小麦（Triticum aestivum）淀粉合成关键酶反义基因的构建及转化

【摘要】： 淀粉是许多粮食作物的重要贮存多糖，在食品、工业等方面有着广泛用途，因此，改良淀粉品质具有重要意义。AGP、GBSS、SBE是淀粉生物合成关键酶，决定着淀粉含量及直/支链淀粉的比率，从而影响其品质。本研究的目的是通过改变淀粉生物合成途径来影响小麦淀粉的量及直/支链淀粉的比率，其策略和技术路线为利用反义基因技术抑制小麦胚乳中某一淀粉合成关键酶基因的表达。实验成功构建了AGP、GBSS、SBE的一系列反义基因，以确定有效抑制片段长度。以AGP、GBSS、SBE全长编码基因反向替代pCAMBIA1301-MAR-LI中的ipt基因构建了三个全长反义表达载体，并利用适当酶切、连接的方法构建了一系列反义缺失体。所有这些反义基因表达载体在外源基因外侧添加了小麦核骨架结合序列(MAR)，MAR不仅可以克服外源基因表达的位置效应，而且可以提高外源基因的稳定性和表达水平，目的基因的启动子为小麦LMW Glu 1D1基因启动子，该启动子可以使外源记基因在小麦胚乳特异表达，具有很强的启动活性。将构建好的一系列反义表达载体利用基因枪方法导入小麦(郑麦9023)花后12-14天的幼胚，通过组织培养和抗性筛选(Hyg 20mg/l)，获得了抗性植株。实验共轰击了3600个幼胚，获得了98株抗性苗，经PCR检测，其中22株为阳性，转化率为0.61％，表明外源基因已成功整合进小麦基因组。

【学位授予单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：S512.1

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2	宋刚,林顺权,吕柳新,马英;反义RNA技术控制果实成熟的研究进展[J];福建农业大学学报;2000年04期
3	刘伟华,李文雄,胡尚连,徐香玲,李集临;小麦组织培养和基因枪轰击影响因素探讨[J];西北植物学报;2002年03期
4	刘录祥,郑企成,赵林姝,张义丰,王晶,赵世荣,陈文华;小麦遗传转化无基因型障碍受体系统的研究[J];核农学报;2001年05期
5	谢启光,黄占景,沈银柱;基因工程改良小麦品质的研究进展和展望[J];河北师范大学学报(自然科学版);2001年02期
6	孟博;反义RNA技术的应用与进展[J];国外医学.遗传学分册;2001年06期
7	于晓红,柴进,安利佳,朱祯;小麦遗传转化方法的研究进展[J];辽宁师范大学学报(自然科学版);1998年02期
8	高松洁,郭天财,吴雪峰,阎凌云;小麦淀粉合成关键酶与淀粉主要理化特性研究进展[J];河南农业大学学报;2002年04期
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10	赵虹,李名扬,裴炎;小麦遗传转化研究进展[J];生物技术;2001年03期

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1	周竹青,周广生;作物库、源、流生理机理研究进展[J];中国农学通报;2001年06期
2	宋建民,吴祥云,刘建军,刘爱峰,赵振东;小麦籽粒特性与品质关系研究进展[J];山东农业科学;2002年02期
3	甄世利,张永清,高志强;小麦籽粒淀粉特性研究进展[J];山西师范大学学报(自然科学版);2004年03期
4	刘鹏,胡昌浩,董树亭,王空军,张吉旺,张保仁;甜质型与普通型玉米籽粒发育过程中糖代谢相关酶活性的比较[J];中国农业科学;2005年01期
5	张发云,晏月明,胡英考,胡赞民,周奕华;小麦HMW谷蛋白亚基基因克隆研究进展[J];中国生物工程杂志;2002年06期
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7	陈建省,田纪春,张永祥,邓志英,刘中琰,李中存;山东省小麦品种品质演变的研究[J];山东农业科学;2004年01期
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4	唐宗祥;张怀琼;张怀渝;晏本菊;任正隆;;影响小麦成熟胚形成愈伤组织的因素[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
5	马慧;赵开军;徐正进;;含芥菜几丁质酶基因的双元表达载体的构建[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
6	樊颖伦;赵开军;陈乐天;刘耀光;王春连;章琦;;水稻抗白叶枯病近等基因系CBB23基因组TAC文库的构建[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
7	刘录祥;赵林姝;梁欣欣;郑企成;刘强;王晶;郭会君;赵世荣;陈文华;;基因枪法获得逆境诱导转录因子DREB1A转基因小麦的研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8	刁现民;王永芳;李伟;王鹏;智慧;陈振玲;段胜军;;抗除草剂基因Bar转化谷子研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
9	王昌涛;赵琦;杨爱国;贾正正;赵玉锦;张世煌;;农杆菌介导超氧化物岐化酶基因(Fe-SOD)在玉米中的遗传转化[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
10	宋健民;李豪圣;戴双;刘爱峰;刘建军;赵振东;;小麦淀粉合成酶研究进展[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年

