收藏本站
《郑州大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

显微镜下型多血管炎患者血浆抗MPO抗体、铜蓝蛋白和MPO之间相互作用的研究

陈洁  
【摘要】: [背景与目的] 抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)相关小血管炎是一组自身免疫性疾病。ANCA是其血清学诊断工具,以酒精固定的中性粒细胞为底物,应用间接免疫荧光法可分为胞浆型(cytoplasmic,c-ANCA)和环核型(perinuclear,p-ANCA),其主要靶抗原分别为蛋白酶3(proteinase 3,PR3)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)。其中c-ANCA/PR3-ANCA主要见于韦格纳肉芽肿病(Wegener's granulomatosis,WG)患者,而p-ANCA/MPO-ANCA则主要见于显微镜下型多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)患者。 MPA是中国最常见的ANCA相关系统性血管炎(ANCA associated systemic vasculitis,AASV)。抗MPO抗体被认为是MPA诊断的重要血清学标记物,但是其发病机制并未完全清楚。MPO是中性粒细胞胞浆中的主要氧化酶之一,血浆铜蓝蛋白是MPO的生理抑制剂。抗MPO抗体、血浆铜蓝蛋白和MPO之间的相互作用可能在MPA的发病机制中起到重要的作用,但国内尚未见相关报道。 本实验旨在研究用亲和层析提取的原发MPA患者抗MPO抗体对MPO氧化活性的抑制作用,并进一步研究MPO、铜蓝蛋白和抗MPO抗体之间的关系,以期对MPA的发病机制提供理论基础。 [实验方法] 11例患者血浆均来自北京大学第一医院肾内科1998年10月—2006年4月收治的抗MPO抗体阳性的原发性MPA患者,12例健康献血员的血清作为正常对照。应用蛋白G亲合层析的方法纯化血清中的免疫球蛋白G(IgG),应用MPO亲和层析柱纯化IgG中的抗MPO抗体,应用高度纯化的人中性粒细胞MPO在0.127mg/ml联大茴香胺,0.001%过氧化氢条件下建立稳定的酶反应体系。分别测定在不同浓度的患者抗MPO抗体、铜蓝蛋白和正常人IgG存在条件下MPO的酶氧化活性,并比较MPA患者的抗MPO抗体和铜蓝蛋白抑制MPO的酶氧化活性的差异。应用竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)进一步测定抗MPO抗体、铜蓝蛋白和MPO之间的相互作用。在同等条件下,MPO的酶氧化活性的下降=30%视为有抑制作用。 [实验结果] 1.应用终浓度为40ng/ml的MPO建立稳定的210μl容积的酶反应体系,米氏常数(Km)为0.705mM。 2.11名MPA患者中有7名患者的抗MPO抗体能够以非竞争性抑制的方式剂量依赖性的抑制MPO的活性。平均抑制率为32%,平均抑制常数(Ki)为0.124mg/ml(Dixon plot作图法)。 3.铜蓝蛋白能够以竞争性抑制的方式剂量依赖和时间依赖性的抑制MPO的活性。平均抑制率为75%,平均抑制常数(Ki)为0.547 mg/ml(Dixon plot作图法)。 4.抗MPO抗体能够抑制MPO和铜蓝蛋白之间的结合,最大抑制率可达到75.4±11.6%。 [结论] 1.大多数MPA患者的抗MPO抗体能够以剂量依赖性的方式非竞争性的抑制MPO的氧化活性,与MPO的生理抑制剂铜蓝蛋白抑制方式不同。 2.抗MPO抗体可以抑制MPO和铜蓝蛋白的结合。 3.抗MPO抗体的上述作用可能与原发性MPA的发病机制有关。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R593.2

