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《河南农业大学》 2002年
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禽脑脊髓炎病毒河南株的分离鉴定与VP0基因的克隆与序列分析

徐耀辉  
【摘要】: 通过SPF鸡胚连续、快速传代,从自然发病鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒(定名为HN株),该病毒对盐酸、氯仿、胰蛋白酶有抵抗力,在二价镁离子保护下可抵抗热效应50℃,病毒滴度EID_(50)=10~(-5.66)/0.2ml,中和指数72.44。 根据已发表的AEV序列设计一对引物,利用反转录——聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在体外从AEVHN株感染的SPF鸡胚病变组织中扩增出VPO基因,经纯化后将VPO基因克隆到质粒pGEM-T-Easy上,构建成含有VPO基因的重组质粒pGEM-T-VPO,然后通过转化感受态大肠杆菌,经蓝白斑筛选,挑出阳性克隆,提取质粒做PCR和酶切鉴定。进一步序列分析表明,该基因长726bp,编码242个氨基酸,与AEV BZ株和HB株的核苷酸和氨基酸同源性分别为:99.2%、98.3%和94.8%、95.4%,同源性较高,说明VPO基因较为保守。 本实验成功地对禽脑脊髓炎病毒VPO基因进行了克隆和分析,为进一步研究AEV的基因结构及功能,基因工程苗的研制,以及分子流行病学研究提供了理论基础。
【学位授予单位】:河南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S852.65

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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7 张艳艳;禽脑脊髓炎病毒的鉴定与弱毒疫苗的研制[D];西北农林科技大学;2005年
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