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无籽西瓜体细胞胚发生及其细胞学观察

张恒涛  
【摘要】:本文综述了植物体细胞胚发生的意义﹑机理及其影响因素等领域的研究进 展,对无籽西瓜体细胚发生的条件和体细胞胚发生过程中的影响因素进行了研 究,并对体细胞胚发生过程进行了细胞学观察,找出了无籽西瓜体细胞胚诱导 的最适条件,为无籽西瓜人工种子的制作奠定了基础,本研究主要结果如下: 1.不同基因型的无籽西瓜体细胞胚发生的难易程度和发生频率有很大差别, 在 10 个不同基因型中,黑蜜 5号、黑蜜 2号和郑抗无籽 4 号较容易诱导出体胚, 其余的 7 个品种体胚发生率极低,不适宜进行无籽西瓜体胚发生的研究。 2.本试验中子叶是无籽西瓜体细胞胚诱导的最佳外植体,子叶外植体的体胚 发生有直接和间接两种途径,而以间接途径为主;以下胚轴和胚根为外植体时, 则不能诱导体细胞胚的发生。 3.无籽西瓜体细胞胚诱导中,2,4-D 单独使用或与 BA 混合使用都不能诱导 体胚的发生。它们诱导出的愈伤组织均为非胚性愈伤组织,不利于体胚的诱导。 NAA 对无籽西瓜体细胞胚诱导的作用明显大于 2,4-D,与 BA 组合能很好的诱导 出胚性愈伤组织和体细胞胚。30g·L-1的蔗糖对体胚诱导效果最佳;外植体前期的 黑暗处理是无籽西瓜体细胞胚诱导过程所必需的条件。 4.不同基本培养基的试验结果表明,MS 是无籽西瓜体胚诱导的最适基本培 养基。不同基因型无籽西瓜子叶外植体诱导体细胞胚的最适培养基不同:黑蜜 5 号为 MS+BA3.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1;黑蜜 2号为 MS+BA3.0 mg·L-1+NAA0.1  mg·L-1;郑抗无籽 4号为 MS+BA2.0 mg·L-1+KT1.0 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1。三 个不同品种的体胚诱导率分别为 26.3%,25.6%和 22.2%。 5.石蜡切片观察表明,胚性愈伤组织的细胞排列紧密、细胞核大,非胚性愈 伤组织的细胞排列疏松、细胞核小。体细胞胚发生从胚性细胞开始,经历早期 原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚几个阶段,最后到成熟子叶胚,整个过程与合 子胚发育过程相似,子叶胚经培养有部分发育成体胚苗。 1


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