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吉俊;丁小强;邹建洲;许迅辉;方艺;滕杰;钟一红;陈利明;袁敏;;PR3-ANCA和MPO-ANCA相关性小血管炎临床病理比较[J];中国中西医结合肾病杂志;2006年03期
2 周波;池莲祥;;丙基硫氧嘧啶致抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎的诊治进展[J];时珍国医国药;2007年04期
3 李立;李兴阳;;桥本氏甲状腺炎患者的抗中性粒细胞胞浆抗体检测结果分析[J];中国冶金工业医学杂志;2010年03期
4 宋斌斌;赵瀛;张春燕;吴炯;郭玮;潘柏申;;两种抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法的结果比较[J];检验医学;2011年07期
5 张建辉;陶一江;;警惕以咯血为首发症状的显微镜下多血管炎[J];临床肺科杂志;2006年06期
6 崔丽艳;张捷;;丙基硫氧嘧啶导致抗中性粒细胞胞浆抗体阳性的小血管炎相关分析[J];现代检验医学杂志;2006年04期
7 蒋建华;赵亚楠;普雄明;刘玉琴;;类风湿性关节炎患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体及抗血管内皮细胞抗体检测[J];临床医学;2007年11期
8 周炜;邵雪华;崔丹萍;齐激扬;;抗中性粒细胞胞浆抗体检测在原因不明发热诊断中的应用[J];实用医学杂志;2010年21期
9 潘磊;王勇;;抗中性粒细胞胞浆抗体相关性肺血管炎的诊治(附19例报告)[J];北京医学;2006年04期
10 解立怡;薛武军;谭峰;路万虹;吕晶;尹爱萍;冯学亮;;原发性小血管炎患者多系统临床表现和肾脏病理分析[J];西安交通大学学报(医学版);2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐佩红;袁定芬;张名莉;;过敏性紫癜患者抗中性粒细胞胞浆抗体的测定[A];2002中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2002年
2 刘月环;萨晓婴;吴旧生;;四种实验动物腹腔巨噬细胞髓过氧化物酶活性的初步研究[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年
3 楼晓军;丁韧烨;张戡;;血吸虫肝纤维化患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体的表达及意义[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
4 景香香;王志刚;李玲;郑元义;李晓东;彭晓琼;杨春江;;犬缺血再灌注心肌靶向声学造影声像图的超声组织定征量化研究[A];第九届全国超声心动图学术会议论文集[C];2007年
5 余洁;陈适;栗占国;;综合型医院ANCA阳性患者的疾病谱分析[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
6 张静;李永哲;吴琳;刘国振;;人髓过氧化物酶重链全长及片段基因在大肠杆菌中的表达研究[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
7 孙霞;魏欣冰;孙茹;王立祥;李雪梅;张岫美;;卡托普利对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症反应的影响[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(上)[C];2005年
8 陈万新;韩卫全;朱红琳;黄瑾;;血细胞髓过氧化物酶快速染色——氧化吡啰红B-碘化钾法及应用[A];第四届全国临床检验学术会议论文汇编[C];2006年
9 刘健;纵瑞凯;余学芳;;新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠ANCA、血小板参数及血管超微结构的影响[A];现代医学诊断指标在中医药诊断治疗中的应用文集[C];2008年
10 张蜀澜;李永哲;佟大伟;胡朝军;何纯;李冀;李磊;;联合检测抗酿酒酵母细胞抗体和抗中性粒细胞抗体在炎症性肠病中的临床意义[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 赵明辉;系统性血管炎易引起肾脏病变[N];中国中医药报;2004年
2 范敏华;快速进展性肾功能衰竭的病因治疗[N];中国中医药报;2004年
3 郑法雷;快速进展性肾功能衰竭不同于急性肾衰[N];中国中医药报;2004年
4 衣晓峰 董宇翔;大肠癌遗传易感新位点被“锁定”[N];中国医药报;2009年
5 衣晓峰 董宇翔;大肠癌遗传易感新位点被“锁定”[N];大众卫生报;2009年
6 衣晓峰 董宇翔;早筛大肠癌 MPO基因可能成靶点[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黎莉;冠状循环炎症和凝血因子梯度与急性冠状动脉综合征关系的研究[D];山东大学;2004年
2 刘成桂;血清髓过氧化物酶检测方法的建立及其在冠心病危险分层及预测急性冠脉事件的应用研究[D];重庆医科大学;2012年
3 娄海燕;脑缺血再灌注损伤的炎症分子生物学机制及羟乙葛根素的保护作用[D];山东大学;2005年
4 陈欣;淋巴毒素α与急性冠脉综合征发病关系的研究[D];天津医科大学;2009年
5 郭壮丽;针刺对急性脑缺血再灌注大鼠脑内IL-1β、TNF-α mRNA表达调节作用的研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
6 李金清;V.A.C.促进猪皮肤软组织爆炸伤感染创面愈合的实验研究[D];第四军医大学;2005年
7 孙中厚;吸入一氧化氮联合不同浓度氧对克雷伯杆菌肺炎大鼠的作用及机制[D];复旦大学;2005年
8 刘玉珍;针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注后白细胞浸润和相关粘附分子mRNA和蛋白表达影响的实验研究[D];天津中医学院;2005年
9 杜靖;亚硝酸乙酯吸入干预新生大鼠高氧肺损伤的实验研究[D];浙江大学;2006年
10 张治平;大鼠颅脑损伤模型脑内炎症反应及糖皮质激素干预治疗的研究[D];中南大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈洁;显微镜下型多血管炎患者血浆抗MPO抗体、铜蓝蛋白和MPO之间相互作用的研究[D];郑州大学;2007年
2 蔡娟;髓过氧化物酶及其基因多态性与冠心病的相关性研究[D];扬州大学;2009年
3 周觅;髓过氧化物酶电位型免疫传感器的实验研究[D];重庆医科大学;2009年
4 邱承杰;髓过氧化物酶联合高敏C-反应蛋白在急性冠脉综合征患者危险分层中的作用[D];郑州大学;2010年
5 赵艳霞;原位杂交检测急性白血病髓过氧化物酶基因的表达[D];青岛大学;2002年
6 田石;羊水入血后大鼠肺组织NF-kB、MPO的表达及地塞米松治疗作用的实验研究[D];中国医科大学;2004年
7 任建华;黄连解毒汤调控炎症介质对多脏器功能障碍影响的研究[D];广州中医药大学;2006年
8 祁亚斌;轻重度脊髓损伤后中性粒细胞活性变化及抗凝血酶Ⅲ对其保护作用的实验研究[D];东南大学;2006年
9 张支明;髓过氧化物酶基因多态性与原发性高血压遗传易感性的研究[D];兰州大学;2007年
10 梅拥军;sCD40L、MPO、hs-CRP 与急性冠状动脉综合征的相关性研究[D];南昌大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026