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《河南农业大学》 2007年
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黑曲霉A-25产木聚糖酶的变温发酵研究

鲁晓娟  
【摘要】: 木聚糖酶能降解木聚糖成木糖或木寡糖,在饲料、造纸、食品以及能源工业中有着广泛的用途。木聚糖酶及木聚糖酶基因的研究是当前酶学研究热点之一,在木聚糖酶得研究中,酶活普遍低下是一直困扰人们的一个主要问题,酶活低就会造成在酶制剂的工业化生产中,加大成本量,阻碍其应用。而木聚糖酶的生产主要依靠微生物的发酵,在微生物的发酵过程中,人们发现微生物的菌体生长温度,往往与代谢产物的温度不一致,人为的控制发酵操作温度,进行不同阶段不同温度发酵,有助于其代谢产物的合成。 本文对黑曲霉A-25进行了变温发酵试验,并获得了很好的结果,通过进一步研究,探讨了变温发酵导致酶活提高的机理,主要研究内容如下: 首先采用不同的培养温度,对黑曲霉A-25分别进行了生长培养,通过测其生物量,得知黑曲霉A-25的最佳生长温度为33℃,而采用不同的发酵温度对黑曲霉A-25进行产木聚糖酶的实验,发现其最佳的产酶温度为29℃,接着对木聚糖酶的发酵过程进行变温操作,得出前48小时33℃以后降为29℃发酵是最佳的变温方案,最高酶活为721U/ml比29℃恒温发酵提高了110个酶活单位,且缩短了发酵周期8个小时。 通过变温和恒温条件下菌丝体的产酶能力分析,酶谱检测分析,相对定量分析,对变温发酵酶活提高的机理进行了研究,结果表明,变温发酵促进酶活大幅度提高不仅是因为菌丝体总量的增大,还由于单位菌丝体的产酶能力提高引起的,在分子水平上我们进一步通过酶谱检测发现变温发酵有可能刺激了XynⅢ提前合成或提高了合成量,应用实时定量RT-PCR法对xynⅢ进行了相对定量检测,表明变温发酵在mRNA的表达水平上促进了XynⅢ的大量表达,从而使蛋白质的合成量得到提高。
【学位授予单位】:河南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q93

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【共引文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
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