PN组的染色体非整倍体率为41.9%,显著低于ICSI组的69.0%(P<0.05),≥3PN组染色体异常率为90.9%,显著高于ICSI组的71.0%(P<0.05)。0PN组、2PN组染色体异常率无显著差异(P>0.05)。 3.4年龄与染色体异常 与<30岁组的27.9%、15.4%、8.3%、37.5%相比,≥35岁组中0PN、1PN、2PN、≥3PN组胚胎染色体异常率分别为66.7%、64.5%、47.1%、90.3%,显著增高(P<0.05);与<30岁组相比,30~34岁组中0PN、1PN、≥3PN组胚胎的染色体异常率分别为59.0%、86.8%、84.0%,也显著增高(P<0.05),而2PN组胚胎的染色体异常率为23.8%,无显著差异(P>0.05)。≥35岁组与30~34岁组相比,各组胚胎染色体异常率无显著差异(P>0.05)。 3.5获卵数与染色体异常 获卵数≥17枚组的0PN、1PN、2PN、≥3PN胚胎的染色体异常率分别为55.9%、63.3%、20.7%、80.0%,与<17枚组的48.1%、45.2%、38.1%、82.4%相比,无显著差异(P>0.05)。 3.6不同排卵方案与染色体异常 IUI改IVF方案组中的0PN、1PN、2PN、≥3PN组胚胎染色体异常率分别为23.1%、25.0%、7.1%、35.7%,与GnRH-a短方案组的70.8%、75.0%、31.3%、96.2%比较,显著偏低(P<0.05);其中1PN、2PN、≥3PN组胚胎染色体异常率与GnRH-a长方案组的58.3%、40.0%、91.7%比较,显著降低(P<0.05),0PN胚胎染色体异常率与GnRH-a长方案组的70.8%相比无显著差异(P>0.05)。GnRH-a短方案组与GnRH-a长方案组相比,两组胚胎染色体异常率无显著差异(P>0.05)。 结论 1.0PN胚胎和IVF周期中的1PN胚胎染色体二体率为45.2%~58.1%,提示为正常受精,具有一定的移植价值。在无2PN正常受精胚胎移植的情况下,可选择0PN胚胎和IVF周期中的1PN胚胎移植,但建议结合胚胎植入前遗传学诊断以及产前诊断技术行染色体异常筛查。ICSI周期中1PN胚胎染色体异常率高达69.0%,不具有移植价值。 2.2PN胚胎二体率为70.9%~73.1%,为胚胎移植的首选对象。2PN卵裂胚胎存在约8.3%~11.5%的染色体异常,可能是导致体外受精成功率低下的重要因素之一。 3.3PN卵裂胚胎多体率为67.8%~81.9%,提示染色体非整倍体高发,不具有移植价值。 4.年龄增高,特别是≥35岁;超排卵方案中Gn用量增加,可能增加体外受精胚胎的染色体异常的形成率。 5.IVF周期中的1PN胚胎的染色体异常率高于ICSI组,≥3PN胚胎染色体异常率低于ICSI组,提示受精方式可能影响体外受精胚胎的染色体异常的形成。而取卵数目的多少可能对胚胎染色体异常的形成没有影响。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R714.8

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【参考文献】
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1 孙莹璞,苏迎春,郭艺红,乔玉环,陈秋菊,刘新贵,陈爱军;体外受精-胚胎移植技术在常规超排卵304个治疗周期中的应用[J];郑州大学学报(医学版);2002年01期
2 颜军昊;陈子江;李媛;胡京美;高姗姗;;体外受精周期中来源于单原核受精卵胚胎性染色体分析[J];山东大学学报(医学版);2006年06期
【共引文献】
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1 王凤英,李玉艳,俞炽阳,常青,梁志清,冯娇,屈宗银;对IVF超促排卵周期结局的分析[J];第三军医大学学报;2005年12期
2 张彩虹;花群义;阮周曦;杨俊兴;曾少灵;陶虹;陈兵;曹琛福;林庆燕;周晓黎;;单一引物标记LUX荧光RT-PCR鉴别BTV和EHDV[J];动物医学进展;2010年03期
3 许如苏;陈茹;林彩华;杨梓坚;陈冠武;;LUX~(TM)荧光PCR快速检测沙门氏菌的研究[J];广东畜牧兽医科技;2009年06期
4 戴善军;孙莹璞;;实时荧光定量PCR技术及在植入前遗传学诊断中应用[J];国外医学(计划生育/生殖健康分册);2007年03期
5 蒋满喜;人类种植前胚胎的染色体分析[J];国外医学.遗传学分册;2002年02期
6 申霞;徐瑜;孙莹璞;苏迎春;;显微激光薄化人胚胎透明带辅助孵出效果观察[J];郑州大学学报(医学版);2006年05期
7 铁新琴;贾莉婷;杨如镜;;超排卵治疗过程中卵泡液促性腺激素、雌二醇和胰岛素样生长因子水平检测[J];郑州大学学报(医学版);2007年05期
