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《河南农业大学》 2007年
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黑曲霉木聚糖酶生产中试

张品品  
【摘要】: 经过以往几年的工作积累,我实验室经过筛选、诱变,已经得到了几株酶活较高的产木聚糖酶的黑曲霉菌株,有149,J506及A25等,酶活可达544IU/ml。将实验室保藏的各产木聚糖酶的黑曲霉菌株进行进一步的筛选,并对其进行单菌分离,得到一株产酶活力最高的菌株A.niger 25(9)号菌,摇瓶中发酵酶活达到589 IU/ml,将其确定为中试用菌株,进行5吨罐发酵实验。发酵在88小时选择放罐,发酵液酶活达到800IU/ml以上。 又对产酶培养基进行进一步优化,发现将原有培养基配方中的0.6%CaCO_3除去便可使培养基初始pH值控制在6.2左右,而不是原来的7.89,以免去用盐酸调整pH值的步骤,并且最终的发酵酶活还略有提高,达到了理想的调整结果。 在20吨发酵罐中进行发酵实验,发现1吨种子罐接种即可满足发酵需求,且最终放罐时木聚糖酶酶活达到900IU/ml以上,发酵周期在80—88h之间。 根据实验室结果和5吨罐实验结果,发现选用3%膨润土做为板框过滤时的助滤剂效果最佳。 对20吨罐发酵液进行超滤,发现20℃下的超滤对酶活的损失较小,对发酵液的收率达到75.3%。 将浓缩酶液加入适量的不同的防腐剂:苯甲酸钠0.2%、山梨酸钾0.2%、苯甲酸钠0.2%+山梨酸钾0.1%、叠氮化钠0.05%,然后以木聚糖酶活力2500IU/mL为标准进行成品酶的标准化处理。测得产品中还具有一定的β-葡聚糖酶和纤维素酶活性。将经过防腐及标准化的成品酶每种处理放三个保存桶(25kg装),于常温保存3个月后,测定酶活残存率,发现成品酶酶活残存率均高于90%,其中由苯甲酸钠和山梨酸钾组成的防腐剂,酶活残存率达到94.6%,为最理想的放腐剂,适合工业化生产。
【学位授予单位】:河南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:TQ925

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【参考文献】
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