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《河南科技学院》 2017年
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CsEXP10基因RNAi干扰载体导入黄瓜的研究

倪蕾  
【摘要】:扩张蛋白是一类植物细胞壁活性蛋白,普遍存在于在正在生长的组织和成熟的果实中。黄瓜扩张蛋白基因CsEXP10基因来自于正在生长的黄瓜幼果,参与了黄瓜果实膨大生长过程。但该基因参与果实膨大生长进程、促进果实发育的作用机理目前还不明了。为了深入研究该基因的功能,本试验以“津优1号”黄瓜子叶节为外植体,研究了苗态、乙酰丁香酮(AS)在预培养和共培养基中的浓度、无菌水脱菌次数和噻孢霉素(Cef)在选择培养及生根培养基中的浓度对黄瓜遗传转化的影响,优化和建立了高效遗传转化体系;在此基础之上,通过农杆菌介导方法,将CsEXP10基因RNAi干扰载体成功导入黄瓜,获得了转基因植株,通过对转基因植株的生理生化指标测定,分析了干扰载体转化对黄瓜植株生长发育的影响;研究了NaCl胁迫对转基因黄瓜植株生长的影响,发现CsEXP10基因RNAi干扰载体的导入降低了黄瓜的耐盐性。主要研究结果如下:1.黄瓜遗传转化体系的优化。以“津优1号”黄瓜为试验材料,从苗态、AS和Cef浓度、无菌水冲洗次数、生根培养等几方面,优化和建立了农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系。结果表明,取苗态为子叶抱合时的子叶节,放置在预培养基(MS+2.0 mg/L6-BA+2.0 mg/L AgNO3+100μmol/L AS)中培养2 d,接着在共培养基(MS+2.0 mg/L6-BA+2.0 mg/L AgNO3+100μmol/L AS)中培养2 d,用无菌水冲洗3次,然后置于筛选培养基(MS+2.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L AgNO3+300 mg/L Cef+100 mg/L Kan)上进行不定芽诱导培养,不定芽长至2~3 cm时,切取不定芽放于生根培养基(MS+0.2 mg/L IAA+400mg/L Cef)上生根培养4 d,后转到培养基(MS+400 mg/L Cef)上继续进行生根培养,可获得较高的转化率。2.CsEXP10基因RNAi干扰载体导入黄瓜。在建立和优化黄瓜遗传转化体系的基础之上,进行CsEXP10基因RNAi干扰载体的转化,共得到了119棵抗性植株,存活下来34棵,经过PCR检测,最终得到了4株阳性转基因苗,转化率为11.76%。3.CsEXP10基因的功能。以非转基因植株为对照,对转基因植株的部分生长指标进行测定。结果表明:转基因植株的净光合速率(Photo)、可溶性糖含量、过氧化物酶(POD)活性均明显低于非转基因植株,而丙二醛(MDA)含量明显高于非转基因植株;此外,转基因植株的生长势较弱,株高低于对照植株,幼果横径和纵茎小于对照植株,成熟果实瘦小畸形,而对照植株的果实长相周正,生长良好。这说明CsEXP10基因干扰载体的导入抑制了黄瓜植株的生长发育,该基因是黄瓜植株生长和果实发育相关基因。4.盐胁迫对转基因黄瓜植株的影响。以非转基因植物为对照,研究了150 mmol/L氯化钠(NaCl)溶液处理对转基因黄瓜植株生长的影响。结果表明,转基因植株的Photo、气孔导度(Cond)、胞间CO2浓度(Ci)及蒸腾速率(Trmmol)、叶绿素a、叶绿素b含量、可溶性蛋白含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性明显低于非转基因植株,MDA含量显著高于非转基因植株,而可溶性糖含量和POD活性与对照相比差异不显著。盐胁迫处理6 d后,所有黄瓜植株的叶片和茎部等部位逐渐变黄干枯,但转基因植株首先出现干枯死亡,这说明CsEXP10基因RNAi干扰载体的导入显著降低了黄瓜的耐盐性。
【学位授予单位】:河南科技学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S642.2

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴家富;杨博文;向珣朝;许亮;颜李梅;;不同水稻种质在不同生育期耐盐鉴定的差异[J];植物学报;2017年01期