8 李刚;孙莹璞;金海霞;辛志敏;戴善军;;罗伯逊易位携带者胚胎植入前遗传学诊断[J];郑州大学学报(医学版);2009年01期
9 张轶乐;孙莹璞;苏迎春;郭艺红;;体外受精反复失败患者移植周期内搔刮子宫内膜对妊娠率的影响[J];郑州大学学报(医学版);2010年06期
10 欧蕾;郭艺红;孙莹璞;苏迎春;;睾丸、附睾精子冻融后行卵胞浆内单精子注射疗效观察[J];郑州大学学报(医学版);2011年01期
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1 张清华;mSpindly在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的定位与功能[D];山东师范大学;2010年
2 张明;哺乳动物性别控制相关问题的研究[D];广西大学;2002年
3 郭永超;噬菌体展示介导的免疫扩增病原检测方法研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
4 李刚;荧光原位杂交技术在辅助生殖中的作用[D];郑州大学;2009年
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1 朱国坡;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布[D];河南科技学院;2010年
2 武明莉;GSH改善冷冻对精子氧化应激损伤的初步研究[D];郑州大学;2011年
3 刘美霞;经阴道彩色多普勒超声监测子宫、卵巢血流动力学变化在IVF-ET中应用价值研究[D];郑州大学;2003年
4 徐瑜;人胚胎透明带厚度、硬度与IVF-ET妊娠结局的关系及激光在辅助孵出中的应用[D];郑州大学;2003年
5 段廷云;H1N1亚型SIV河南株的分离鉴定、HA基因的克隆和序列分析及荧光定量PCR诊断方法的建立[D];河南农业大学;2006年
6 李刚;胚胎植入前遗传学诊断的基础及临床应用研究[D];郑州大学;2006年
7 陈慧;人未受精、受精未分裂卵母细胞及早期发育阻滞胚胎的超微结构研究[D];郑州大学;2007年
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【二级参考文献】
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1 颜军昊,李媛,胡京美,李梅,马水英,高选,陈子江;用X、Y双色探针行人胚分裂球植入前诊断[J];山东大学学报(医学版);2004年03期
2 孙梅,冯云,高芹,盛燕,陈子江;序贯培养在体外受精胚胎移植技术中的应用[J];中华妇产科杂志;2001年02期
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1 王应雄;翁亚光;张湘蜀;郑增淳;;高育龄妇女染色体着丝粒点研究[J];中华医学遗传学杂志;1990年03期
2 张兴荣;;结直肠癌旁表面上皮的异常DNA倍体和增殖类型[J];国际肿瘤学杂志;1991年02期
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4 马国建,薛开先,吴建中;培养人淋巴细胞微核测试法检测非整倍体诱变剂的研究[J];癌变畸变突变;1997年04期
5 吴建中,薛开先,马国建;改良的人淋巴细胞微核试验检测非整倍体诱发剂的研究[J];癌变畸变突变;1997年04期
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8 赵竞;刘睿智;;生精过程中减数分裂异常机制研究进展[J];生殖与避孕;2007年08期
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1 邢彩虹;Marchetti Francesco;李桂兰;Weldon Rosana H;Kurtovich Elaine;Young Suzanne;Schmid Thomas E;张罗平;Rappaport Stephen;Waidyanatha Suramya;Wyrobek Andrew J;Eskenazi Brenda;;低剂量苯暴露与接苯工人精子非整倍体相关[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
2 许杜意;葛红;黄善武;邓光华;李秋香;王甜甜;葛维亚;;~(60)Co-γ辐射处理培育非整倍体月季新品种[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
