悬铃木叶片体外器官和体细胞胚胎发生及植株再生研究

【摘要】： 悬铃木是我国园林绿化的主要树种之一，具有较强的净化空气和遮阴能力，观赏性较强，木材可供建筑和家具等用，是集生态、经济和社会效益为一体的品质优良的树种。但随着树龄增大，其果毛污染成为社会环境的一大公害，为通过植物组织培养的方法从理论上研究悬铃木的不育机理，同时为不育转基因悬铃木的培育建立一个良好的基因转化受体系统，本文以悬铃木的叶片为外植体，通过正交试验和单因子试验，借助于细胞组织学观察，研究了不同基本培养基、植物激素不同浓度组合、不同温度处理、叶位和培养时间对诱导叶片形态发生及植株再生的影响，结果表明：叶片诱导植株再生的最佳基本培养基为WPM，非胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为WPM+0.6IBA+8.06-BA、适宜培养20天，胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为WPM+0.1IBA+5.06-BA、适宜培养25天，非胚性愈伤组织诱导不定芽的最佳培养基为WPM+0.1IBA+5.06-BA、适宜培养50天，胚性愈伤组织体细胞胚胎发育的最佳培养基为WPM+0.56-BA、适宜培养45天，叶片不定芽诱导的最佳培养基为WPM+0.1IBA+3.06-BA、适宜培养50天，最佳根诱导培养为1／2Ms0.1—0.5IBA、最佳胚状体苗发育的培养基为WPM；接种的叶片组织或愈伤组织在经10℃低温预处理3天后，置于25℃温度条件中培养，可不同程度的提高诱导率；叶片植株再生所用外植体以无菌苗的第七片真叶完全展开后从其基部往上数第五片叶不定芽诱导率最高；在培养过程中，生长素IBA有利于愈伤组织的诱导，细胞分裂素6-BA有利于不定芽的诱导，ZT对愈伤组织及不定芽的诱导有抑制作用；在开始对叶片愈伤组织的诱导中需要较高浓度的生长素和细胞分裂素，在诱导不定芽和体细胞胚时需降低它们的浓度，而在体细胞胚胎发育过程中不需要生长素，仅附加细 胞分裂素；米黄色、微紧的愈伤组织是器官发生的主要愈伤组织，褐、 紫红色、微松的愈伤组织是体细胞胚胎发生的主要愈伤组织，这些结 果为悬铃木采用不同的方式培育新品种提供了基础。