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《河南科技学院》 2010年
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奶牛血液红细胞抗菌肽的分离与纯化

宋涛  
【摘要】:近来,我国养牛业受金融危机的影响,正处于低谷时期,但据中国畜牧业协会最新统计显示。2009年上半年,全国牛存栏和出栏数分别为16,683万头和8,035万头,仍居世界前列。由屠宰肉牛而产生的副产物牛血接近百万吨,就目前而言,我国利用的牛血资源还是比较少和单调的,除了一小部分加工成饲料添加剂和生物制剂外,大部分都当做废物遗弃,既污染了资源又浪费了宝贵的蛋白质资源,而与我们相邻的发达国家之一日本对牛血资源的利用率约在50%左右。他们主要是开发肽类试剂、肽类药物以及功能食品和食品添加剂。 本试验采取离子交换层析和反相高效液相色潽法对臦褐械目咕慕写炕徊?对纯化的条件进行探索。采用琼脂扩散试验对抗菌肽的活性进行鉴定。采用质谱分析法对血液中的抗菌肽的进行分子量的检测,并初步检测出肽的序列。1L新鲜牛血液经过处理后得到红细胞和白细胞抗菌肽粗提物分别是76.37克和1.21g。30mL的牛血液红细胞抗菌肽粗提物经过离子交换层析纯化后得到7.82g粉状纯化物。经过反相高效液相色潽纯化和活性检测后,得到一段具有活性的纯化峰段,为纯化物进行分子量和分子结构的确定奠定了基础;试验证实,在牛血液红细胞中确实存在着天然的具有抗菌活性的多肽。 本试验采用溶胀的方法将牛血液中红细胞与白细胞进行分离,然后进一步粗提蛋白,通过等度洗脱的离子交换层析法将红细胞抗菌肽粗提物纯化,再运用梯度洗脱反相高效液相色潽法将样品进一步的纯化志钚允匝榻峁砻鞫嚯亩杂诟锢际弦跣跃?革兰氏阳性菌具有一定的抑制作用,有些对真菌具有抑制作用。奶牛血液红细胞抗菌肽的初步分离和鉴定,为抗菌肽的进一步开发提供了依据,为牛源抗菌肽的进一步理论研究及实际应用于兽药领域提供了基础。
【学位授予单位】:河南科技学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S879.9;S823

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 谷素美;牛血白细胞抗菌肽的粗提取及防腐保藏功效检测[D];河南农业大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 梁永利;;天然抗菌肽的来源及分类[J];安徽农业科学;2006年18期
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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3 杨微;高阳;王煜;周宏璐;;抗菌肽及其在农业上应用的研究进展[J];安徽农学通报;2008年15期
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6 董文娟;王学英;张涛;石生林;李群;迟俊;;柞蚕滞育蛹抗菌物质产生及其抑菌活性研究[J];安徽农业科学;2007年04期
7 黄现青;高晓平;赵改名;李苗云;柳艳霞;杨淑晶;;抗菌肽抗菌机理研究方法概述[J];安徽农业科学;2007年12期
8 陈俊杰;陈萍;;抗菌肽在推进绿色养殖体系建设过程中的优势[J];安徽农业科学;2007年17期
9 陈慧芸;;动物抗菌肽的研究进展[J];安徽农业科学;2008年08期
10 侯利霞;翟培;乐国伟;施用晖;;枯草杆菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质的研究[J];安徽农业科学;2008年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 谷巍;王静;;抗菌肽在养殖业中的应用进展[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
3 黄曼曼;邓颖妍;黄娟娟;曹环;曹庸;;抑菌肽的抑菌特性及其在食品中的防腐研究[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
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5 皮灿辉;彭永鹤;李永新;陈国众;谢灯养;张浩吉;;抗菌肽制剂对母猪死胎率和仔猪成活率的影响[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
6 ;Purification and Molecular Identification of an Antifungal Protein from the Hemolymph of Musca domestica(housefly)[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
7 赵玉蓉;周灿;范志勇;贺建华;;断奶及日龄对仔猪骨髓组织抗菌肽PR-39基因表达的影响[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
8 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
9 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
10 王静;祝平;;抗菌肽在养殖生产中的应用研究进展[A];2008山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林文凭;Bacillus subtilis ZJU15产生的抗菌肽研究[D];浙江大学;2010年
2 姜珊;两种水产动物抗菌肽的重组表达工艺优化与药理药效研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
