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《河南农业大学》 2011年
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棉铃虫活化蛋白激酶C受体1(RACK1)基因的研究

侯元春  
【摘要】:蛋白激酶c受体l(receptor for activated C kinase 1,Rackl)属于一类含有WD-40重复结构蛋白家族的亚家族。广泛分布于真核生物和原核生物中(Smith et al.,2000)。最初Rack1蛋白被确定为哺乳动物蛋白激酶C(PKC)的受体(Ron et al.,1994),现在认为Rackl蛋白作为支架蛋白在多个信号转导途径中起重要作用(chen et al.,2006)。棉铃虫[Helicoverpa armigera(Hübner)]是一种世界性农业害虫,危害棉花、玉米、小麦等多种农作,广泛分布于非洲、亚洲、澳大利亚、太平洋和欧洲等地区。人们对其进行了大量的遗传,分子水平的研究,但目前尚未发现对Rack1基因的研究。本实验对棉铃虫Rack1蛋白基因进行研究,为探明昆虫Rack1蛋白的保护作用机制提供理论依据。 主要研究结果如下: (1)本实验利用RT-PCR和RACE的方法扩增获得了棉铃虫Rack1基因全序列,序列分析结果表明,该基因编码区长为957bp,编码319个氨基酸残基。5’端非编码区长为36bp,3’端非编码区长为112bp。同源性分析显示,棉铃虫Rack1的氨基酸序列具有高度的保守性,与其他昆虫相比高达85%以上。 (2)本实验利用荧光定量PCR方法,研究了Rack1基因在棉铃虫的不同发育时期的转录情况。结果表明,Rack1基因总是在蜕皮过程中表达量升高,这一结果暗示着Rack1基因可能参与棉铃虫的蜕皮过程。 (3)本实验利用注射激素和荧光定量PCR方法,研究了激素处理后Rack1基因在棉铃虫中的转录情况。结果表明,从处理3h到12h蜕皮激素均诱导Rack1的表达,从处理3h到12h保幼激素均显著抑制Rack1基因的表达,本结论再一次验证了蜕皮激素与保幼激素对Rack1基因的影响,暗示蜕皮激素与保有激素可能参与调控Rack1基因的表达。 (4)本实验利用饥饿处理和荧光定量PCR方法,研究了饥饿对Rack1基因在棉铃虫中的转录情况。结果表明在棉铃虫开始取食时对棉铃虫进行饥饿处理可以显著抑制Rack1的转录,从饥饿3 h开始一直持续到12 h,Rack1的转录明显被抑制。
【学位授予单位】:河南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S435.622.3

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