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《郑州大学》 2009年
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TLR6 Ser249Pro基因多态性与5岁以下儿童喘息的相关性研究

储卫红  
【摘要】:【研究背景】 儿童喘息性疾病在临床非常常见,中华医学会儿科学分会呼吸学组将我国5岁以下儿童喘息分成以下3种临床表型:(1)早期一过性喘息,(2)早期起病的持续性喘息(指3岁以前),(3)迟发性喘息/哮喘。细菌或病毒感染、变应原暴露的改变、环境改变、早产、肺发育不良肺功能低下、遗传易感性等因素均可导致喘息的发生。其危险因素也随着年龄的改变而改变,表现为不同的年龄段不同的发病机制。。虽然还没有完全弄清楚这些疾病发病的分子机制,但是已经从分子遗传学上解释了为什么有些人易患这些疾病而另一些人不易患这些疾病,是因为他们携带易患这些疾病的基因。遗传研究发现过去许多并不会对人类产生危害的某些刺激物或过敏原,现在却可诱发喘息的急性发作或其它变态反应,这可能与人类的遗传易感性增加有关,即遗传易感人群在增多。其中年龄相关的遗传易感性受到学者们越来越多的关注。而年龄相关的遗传易感性研究对理解喘息性疾病的基本机制做出了重要贡献。随着分子生物学及DNA技术的发展,人们在分子水平对哮喘等喘息性疾病的炎症反应机制的研究取得了很大的进展,而且越来越多的研究证明天然免疫及调节性免疫均参与喘息性疾病的发病过程。TLRs(Toll-like receptors,TLRs)作为天然免疫系统的主要受体,作为机体识别病原微生物及变应原刺激的第一道天然免疫反应受体,其基因的改变在许多炎症反应性疾病中起着重要的作用。哮喘等儿童喘息性疾病作为一类慢性炎症反应性疾病,TLRs基因的改变在其发病机制中亦起着非常重要的作用。目前已发现TLR2、TLR4、TLR6、TLR9、TLR10基因的单核甘酸多态性(single nucleotidepolymorphisms,SNPs)与哮喘等喘息性疾病有关。TLR6 SNPs与这些疾病的关系也得到越来越多的关注,国外已有研究证明TLR6 Ser249Pro多态性与儿童哮喘有关。而国内尚无TLR6 Ser249Pro多态性与疾病关系的研究报道。 【研究目的】 (1)喘息患儿及健康儿童TLR6 Ser249Pro基因型及等位基因频率分布; (2) TLR6 Ser249Pro基因多态性与5岁以下儿童喘息的发病有无相关性; (3)≤3岁喘息患儿与健康儿童相比TLR6 Ser249Pro基因多态性有无统计学差异; (4) 3岁<年龄≤5岁喘息患儿与健康儿童相比TLR6 Ser249Pro基因多态性有无统计学差异。 (5)≤3岁喘息患儿与同年龄段健康儿童相比TLR6 Ser249Pro基因多态性有无统计学差异; (6) 3岁<年龄≤5岁喘息患儿与同年龄段健康儿童相比TLR6 Ser249Pro基因多态性有无统计学差异。 【研究对象】 喘息患儿来自2007年11月-2008年8月郑州大学第一附属医院儿科住院及门诊病人和郑州市儿童医院呼吸内科住院病人101例,男78例,女23例,均排除先天性肺发育不良、肺功能低下及支气管异物等因素引起的喘息;对照组共96例,男76例,女20例,均排除个人及家族喘息、哮喘和变态反应性疾病史。 【研究方法】 1.101个病例及96个对照的全血标本基因组DNA提取。 2.基因组DNA中TLR6 Ser249Pro相应位点片段PCR扩增。PCR产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳。结果采用凝胶成像系统检验。 3.TLR6基因的Ser249Pro位点PCR扩增片段经AvaⅡ内切酶在37℃水浴槽中酶切3h;酶切产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳。结果采用凝胶成像系统检验。 【研究结果】 1.喘息患儿基因型频率分布为:CC型93(92%),CT型7(6.9%),TT型1(1.1%);对照组基因型频率分布为:CC型78(81.3%),CT型15(15.6%),TT型3(3.1%)。两者比较无统计学差异(χ~2=5.101,P=0.078)。 2.喘息患儿等位基因频率为:C193(95.5%),T9(4.5%);对照组等位基因频率为:C171(89.1%);T21(10.9%)。两者比较有统计学差异(χ~2=5.88,P=0.015)。 3.≤3岁喘息患儿与对照组等位基因频率相比差异有统计学意义(χ~2=7.592,P=0.006)。 4.3岁<年龄≤5岁喘息患儿与对照组等位基因频率相比差异无统计学意义(χ~2=0.421,P=0.561)。 5.≤3岁喘息患儿与同年龄段健康儿童等位基因频率相比差异有统计学意义(χ~2=6.495,P=0.0108)。 6.3岁<年龄≤5岁喘息患儿与同年龄段健康儿童等位基因频率相比差异无统计学意义(χ~2=0.0998,P=0.7521)。 【结论】 TLR6 Ser249Pro位点T等位基因在≤3岁儿童喘息的发生中可能起保护作用。
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R725.6

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