2 任丹莉;陈菲帆;王晖;秦亚光;张颜;李玉红;;黄瓜CsHIR1基因表达载体的构建及遗传转化[J];西北农业学报;2017年02期
3 孙超;单楠;王慧娟;章颖佳;王振雨;张振贤;眭晓蕾;;盐胁迫对黄瓜幼苗光合作用及其关键酶基因表达特性的影响[J];中国蔬菜;2016年08期
4 周艳;刘慧英;王松;张健伟;莘冰茹;;外源GSH对盐胁迫下番茄幼苗生长及抗逆生理指标的影响[J];西北植物学报;2016年03期
5 WANG Shun-li;Seong Sub Ku;YE Xing-guo;HE Cong-fen;Suk Yoon Kwon;Pil Son Choi;;Current status of genetic transformation technology developed in cucumber(Cucumis sativus L.)[J];Journal of Integrative Agriculture;2015年03期
6 王烨;顾兴芳;张圣平;苗晗;陈国华;谢丙炎;;RNAi载体导入黄瓜的遗传转化体系[J];植物学报;2014年02期
7 束胜;郭世荣;孙锦;袁颖辉;袁凌云;;盐胁迫下植物光合作用的研究进展[J];中国蔬菜;2012年18期
8 李艳茹;司龙亭;;黄瓜幼苗耐盐性的遗传分析[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2011年04期
9 刘春香;张卫华;曹齐卫;孙小镭;;黄瓜扩张蛋白Cs-EXP10基因5'序列的克隆和表达的初步分析[J];华北农学报;2011年01期
10 常晓晓;饶景萍;刘乐;;柿果实扩张蛋白基因cDNA克隆及原核表达[J];园艺学报;2010年07期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 李政;蜡梅扩张蛋白基因CpEXP1的表达分析及其功能验证[D];西南大学;2014年
2 李文枫;番茄高色素hp2基因的克隆、遗传转化及功能验证[D];东北农业大学;2014年
3 徐冉;黄瓜(Cucumis sativus L.)遗传转化、植株再生及驯化技术研究[D];扬州大学;2010年
4 肖守华;西瓜、甜瓜遗传转化体系的建立及转基因植株的抗病性分析[D];山东农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳华;黄瓜离体再生和农杆菌介导的遗传转化体系的建立与优化[D];河南科技学院;2016年
2 齐飞;黄瓜谷氧还蛋白CsGRX1基因对黄瓜遗传转化体系的建立[D];西北农林科技大学;2016年
3 张玉园;南瓜子叶节离体再生体系的构建与耐盐StNHX1基因的转化[D];河南科技学院;2015年
4 王喜涛;黄瓜种质资源耐盐性评价及其遗传分析[D];东北农业大学;2014年
5 曹凤娟;白桦BpFLC基因的过量表达及RNAi遗传转化研究[D];东北林业大学;2014年
6 吴振;黄瓜离体再生和遗传转化体系的建立[D];南京农业大学;2012年
7 张守杰;黄瓜再生体系的建立及农杆菌介导的遗传转化[D];山东农业大学;2011年
8 张玉;ICE1基因植物表达载体构建及转化番茄的研究[D];东北农业大学;2010年
9 朱妍妍;RNAi技术在黄瓜抗根结线虫遗传转化中的应用研究[D];山东农业大学;2008年
10 白婧;农杆菌介导β-1,3-葡聚糖酶(BG2)基因转化南瓜的研究[D];东北农业大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李晨;李秀杰;韩真;刘莉萍;李勃;;非生物胁迫对葡萄光合作用的影响研究进展[J];山东农业科学;2017年12期
2 田蕾;陈亚萍;刘俊;马晓刚;王娜;杨兵;李莹;郭海东;李娟;胡慧;张银霞;李培富;;粳稻种质资源芽期耐盐性综合评价与筛选[J];中国水稻科学;2017年06期
3 王耘;金潇潇;赵辉;郝振萍;;盐胁迫对鲜食蚕豆幼苗光合特性及抗氧化酶活性的影响[J];北方园艺;2017年20期
4 CHEN Guo-hua;TIAN Xue-liang;WANG Dian-dong;LING Jian;MAO Zhen-chuan;YANG Yu-hong;XIE Bing-yan;;Expression of mitogen-activated protein kinase double-stranded RNA in cucumber has no apparent effect on the diversity of rhizosphere archaea[J];Journal of Integrative Agriculture;2017年10期