3 张欣;昆虫细胞系的建立及其生物学特性与应用研究[D];中国林业科学研究院;2011年
4 任小青;鲶鱼骨酶解物的制备、抑菌性能、抑菌机理及其在食品中的应用研究[D];华东理工大学;2012年
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6 王可洲;兔小囊肽的分离鉴定及生物学活性研究[D];中国农业大学;2003年
7 蓝江林;美洲大蠊(Periplaneta americana L.)抗菌肽的研究[D];福建农林大学;2003年
8 翁宏飚;昆虫抗菌肽Cecropin B和Thanatin的杂合基因设计与表达研究[D];浙江大学;2003年
9 马卫明;猪小肠抗菌肽分离鉴定及其生物活性研究[D];中国农业大学;2004年
10 谢宝贵;银耳遗传转化系统的建立及三个品质基因的转化[D];福建农林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 葛静微;猪血中超氧化物歧化酶(SOD)和血红素的提取及SOD的应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 胡伶俐;牛杀菌—通透性增加蛋白和防御素基因融合质粒的构建及其在大肠杆菌中表达[D];华中农业大学;2010年
3 谭雯雯;猪β-防御素2多克隆和单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
4 金鑫;稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 陈卫华;麻蝇全蛋白提取及凝集素的纯化鉴定[D];江西师范大学;2010年
6 陈成;一株解淀粉芽孢杆菌产抗真菌物质的研究[D];华南理工大学;2010年
7 李斌;微胶囊血红素片生产技术研究[D];武汉工业学院;2010年
8 王静;海参多肽的酶法制备及体外抗氧化性能研究[D];烟台大学;2010年
9 金凤;AccRoyalisin重组表达及产物抑菌活性研究[D];浙江大学;2011年
10 刘儒;油桐花芽分化期外源激素对Tunglfy表达特性及光合作用的影响[D];中南林业科技大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 安贤惠,吕毅,李卫国,梁建国,徐春花,张崇星,董靖,赖仞;中国对虾PC-Ⅲ系列抗菌肽的分离纯化及活性[J];动物学研究;2005年04期
2 刘倚帆;徐良;朱海燕;张立可;汪以真;;抗菌肽与抗生素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的体外协同抗菌效果研究[J];动物营养学报;2010年05期
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4 赵爱珍,韩文瑜,孟宪荣,刘霞,曾林;生物抗菌肽的研究现状[J];动物医学进展;2005年11期
5 王燕;;抗菌肽cecropins的研究进展[J];广东饲料;2007年06期
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7 皮灿辉;彭永鹤;李永新;陈国众;谢灯养;张浩吉;;抗菌肽制剂对母猪死胎率和仔猪成活率的影响[J];中国畜牧兽医;2008年06期
8 曲朝杰;苗向阳;朱瑞良;张鑫;;抗菌肽的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2009年13期
9 郑启发,陈大成,黄自然,胡桂兵;人工合成柞蚕抗菌肽D基因转化沙田柚[J];华南农业大学学报;1999年01期
10 洪华珠,彭蓉,彭建新,杨忠;新型抗感染生物活性物质——昆虫抗菌肽的研究进展[J];华中师范大学学报(自然科学版);2003年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 李丽杰;酸马奶酒中酵母菌抑菌物质的粗提及生化特性研究[D];内蒙古农业大学;2004年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 薛晓阳;布日额;吴金花;刘洋;;牛乳腺炎金黄葡萄球菌肠毒素B基因的克隆及序列分析[J];中国病原生物学杂志;2011年12期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张勇军;抗菌肽在断奶仔猪日粮中添加效果的研究[D];湖南农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张煜;刘玮;丁汉凤;毕玉平;;抗菌肽的研究进展及在农业中的应用[J];安徽农业科学;2006年03期
2 梁永利;;天然抗菌肽的来源及分类[J];安徽农业科学;2006年18期
3 贾素娟,路福平,王昌禄,杜连祥;生物抗菌多肽[J];氨基酸和生物资源;2000年04期
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10 张素艳,王静,卞利萍,许云敏,王洪海,杨芃原;微柱高效液相色谱-质谱/质谱快速鉴定混合蛋白质新方法[J];高等学校化学学报;2002年07期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王可洲;兔小囊肽的分离鉴定及生物学活性研究[D];中国农业大学;2003年
2 马卫明;猪小肠抗菌肽分离鉴定及其生物活性研究[D];中国农业大学;2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 侯路珍,刘发央,谢小冬;萝卜抗菌肽基因AFP的克隆及其在大肠杆菌中的诱导表达[J];甘肃农业大学学报;2004年03期