3 许川一;;中孕期胎儿鼻骨测量联合血清学对非整倍体筛查的研究报告[A];2011年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2011年
4 史庆华;;非整倍体卵子的发生机制[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
5 孙斐;;卵子发生异常的遗传基础[A];全国第七届中西医结合妇产科学术会议论文及摘要集[C];2007年
6 孙玉强;张献龙;;棉花四倍体栽培种和二倍体野生棉原生质体融合产生非整倍体[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
7 唐祈林;荣廷昭;;玉米×四倍体多年生玉米杂种F_2非整倍体的研究[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
8 汪旭;;多色荧光原位杂交检测小鼠精子非整倍体[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
9 史庆华;;非整倍体肿瘤细胞发生途径的研究[A];第六次全国医学遗传学学术会议文摘汇编[C];2005年
10 周大文;管翌华;许淼;颜景斌;盛敏;黄英;曾凡一;任兆瑞;廖世秀;王应太;;Array-MLPA在常见染色体非整倍体遗传病检测中的应用[A];遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者白毅;中美学者发现癌细胞可能起源途径[N];中国医药报;2005年
2 曹丽君;年轻女性卵子可能也存在缺陷[N];医药经济报;2005年
3 代群;癌细胞何来,中美学者有重大发现[N];新华每日电讯;2005年
4 张中桥;益胃冲剂能逆转胃黏膜癌前病变[N];中国中医药报;2006年
5 张中桥;陕西益胃中药能逆转胃黏膜癌前病变[N];中国医药报;2005年
6 记者 陈敬农 通讯员 胡胜友;中美学者合作追溯致癌染色体起源新线索[N];科技日报;2005年
7 ;年长易致精子变异 小心后代患上侏儒症[N];中国妇女报;2006年
8 河南睢县高级中学 傅忠保;关于人类遗传病及其预防[N];学知报;2011年
9 吴志军 沈基飞;我科学家发现肿瘤细胞调控关键因子和新机制[N];科技日报;2011年
10 吴志军 沈基飞;我国发现肿瘤细胞调控的关键因子[N];中国医药报;2011年
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1 巩宁;牡蛎非整倍体的制备及其生物学特性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
2 金海霞;显微穿刺纠正人类三原核合子后胚胎发育潜能及非整倍体研究[D];郑州大学;2013年
3 张丰;癌变机理新假说及其初步验证[D];第四军医大学;2005年
4 陈佩度;染色体分带和非整倍体技术在小麦细胞遗传研究中的综合运用[D];南京农业大学;1988年
5 夏彦恺;氨基甲酸酯和拟除虫菊酯农药暴露的男性生殖毒性研究[D];南京医科大学;2007年
6 冯玲;卵母细胞非整倍体发生机制的实验研究[D];华中科技大学;2008年
7 易启毅;p53调控四倍体细胞命运的研究[D];中国科学技术大学;2011年
8 唐祈林;玉蜀黍属基因组构成及玉米新种质创制研究[D];四川农业大学;2003年
9 王玉;比较基因组杂交在畸形胎儿非整倍体检测及产前诊断中的应用[D];山东大学;2007年
10 王亚男;长春花碱和秋水酰胺诱导TK基因突变的比较研究及两类突变集落机制研究[D];四川大学;2006年
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1 鲁琳琳;微阵列比较基因组杂交技术在植入前胚胎非整倍体筛查中的应用[D];天津医科大学;2012年
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3 吴芳;FISH在植入前胚胎非整倍体分析中的应用[D];天津医科大学;2012年
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6 邓璐;基于MLPA基础上的实时荧光定量PCR快速分子诊断胎儿非整倍体技术的建立[D];广州医学院;2011年
7 李恬;人类X染色体着丝粒区α卫星DNA变异与非整倍体关系研究[D];重庆医科大学;2004年
8 宋北剑;高育龄妇女体外受精冻融胚胎非整倍体检测的研究[D];兰州大学;2011年
9 曾小莹;芥菜型油菜—诸葛菜属间非整倍体的细胞遗传学研究[D];华中农业大学;2003年
10 郭英华;大白菜部分非整倍体研究[D];河北农业大学;2002年
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