5 刘文瑜;杨发荣;黄杰;魏玉明;金茜;;NaCl胁迫对藜麦幼苗生长和抗氧化酶活性的影响[J];西北植物学报;2017年09期
6 杨秀艳;李焕勇;朱建峰;陈军华;刘正祥;唐晓倩;张华新;;NaCl胁迫下2种白刺光合特性适应性研究[J];核农学报;2017年10期
7 佘汉基;李鹏飞;薛立;麦凝珺;蔡金桓;李秋静;;3种园林植物响应盐胁迫的荧光特性[J];中南林业科技大学学报;2017年08期
8 周赟;张林平;刘艳;;盐胁迫对甘草幼苗生长及其生理生化特性的影响[J];北方农业学报;2017年02期
9 蔡金桓;都成林;薛立;叶自慧;佘汉基;李子华;;盐胁迫对4种园林植物光合特性的影响[J];西南林业大学学报(自然科学);2017年02期
10 姚侠妹;纪敬;岳剑云;谢田田;邓楠;史胜青;江泽平;常二梅;;ABA对盐胁迫下侧柏活性氧代谢及其相关基因表达的研究[J];西北植物学报;2017年01期
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1 吕品;西瓜果实类胡萝卜素代谢相关基因的克隆、表达与遗传转化研究[D];郑州大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 鲁晓晓;印度南瓜离体再生与遗传转化体系的优化[D];河南科技学院;2017年
2 倪蕾;CsEXP10基因RNAi干扰载体导入黄瓜的研究[D];河南科技学院;2017年
3 潘玲玲;黄瓜CsNR基因的克隆、遗传转化及在硝酸盐胁迫下的功能分析[D];山东农业大学;2017年
4 李艳华;黄瓜离体再生和农杆菌介导的遗传转化体系的建立与优化[D];河南科技学院;2016年
5 张婧;病毒诱导的石竹PDS基因沉默体系建立及优化[D];内蒙古农业大学;2016年
6 齐飞;黄瓜谷氧还蛋白CsGRX1基因对黄瓜遗传转化体系的建立[D];西北农林科技大学;2016年
7 张加一;南瓜未受精胚珠再生植株方法研究[D];西北农林科技大学;2016年
8 刘双;拟南芥抗寒基因ICE1的克隆、功能分析及转化玉米的研究[D];吉林农业大学;2016年
9 张玉园;南瓜子叶节离体再生体系的构建与耐盐StNHX1基因的转化[D];河南科技学院;2015年
10 赵新涛;番茄和黄瓜再生体系的研究[D];青岛科技大学;2015年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 单长卷;付远志;彭贝贝;;盐胁迫下谷胱甘肽对玉米幼苗根系抗氧化能力的影响[J];灌溉排水学报;2015年10期
2 陈菲帆;王琪琦;钟辉丽;付冰冰;任丹莉;李玉红;;基于In-fusion技术的ERECTA基因植物表达载体的构建[J];北方园艺;2015年18期
3 钟辉丽;李玉红;陈雪琳;由曜华;;黄瓜离体器官再生体系的优化[J];中国农学通报;2015年10期
4 WANG Shun-li;Seong Sub Ku;YE Xing-guo;HE Cong-fen;Suk Yoon Kwon;Pil Son Choi;;Current status of genetic transformation technology developed in cucumber(Cucumis sativus L.)[J];Journal of Integrative Agriculture;2015年03期
5 周鹤莹;张玮;张卿;曹庆芹;沈元月;秦岭;邢宇;;森林草莓‘Hawaii4’高效遗传转化系统的建立[J];北京农学院学报;2015年01期
6 李月;赵俊龙;杨绪勤;杨俊俊;潘俊松;何欢乐;蔡润;;黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化[J];上海交通大学学报(农业科学版);2014年06期
7 潘晓飚;谢留杰;陈剑;黄善军;徐建龙;;盐胁迫下杂交水稻种子发芽特性及耐盐性评价[J];中国农学通报;2014年21期
8 王玮玮;唐亮;周文龙;杨燕;高波;赵云峰;王伟;;谷胱甘肽生物合成及代谢相关酶的研究进展[J];中国生物工程杂志;2014年07期