2 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[J];现代畜牧兽医;2007年01期
3 朱勇;徐建雄;;抗菌肽饲料添加剂的研究进展[J];饲料工业;2006年03期
4 王雅静;李周权;;抗菌肽制剂代替抗生素作为饲料添加剂的研究[J];饲料研究;2006年04期
5 张召兄;潘晓亮;任耀军;;抗菌肽概述及抗菌分子机理的研究进展[J];草食家畜;2006年04期
6 黄莹;张守纯;赵越;张哲;张宇;赵旭;;抗菌肽基因工程研究进展及其在畜牧生产体系中的应用[J];安徽农业科学;2007年30期
7 张鑫;苗向阳;尹逊河;马艳芳;曲朝杰;张秋婷;;抗菌肽在转基因动植物中的研究进展[J];生物技术通报;2009年02期
8 韩文瑜;孙长江;;抗菌肽的研究现状与展望[J];中国兽药杂志;2009年10期
9 王德成;佘敏;佘锐萍;李文贵;王英华;孙泉;;抗菌肽的构效关系及其基因表达调控的研究进展[J];中国兽医科学;2008年03期
10 火焱;罗旭光;;抗菌肽在反刍动物生产中的应用[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2011年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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6 柯涛;毛晗;董彩华;郭学兰;黄思良;刘胜毅;;油菜抗菌肽基因的生物信息学分析[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
7 孙伟;沈以红;王晓莹;向仲怀;张泽;;家蚕抗菌肽基因的进化[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(3)[C];2009年
8 江丽娜;雷连成;韩文瑜;;牛蛙抗菌肽基因的真核表达及批量生产条件的初探[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
9 赵东红;戴祝英;周开亚;张林元;;人工合成家蚕抗菌肽基因类CMIV在昆虫细胞中的表达(摘要)[A];纪念六足学会创建八十周年、江苏省昆虫学会四十周年论文集粹[C];2000年
10 杨小蓉;朱家勇;;一个新家蝇抗菌肽基因——diptericin的克隆与生物信息学分析[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 曹继军 通讯员 赵如江;我科学家首次发现附睾中一种抗菌肽基因[N];光明日报;2001年
2 张学全;我国生命科学研究领域取得重大突破[N];中国医药报;2001年
3 吴存远 记者 朱彤;我首次证实绵羊生殖系统中存在抗菌肽[N];科技日报;2010年
4 ;原来生育可调控[N];新华每日电讯;2001年
5 暨南大学医药生物技术研究开发中心 郑青博士后;抗菌肽 前景广阔的新型抗生素[N];医药经济报;2001年
6 本报记者 杜军玲;建立自己的创新体系[N];人民政协报;2002年
7 奇云;男性避孕药物何时问世[N];中国医药报;2002年
8 毛杰;神奇昆虫入菜入药[N];北京科技报;2003年
9 本报记者 薛冬  通讯员 吴保平;生命科学在这里闪光[N];光明日报;2002年
10 艾夫;我国棉花抗黄萎病研究获重大成果[N];中国纺织报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王芳;高蛋白海洋解脂耶罗维亚酵母遗传改良以及表达重组抗菌肽的研究[D];中国海洋大学;2011年
2 孙龙;两种鞘翅目昆虫抗菌肽的分离纯化与活性研究[D];中国林业科学研究院;2012年
3 丁云超;鱼类卵黄高磷蛋白衍生抗菌肽的免疫调节功能的研究[D];中国海洋大学;2012年
4 枚春成(MAI XUAN THANH);二级结构对抗菌肽的抗菌活性及特异性的影响[D];吉林大学;2013年
5 黄金丰;α-螺旋型膜活性多肽对不同细胞膜的构效关系及作用机理研究[D];吉林大学;2011年
6 温武军;鲤抗菌肽基因的克隆及其功能研究[D];山东师范大学;2011年
7 冯新;重组鲎素的规模化制备及其体内外生物学效应与作用机制[D];吉林大学;2011年
8 肖向红;微生物胁迫下东北林蛙皮肤抗菌肽和功能蛋白差异表达的研究[D];东北林业大学;2012年
9 李丽;抗菌肽Abaecin制备及其对肉鸡生长及免疫影响的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
10 吕毅;海蛙(Fejervarya cancrivora)皮肤分泌液中抗菌多肽的分离纯化、分子克隆以及结构与功能的研究[D];南京农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋涛;奶牛血液红细胞抗菌肽的分离与纯化[D];河南科技学院;2010年
2 谷素美;牛血白细胞抗菌肽的粗提取及防腐保藏功效检测[D];河南农业大学;2012年
3 李文雯;乳糖诱导家蚕抗菌肽融合蛋白的表达[D];西北农林科技大学;2010年
4 李曾夏子;3-30KD蚯蚓抗菌肽的分离纯化及其抗菌效果的研究[D];湖南农业大学;2010年
5 李晓平;哈尔滨地区黑斑蛙(Rana nigromaculata)夏季皮肤抗菌肽多样性的研究[D];东北林业大学;2010年
6 侯恩娟;酪蛋白抗菌肽的制备与研究[D];西华大学;2010年
7 高飞;抗菌肽快速筛选方法与抗菌活性的研究[D];江南大学;2011年
8 黄平;草鱼肠道抗菌肽分离纯化及部分理化性质的研究[D];中南林业科技大学;2009年
9 梁苏;一种高效克隆抗菌肽编码基因的新方法[D];湖北大学;2011年
10 潘朋朋;光滑爪蟾皮肤抗菌肽的分离纯化及生物活性的鉴定[D];吉林大学;2012年
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