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2	赵辉;花后高温和水分逆境对小麦籽粒品质形成的生理影响[D];南京农业大学;2006年
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4	齐春辉;日本结楼草（Zoysia japonica Steud.）植株再生体系建立与DREB1A基因转化研究[D];北京林业大学;2005年
5	周竹青;小麦品种源库流生理特性及其籽粒发育的显微和超微结构研究[D];华中农业大学;2001年
6	靳德明;杂交水稻强弱势颖花异步灌浆结实特性及其生理机制研究[D];华中农业大学;2002年
7	李睿;稻麦淀粉胚乳细胞程序性死亡和淀粉质体的发生发育[D];华中农业大学;2004年
8	刘伟华;几丁质酶(Chitinase)基因转化小麦的研究[D];东北农业大学;2000年
9	吴茂森;大麦黄矮病毒GPV株系复制酶基因介导的抗病毒转基因小麦的研究[D];中国农业科学院;2000年
10	吴殿星;标记辅助选择改良稻米淀粉品质[D];浙江大学;2001年

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1	霍华蕾;从山羊草中分离小麦籽粒硬度主效基因突变体的研究[D];华中科技大学;2005年
2	周宏伟;水稻籽粒在萌发过程中胚乳消耗和淀粉体形态的变化[D];扬州大学;2006年
3	顾丽;慈姑品质和产量形成的初步研究[D];扬州大学;2006年
4	单丽丽;水稻淀粉合成相关基因对稻米品质效应的研究[D];扬州大学;2006年
5	谢会兰;水稻淀粉合成相关基因分子标记的建立及其遗传网络初步探析[D];扬州大学;2007年
6	王玲玲;利用RNA干涉技术进行水稻类受体激酶功能的研究[D];河北师范大学;2005年
7	游颜杰;植物生长点转化法的初步建立[D];河北师范大学;2005年
8	揭厚胜;不同直链淀粉含量的水稻品种籽粒淀粉和蛋白质积累特性的研究[D];四川农业大学;2004年
9	王丽娟;TaLea_3基因植物表达载体构建及其对丹参遗传转化的研究[D];陕西师范大学;2005年
10	贺杰;结缕草组织培养再生体系建立及转基因研究[D];华南热带农业大学;2005年

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1	曾寒冰;;小麦未熟胚离体培养的研究——愈伤组织的诱导及再生植株[J];东北农业大学学报;1988年01期
2	黄粤,柯遐义,李宝健;通过基因枪轰击转化获得转基因小麦植株的研究[J];西北植物学报;1997年02期
3	侯丙凯,张中林,周奕华,章银梅,沈桂芳,陈正华;油菜叶绿体定点转化载体的构建及其杀虫性[J];高技术通讯;2000年07期
4	黄东印,林作楫;冬小麦品质性状与面条品质性状关系的初步研究[J];华北农学报;1990年01期
5	阎新甫，刘文轩，林秋萍;外源DNA导入小麦后代变异株系的酯酶同工酶分析[J];华北农学报;1994年01期
6	董延瑜，洪亚辉，任春梅，张学文，刘春林，赵燕，严钦泉，莫爱华，董秀云;外源DNA导入技术在植物分子育种上的应用研究[J];湖南农业大学学报;1994年06期
7	刘稚,樊梦康,崔澂;土壤根癌杆菌体外转化胡萝卜悬浮培养细胞[J];中国科学B辑;1987年05期
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9	曾君祉,王东江,吴有强,张健,周文娟,朱小平,徐乃正;用花粉管途径获得小麦转基因植株[J];中国科学B辑;1993年03期
10	曾君祉,吴有强,王东江,张健,马铮嵘,周志勇;花粉管通道(或运载)法转化的植株后代遗传表现及转化机理的探讨[J];科学通报;1998年06期

