河南地区土壤拮抗链霉菌的分离鉴定及其种群多样性初步研究

【摘要】：从采自河南省嵩山和许昌地区的36份土样中共分离得到564株链霉菌。通过初筛和复筛,获得136株对小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)有拮抗作用的链霉菌菌株。其中30株抑菌效果较好且有一定的遗传稳定性,具有一定的研究和开发潜力。抑菌谱测定结果表明,30株链霉菌对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporium)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、高粱炭疽病菌(Colletotrichum graminicola)、黄瓜炭疽病菌(Glomerella cingulata)、辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)、玉米青枯病菌(Pythium aphanidermatum)、烟草赤星病菌(Alternaria alternate)、黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)等9种供试病原真菌均有一定的抑制作用。 根据菌株在高氏一号培养基上的培养特征和个体形态特征将30株链霉菌初步归为白孢类群、烬灰类群、灰红紫类群、淡紫灰类群、青色类群、蓝色类群、黄色类群、粉红孢类群、金色类群以及灰褐类群等10个类群和一个未知类群,其中金色类群是该地区种群数量最大的一个类群。 通过形态特征、培养特征、生理生化特性、细胞壁化学特征以及16S rDNA序列分析,将30株菌株分别初步鉴定为Streptomyces tauricus、Streptomyces vinaceus、Streptomyces flaveus、Streptomyces subrutilus、Streptomyces flavidofuscus、Streptomyces setonii、Streptomyces aureus、Streptomyces indigoferus、Streptomyces exfoliatus、Streptomyces europaeiscabiei、Streptomyces scabiei、Streptomyces ogaensis、Streptomyces lividans、Streptomyces lavendulae、Streptomyces capillispiralis、Streptomyces graminearus和Streptomyces olivochromogenes等23种链霉菌。 16S rDNA系统发育分析发现,菌株SXY46与Nocardiopsis lucentensis(NR_026342)处于一个独立的大分支、与S. flavidofuscus(AY999914)处于一个独立的亚分支,二者同源性为99.7%,但在形态特征和生理生化特性上有一定的差别,该菌很可能是拟诺卡氏菌属的一个潜在新种。关于该菌株的准确分类地位还有待于通过与标准菌株进行DNA-DNA杂交等方法进一步研究。 初步研究了河南部分地区土壤拮抗链霉菌的类群和菌株16S rDNA序列多样性。结果表明,河南地区土壤拮抗链霉菌资源较为丰富,拮抗链霉菌具有较为明显的多样性,有筛选新型链霉菌资源的潜力。