收藏本站
《河南科技大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪源链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究

王松华  
【摘要】:近年来,猪链球菌病在我国广泛流行并致病,已成为严重危害养猪业发展的主要病原菌之一。本研究对猪源链球菌的病原流行病学、毒力特性、生物学特性等进行了系统研究,得到了以下研究结果:1.通过对猪源链球菌的分离鉴定(2014.09~2015.12),并对前期实验室分离鉴定结果进行统计分析(2011.01~2014.08),结果表明,2011~2015年间,从河南及其周边地区规模养殖场和部分散养农户2 521份发病猪的肺脏等病料组织中分离鉴定出772株链球菌(Streptococcus),总分离率为30.6%。通过基于gdh基因的特异性PCR方法对其中310株猪源链球菌进行了PCR鉴定,共鉴定出135株猪链球菌(S.suis),占43.5%。通过基于cps基因的特异性PCR方法对135株猪链球菌进行了血清型鉴定,共鉴定出72株猪链球菌2型(占53.3%),14株7型(占10.4%),14株9型(占10.4%),2株1型(占1.5%),33株其他型(占24.4%)。这表明在我国河南及其周边省份的猪群中,链球菌为分离率最高的细菌性病原,其中猪链球菌仍占重要地位(占43.5%),在猪链球菌中,血清2型占主导地位(占53.3%)。2.2011~2015年间,猪源链球菌的分离率介于23.5~45.5%之间,其中2011年和2014年显著偏高(p0.01)。另外发现其分离率具有明显的季节性,其中2~5月和8月份显著偏高(p0.01)。在分离出链球菌的772份病料中,有274份仅分离出链球菌,没有发现其他常见病原菌,占35.5%;有498份同时分离出各种不同的共感染菌,占64.5%。链球菌最常见的共感染菌是副猪嗜血杆菌占所有共感染病料的47.4%;(236/498),其次是大肠埃希菌(35.3%;176/498)、多杀性巴氏杆菌20.9%;(104/498)、支气管败血波氏杆菌(15.3%;76/498)、葡萄球菌(6.2%;31/498)、沙门氏菌(6.1%;30/498)和胸膜肺炎放线杆菌(1.0%;5/498)。这表明在猪链球菌病的发生具有明显的季节性,且与其他病原菌的共感染情况非常严重。3.对分离鉴定的49株猪链球菌,包括2型26株、7型14株、9型9株,和实验室前期分离鉴定的2株C群马链球菌兽疫亚种强毒菌株进行了小鼠毒力试验,结果表明C群马链球菌兽疫亚种的菌株毒力表现最强,其次是猪链球菌2型、7型和9型菌株。分别选择小鼠毒力试验中表现最强的猪链球菌2型3株、7型3株、9型3株和2株C群马链球菌兽疫亚种菌株(共11株链球菌),进一步进行仔猪毒力试验,结果表明2株C群马链球菌兽疫亚种菌株和3株猪链球菌2型菌株的攻毒仔猪均能出现典型猪链球菌病的临床症状和病理变化,3株猪链球菌9型菌株中有1株(SS9-6)能导致攻毒仔猪出现典型临床症状和病理变化;但是3株猪链球菌7型菌株均不能。这表明在我国猪链球菌病的病原中,C群马链球菌兽疫亚种和猪链球菌2型菌株的致病力较强,而猪链球菌7型和9型较弱。另外,各血清型猪链球菌的小鼠毒力试验结果和仔猪毒力试验结果并不完全一致。4.以C群马链球菌兽疫亚种M1株和猪链球菌2型SS2-2株为代表菌株进行了培养基筛选试验。在含10%新生牛血清的TSA培养基、牛血清琼脂培养、鲜血琼脂培养基基、麦康凯琼脂培养基和巧克力琼脂培养基共5种固体培养基中,2株菌株均在含10%新生牛血清的TSA中生长最快。在含10%新生牛血清的TSB培养基、马丁肉汤培养基、硫乙醇酸盐培养基(TM)、THB和BHI共5种液体培养基中,2株菌株均在含10%新生牛血清的TSB中生长活菌含量最高。对上述的11株链球菌进一步研究了其在TSA固体培养基上的培养试验,结果表明,猪链球菌2型、7型、9型菌株之间的生长速度无明显差异,其24h培养菌落的直径介于1.62~1.88 mm之间,但C群菌株的生长速度显著偏快(p0.01),其平均直径为3.24 mm。在TSB液体培养基中的生长曲线测定结果表明,11株链球菌的最高活菌含量介于8.4×108~1.2×109 CFU/mL之间,均能高密度发酵培养。21种生化反应的试验比较结果表明,11株链球菌的生化反应均不一致,即使同一血清型的不同菌株之间也具有较大差别。药敏试验表明,11个强毒菌株对青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、头孢拉定、头孢克洛、阿奇霉素等均高度敏感。这些试验筛选出了适合猪源链球菌培养的最佳培养基,同时比较了11株强毒菌株的生化特征、生长特性、药物敏感性等生物学特性,为后期灭活疫苗研发奠定基础。
【学位授予单位】:河南科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S852.611

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 席晓剑;赵战勤;薛云;龙塔;王乐;刘会胜;;猪源多杀性巴氏杆菌的病原流行病学及其毒力特性[J];中国兽医学报;2015年08期
2 徐惠娟;薛云;赵战勤;陈坤鹏;王乐;邓雯;;副猪嗜血杆菌国内流行血清型菌株的生物学特性比较研究[J];中国兽医学报;2014年05期