9 李小兵;黎华寿;张泽民;陈桂葵;;水稻盐分胁迫研究进展[J];广东农业科学;2014年12期
10 毛双双;李玉红;周旋;李万青;陈菲帆;程智慧;陈鹏;;黄瓜过敏性诱导反应蛋白基因(CsHIR1)原核表达及其多克隆抗体制备[J];西北植物学报;2014年05期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 马婧;金荞麦[Fagopyrum dibotrys (D.Don) Hara]类黄酮生物合成途径重要功能基因的克隆、功能验证及表达特性分析[D];西南大学;2012年
2 刘群;蜡梅非特异性脂转移蛋白基因nsLTP家族成员克隆及其抗逆功能分析[D];西南大学;2009年
3 眭顺照;蜡梅开花过程基因表达的ESTs分析与凝集素基因功能的初步鉴定[D];西南大学;2006年
4 童斌;柿果实扩张蛋白cDNA克隆及其生物活性研究[D];西北农林科技大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 岳媛;杜鹃花属植物种子育苗技术及耐热性研究[D];南京林业大学;2013年
2 赵靖明;水土保持经济树种薄壳山核桃的耐盐性及耐水性评价研究[D];西南大学;2013年
3 臧丽娜;白桦BpFLC基因的克隆及遗传转化[D];东北林业大学;2013年
4 任国良;黄瓜果瘤基因Tu的遗传转化研究及黄瓜无侧枝基因nlb的初步定位[D];上海交通大学;2013年
5 薛晓锋;紫花苜蓿再生体系及遗传转化的研究[D];河南科技学院;2012年
6 吴振;黄瓜离体再生和遗传转化体系的建立[D];南京农业大学;2012年
7 张守杰;黄瓜再生体系的建立及农杆菌介导的遗传转化[D];山东农业大学;2011年
8 张若纬;黄瓜离体再生和遗传转化体系的建立[D];中国农业科学院;2010年
9 曹丹丹;OsRACK1在水稻种子萌发期响应干旱和盐胁迫的功能分析及其融合蛋白的表达和纯化[D];扬州大学;2010年
10 张玉;ICE1基因植物表达载体构建及转化番茄的研究[D];东北农业大学;2010年
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中国期刊全文数据库 前10条
1 王桂良;怎样预防苦味黄瓜的产生[J];蔬菜;2000年10期
2 ;如何减少黄瓜的苦味?[J];中国改革(农村版);2002年01期
3 李秀启;黄瓜根系两次生理性死亡及防治措施[J];长江蔬菜;2004年01期
4 李桂军;黄瓜“树”上结黄瓜——访中国农科院黄瓜“树"课题组负责人杨其长博士[J];当代蔬菜;2004年06期
5 崔家俊;;土壤深耕与黄瓜生长状况的关系[J];河南农业;2005年12期
6 李品汉;;科学种植让黄瓜不再“苦”[J];云南农业;2006年02期
7 李建良;张冰;;黄瓜苦味原因及防止对策[J];蔬菜;2006年04期
8 季淑文;;黄瓜施肥新技术[J];农民致富之友;2009年05期
9 何欢宇;蔡润;;创博微生物肥料在设施连作黄瓜上的应用试验[J];上海蔬菜;2010年03期
10 侯广福;黄瓜贮藏新技术[J];农村新技术;1995年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 许勇;王永健;;黄瓜耐低温研究中几个问题的讨论[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
2 郭世荣;汪天;马月花;;根的呼吸活性与黄瓜和番茄根际低氧耐性的关系[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
3 吴佳文;宫海军;;硅对番茄和黄瓜镉的吸收、分配及抗氧化防御系统的影响[A];中国园艺学会2013年学术年会论文摘要集[C];2013年
4 王永健;张峰;许勇;陈青君;张海英;;黄瓜低温弱光耐受性机理及其应用研究的主要进展[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
5 杜永臣;;高温对黄瓜根系可溶性糖含量和α-半乳糖苷酶活性的影响[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
6 郭世荣;橘昌司;高洪波;汪天;;营养液温度和溶解氧浓度对黄瓜植株氮化物含量的影响[A];中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集[C];2004年
