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盐酸戊乙奎醚对大鼠肢体缺血—再灌注继发肺损伤的影响

康颖颖  
【摘要】: 背景与目的: 肢体缺血—再灌注常见于腹主动脉瘤手术、大血管栓塞再通或者损伤修复、断肢再植术、体外循环等,缺血范围较广,不仅缺血肢体可发生更严重的损伤,还可导致远隔器官(如肺)的损伤,甚至多器官功能障碍。有学者认为抗胆碱药物有细胞膜保护作用,能提高细胞对缺血缺氧的耐受性,稳定溶酶体和线粒体等亚细胞结构,减少溶酶体酶的释放,抑制花生四稀酸代谢物的产生和休克因子的形成。这些都有利于解除小血管痉挛,扩张血管,降低心脏的前后负荷,减少肺损伤后肺水的滲出量。临床证明体外循环下心内直视手术病人使用盐酸戊乙奎醚对体外循环后的肺损伤有明显的保护作用,其效果优于阿托品和东莨菪碱,且较大剂量时效果更好。 本课题通过动物实验,来初步探讨不同剂量的盐酸戊乙奎醚对缺血—再灌注继发肺损伤的影响的机制,为临床研究提供相关依据。 对象与方法: (1)制备缺血—再灌注大鼠模型大鼠经标号分组称重腹腔注射4%水合氯醛麻醉后置于手术板上,于双侧股三角处切开皮肤,分离股动、静脉,用无创微动脉夹夹闭股动脉造成双后肢缺血,3小时后,右颈部开口分离颈内静脉,建立输液系统,去除动脉夹恢复双后肢血流4小时后处死。大体标本观察呈暗红色,体积变大,水肿,边缘变钝,可见点灶状出血即说明模型制作成功。 (2)用药Ⅰ组(对照组,即进行同样的麻醉及手术,只是不进行血管夹闭,不用药),Ⅱ组(损伤组,即建立缺血再灌注模型但不用药),Ⅲ组和Ⅳ组分别于开放前10分钟肌肉注射盐酸戊乙奎醚2mg/kg、9mg/kg。 (3)观察指标:取右肺组织用盐水冲去残血,滤纸吸干水分,在分析天平上精确称湿重后于80℃烘干48小时,再称干重,计算肺组织含水率=(湿重—干重)/干重×100%,取左肺上叶组织约1 mm~3肺组织置于2.5%戊二醛磷酸缓冲液中固定1-4小时,再经4℃,1%锇酸后固定1-2小时,包埋染色后,行透射电镜观察。取左肺中叶制成10%组织匀浆用酶联免疫吸附法检测了NF-a和IL-10的含量。 (4)统计学分析用SPSS软件系统分析结果,计量资料以均数±标准差((?)±S)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果: (1)一般资料:四组大鼠月龄、体重、麻醉时间、手术时间、缺血-再灌注时间差异均无显著性(P>0.05)。 (2)肺组织含水率:损伤组肺组织含水率明显高于对照组(P<0.05),小剂量组肺组织含水率明显低于损伤组(P<0.05),大剂量组肺组织含水率明显低于小剂量组(P<0.05. (3)电镜结果:对照组肺毛细血管基底膜较完整,肺泡Ⅱ型上皮细胞呈圆形或椭圆形,胞浆丰富,游离面微绒毛及板层体较完整;损伤组及小剂量组可见肺毛细血管基底膜连续性中断,毛细血管内皮细胞肿胀,内皮细胞间隙增宽,肺泡Ⅱ型上皮细胞微绒毛破坏程度严重,微绒毛变短、减少甚至消失,Ⅱ型上皮细胞板层体排空;大剂量组游离面微绒毛轻度破坏,损伤程度介于Ⅰ、Ⅱ两组之间。 (4)肺组织匀浆中TNF-a和IL-10含量:损伤组肺组织匀浆中TNF-a含量明显高于对照组(P<0.05),小剂量组肺组织匀浆中TNF-a含量明显低于损伤组(P<0.05),大剂量组肺组织匀浆中TNF-a含量明显低于小剂量组(P<0.05): 损伤组肺组织匀浆中IL-10含量明显低于对照组(P<0.05),小剂量组肺组织匀浆中IL-10含量明显高于Ⅱ组(P<0.05),大剂量组肺组织匀浆中IL-10含量明显高于小剂量组(P<0.05)。 结论: (1)肢体缺血—再灌注可以引起远隔器官(如肺)的损伤,甚至导致多器官功能障碍。 (2)致炎细胞因子TNF-a是介导缺血—再灌注继发急性肺损伤的关键性细胞因子,IL-10具有强大的抗炎作用 (3)大剂量盐酸戊乙奎醚时能有效抑制炎症介质的释放,保护肺毛细血管基底膜,并能有效解除血管平滑肌痉挛,肺血管阻力下降,有利于减轻肺间质和肺泡内水肿,


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