3 德吉卓玛峨毛参;;猪链球菌病的诊断[J];中国畜牧兽医文摘;2013年10期
4 吴炜;张晓燕;唐宇龙;方丽华;方维焕;;猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析[J];动物医学进展;2012年05期
5 周俊明;何孔旺;倪艳秀;俞正玉;茅爱华;吕立新;温立斌;张雪寒;郭容利;李彬;王小敏;;猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白部分片段的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立[J];江苏农业学报;2012年01期
6 胡丹;王长军;潘秀珍;唐家琪;;猪链球菌2型荚膜缺失株生物学特性及其免疫保护性[J];微生物学通报;2011年01期
7 郝春燕;王利勤;王晶钰;;猪链球菌的分离鉴定及药敏试验[J];动物医学进展;2010年05期
8 闵成军;刘亚彬;;猪链球菌的致病性[J];动物医学进展;2010年S1期
9 祝令伟;蔡雪辉;刘军;齐翀;孙洋;田园;纪雪;李鹏;冯书章;;猪链球菌2型新基因岛SSGI4的发现[J];中国人兽共患病学报;2009年07期
10 赵战勤;胡睿铭;吴斌;向敏;陈利苹;杨明柳;金梅林;陈焕春;;猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究[J];畜牧兽医学报;2007年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邵莉萍;张继瑜;马志永;;临床常用几种抗菌药物对HPS抗菌活性研究[J];安徽农业科学;2017年33期
2 师红亚;董浚键;张德锋;孙成飞;田园园;曾庆凯;卢迈新;叶星;;尼罗罗非鱼无乳链球菌基因缺失株ΔcpsE和ΔneuA的构建及其生物学特性[J];中国水产科学;2017年05期
3 廖兴广;张丁;张秀丽;郭晓玲;刘杰;任蕴慧;;河南省肉猪养殖和屠宰加工过程沙门菌污染状况主动监测[J];中国卫生检验杂志;2017年16期
4 陈国娟;简莹娜;张学勇;奎军;李秀萍;王戈平;李海迪;马利青;;死亡仔猪肺脏中多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J];青海畜牧兽医杂志;2017年04期
5 赵战勤;乔鹏芸;刘倩玉;薛云;丁轲;;多杀性巴氏杆菌的分型及其灭活疫苗研究进展[J];中国预防兽医学报;2017年07期
6 范荣栋;赵俊仁;石磊;闫鹤;;一株食源性单增李斯特菌镉、砷耐受基因的测序分析[J];现代食品科技;2017年07期
7 宋子杰;孙鑫鹏;王妍;韩先杰;;猪链球菌的分离鉴定及药敏试验[J];山东畜牧兽医;2017年02期
8 马攀;方超;李润成;胡玉立;赵墩;余兴龙;;湖南地区猪源多杀性巴氏杆菌部分保护性抗原基因分子流行病学调查[J];中国预防兽医学报;2017年02期
9 贡嘎;益西措姆;罗润波;王刚;索朗斯珠;;藏猪链球菌的分离鉴定及耐药性研究[J];中国人兽共患病学报;2016年11期
10 周迪;杨旭夫;彭凌;刘博婷;;粤北地区梅花猪链球菌的分离鉴定和药敏试验[J];动物医学进展;2016年09期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐惠娟;薛云;赵战勤;陈坤鹏;王乐;邓雯;;副猪嗜血杆菌国内流行血清型菌株的生物学特性比较研究[J];中国兽医学报;2014年05期
2 贾爱卿;王贵平;黄静琳;;副猪嗜血杆菌ompP2基因的克隆鉴定及序列分析[J];中国兽医学报;2013年01期
3 律清宇;郝淮杰;毕丽丽;郑玉玲;姜永强;吕淑霞;;猪链球菌2型溶血素的纯化及生物学活性研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年04期
4 闵成军;刘亚彬;;猪链球菌的致病性[J];动物医学进展;2010年S1期
5 杨继飞;杨苏珍;杨艳艳;职爱民;赵东;郅玉宝;邢广旭;邓瑞广;柴书军;张改平;;以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒[J];中国农业科学;2010年06期
6 胡丹;王长军;胡福泉;王晶;程功;李明;潘秀珍;唐家琪;;猪链球菌2型中国强致病株05ZYH33荚膜缺陷菌株的构建[J];第三军医大学学报;2009年02期
7 赵战勤;裴洁;薛云;汤细彪;吴斌;何华;周学利;程相朝;何启盖;陈焕春;;猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[J];中国农业科学;2008年12期
8 李艳平;马群喜;王树清;;猪链球菌分离鉴定及药敏试验[J];吉林畜牧兽医;2008年01期
9 李永明;罗阿东;徐景峨;袁翠霞;;猪源多杀性巴氏杆菌的生物学鉴定与荚膜PCR分型[J];中国预防兽医学报;2007年07期
10 闫若潜;赵明军;张志凌;盛敏;方先珍;吴志明;;河南省致病性猪链球菌血清型及耐药性状况调查[J];河南畜牧兽医(综合版);2007年05期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026