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4	黄永红;梅眉;曾继吾;周碧容;吴元立;易干军;;甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究[J];果树学报;2007年04期
5	梁燕;陈大明;王鸣;陈杭;;茄红素-β-环化酶反义基因对胡萝卜茄红素含量的影响[J];西北植物学报;2007年11期
6	刘俊杰;魏小春;齐树森;史为民;;反义基因技术及其在植物研究上的应用[J];生物技术通报;2008年04期
7	刘立科;刘根齐;侯宁;刘春光;陈建南;张文会;樊颖伦;吴冰洁;;植物HSP70反义基因工程雄性不育表达载体的构建及鉴定(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2008年02期
8	陈远玲,张群宇,简玉瑜,杨跃生,刘耀光;利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选[J];华南农业大学学报(自然科学版);2004年04期
9	王丕武;高玮;关淑艳;曲静;张君;姚丹;马健;;转淀粉分支酶反义基因(sbe2b)玉米直链淀粉含量的变异分析[J];吉林农业大学学报;2008年04期
10	关淑艳;王丕武;刘广娜;刘慧婧;赵丽娜;郭树成;;反义技术及其在植物基因工程中的应用[J];安徽农业科学;2009年26期

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1	杜宝玲;宋天保;张晓田;李小明;;Caspase-3反义基因阻抑辐照诱导的HL-60细胞凋亡[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
2	李兆忠;张玲;王芸;毛海婷;李晓冰;;c-myc反义基因对人高转移肺癌细胞增殖和粘附活性的抑制作用[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
3	吕联煌;;反义基因药物治疗血液肿瘤研究进展[A];第六届全国中西医结合血液病学术会议论文汇编[C];2002年
4	金礼吉;安利佳;;端粒酶RNA反义基因对人肝癌细胞的影响[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5	张灿;鞠吉雨;冯永堂;李在连;;乙肝病毒反义X基因真核表达载体的构建[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
6	李兆忠;张玲;王芸;毛海婷;崔树龄;李晓冰;;Tiam-1反义基因抗肿瘤侵袭转移作用研究[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
7	孔晓红;邱明才;陈家童;;TGF-β_1反义基因抑制单侧肾切除糖尿病大鼠肾系膜增生的作用[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
8	魏萍;冯永堂;宫伟雁;魏兵;鞠吉雨;苗乃法;牟东珍;吴国庆;孟洁;;乙型肝炎病毒PreS反义基因真核表达载体的构建及体外抗HBV病毒的研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
9	黄玉吉;赖钟雄;;根癌农杆菌介导的ACS反义基因和PEAS基因转化香蕉研究[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
10	赵京龙;张贵祥;胡运胜;李玉洁;周根泉;张悦萍;吴继红;;VEGF反义核酸早期调控兔VX2瘤血管生成的DCE-MRI研究[A];2006年华东六省一市暨浙江省放射学学术年会论文汇编[C];2006年

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3	史俊庭谭永江;构筑抗小麦穗发芽育种体系[N];江苏农业科技报;2004年

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1	杨怀义;草莓果实膜联蛋白基因的cDNA克隆及其遗传转化的研究[D];沈阳农业大学;1999年
2	朱海生;草莓乙烯受体反义基因遗传转化的研究[D];福建农林大学;2008年
3	杨孟华;Tankyrase维持胃癌细胞端粒长度及其机制的研究[D];第三军医大学;2005年
4	曾勇;纳米技术在防治球囊损伤后再狭窄中应用的实验研究[D];中国协和医科大学;2001年
5	熊文化;PIN1反义基因对人骨肉瘤的抑制作用[D];华中科技大学;2005年
6	李拥军;反义单核细胞趋化蛋白1基因抑制移植静脉内膜增生的实验研究[D];中国协和医科大学;2000年
7	米曰堂;转反义B7-1基因治疗延长大鼠肝移植物存活时间的研究[D];山东大学;2008年
8	王建华;类风湿性关节炎的反义VEGF基因治疗实验研究[D];第二军医大学;2001年
9	王华森;番茄叶片GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因（GMPase）的cDNA克隆及功能分析[D];山东农业大学;2007年
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1	姚秋菊;小麦（Triticum aestivum）淀粉合成关键酶反义基因的构建及转化[D];河南农业大学;2003年
2	蔺琰东;马铃薯GBSSⅠ基因的ihpRNAi载体转化试管薯片及转基因块茎相关生理指标分析[D];甘肃农业大学;2011年
3	罗春莲;GBSS Ⅰ基因在赖草属植物中的进化式样及系统学应用研究[D];四川农业大学;2011年
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5	龙丽坤;大豆PEP羧化酶反义基因的克隆和载体构建[D];吉林农业大学;2003年
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