7 蒋红云;张燕宁;冯平章;;石蒜等植物对黄瓜生长抑制作用的初步研究[A];中国第二届植物化感作用学术研讨会暨中国植物保护学会植物化感作用专业委员会成立大会论文摘要集[C];2005年
8 徐慧妮;王秀峰;孙旭东;杨凤娟;杜栋良;;黄瓜MAPK基因的生物信息学分析及原核表达[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
9 许良政;刘志伟;刘惠娜;廖富林;;不同光照条件对缺铁黄瓜根系Fe~(3+)还原酶活性的影响[A];梅州市自然科学优秀学术论文集(第十届)[C];2010年
10 杜静;郭世荣;宋夏夏;孙锦;;亚精胺对Ca(NO_3)_2胁迫下黄瓜幼苗根系生长和形态结构变化的影响[A];2013中国园艺学会设施园艺分会学术年会·蔬菜优质安全生产技术研讨会暨现场观摩会论文摘要集[C];2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 赵福顺;黄瓜高产的关键措施[N];吉林农村报;2013年
2 定州市塔宣村 任士哲;五项措施做保障越夏黄瓜不“闹秧”[N];河北科技报;2013年
3 赵学宁;黄瓜生长大小不均的原因及防治[N];山西科技报;2013年
4 于文英;黄瓜:看瓜须 知长势[N];陕西科技报;2013年
5 任丘市农业局 刘亚娟;秋延迟黄瓜遇不良天气的管理[N];河北科技报;2014年
6 宁夏吴忠气象局 黄万银;黄瓜生长对环境条件的要求[N];陕西科技报;2001年
7 衡水 韩会霞;黄瓜味苦 巧管能除[N];河北农民报;2009年
8 刘桂兰;预防苦黄瓜有绝招[N];山西科技报;2001年
9 胡良惠;黄瓜巧种植 一架收两茬[N];山西科技报;2003年
10 王明华;黄瓜苦味的形成原因及预防措施[N];山西科技报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王燕;黄瓜动蛋白参与果实发育早期细胞分裂和细胞膨大过程的研究[D];中国农业科学院;2015年
2 吴帼秀;H_2S调控黄瓜耐冷性及其信号转导机理[D];山东农业大学;2016年
3 周新刚;连作黄瓜土壤生态环境特征及对黄瓜生长的影响[D];东北农业大学;2011年
4 缪旻珉;黄瓜(Cucumis sativus L.)热伤害与热适应生理机制及耐热栽培技术研究[D];南京农业大学;2000年
5 由海霞;设施黄瓜不同种植模式的环境效应及其化感作用研究[D];西北农林科技大学;2007年
6 胡元森;黄瓜连作障碍因子分析及其生物修复措施探讨[D];南京农业大学;2005年
7 张韵;黄瓜自毒物质对细胞生长的影响及缓解机制[D];浙江大学;2009年
8 王玉彦;设施黄瓜不同种植模式及其土壤修复机理的研究[D];东北农业大学;2009年
9 李海云;设施土壤阴离子种类对黄瓜生育障害机理的研究[D];山东农业大学;2002年
10 王柳;京郊日光温室土壤环境特征与黄瓜优质高产相关性的研究[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 沈富;痕量灌溉管埋深对沙培黄瓜、基质培西葫芦、土培辣椒生长发育的影响研究[D];宁夏大学;2015年
2 常蕊;亚适宜温光环境下增施钾肥对黄瓜生长、生理指标和产量的影响[D];河南科技大学;2015年
3 赵飞;黄瓜新品种筛选与良种繁育及推广模式研究[D];上海交通大学;2014年
4 董彦红;CO_2加富下水氮耦合对黄瓜生长及生理特性的影响[D];山东农业大学;2015年
5 张惠;邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对黄瓜生育期毒性效应研究[D];东北农业大学;2015年
6 牟雪姣;黄瓜有机生态栽培技术研究[D];安徽农业大学;2013年
7 王全智;嫁接对黄瓜生长、品质和生理特性的影响[D];南京农业大学;2013年
8 程荣;黄瓜LRR型抗病相关蛋白基因的表达分析与载体构建[D];沈阳农业大学;2016年
9 范莲雪;黄瓜耐低氮胁迫生理及分子机制初步研究[D];东北农业大学;2016年
10 王海涛;黄瓜耐弱光鉴定方法研究及分子标记[D];东北农业大学;2016年
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