收藏本站
《河南中医药大学》 2016年
加入收藏

基于微透析等技术探讨恐伤孕鼠对其子代情志和认知发育的影响

万海娇  
【摘要】:目的采用旁观电击法制备孕期恐伤肾动物模型,从母鼠行为学得分、ACTH、GC的分泌情况等方面评价模型的制备。择不同日龄仔鼠进行行为学指标检测,以观察孕期恐伤肾对其仔鼠情志和认知发育的影响,并初步探究海马组织单胺类、氨基酸类神经递质与仔鼠情志和认知发育障碍的关联。方法80日龄SP F级雌鼠34只,体重220-250g;雄鼠25只,体重250-290g。运用水迷宫等方法确定动物的情志和认知水平,选取情志和认知在同—基线水平的雌鼠运用随机数字表法分为对照组、模型组,每组各15只,多余的雌鼠备用;选取15只情志和认知基线水平一致的雄鼠用于合笼,剩余的作为电击鼠用。于合笼笫一日开始采用旁观电击法进行造模,造模期间观察及检测的指标:(1)孕鼠每隔6日采用旷场实验、糖水偏好实验、悬尾实验等行为学方法对其心理应激状态进行评价;(2)孕16日时运用Morris水迷宫实验评价其空间学习和记忆能力; (3)孕20日时行目内眦静脉取血测定ACTH、GC的含量。孕鼠产仔后,每窝随机抽取5只仔鼠继续饲养,观察记录仔鼠情志和认知的发育情况: (1)一般发育情况,包括开眼、被毛、张耳等; (2)神经发育情况,包括感觉反射,听觉惊跳反射、四肢抓握反射等: (3)运用旷场实验、糖水偏好实验、悬尾实验、Morris水迷宫实验等行为学方法分别评价2 1、80日龄仔鼠情志与认知的发育情况,并将其与母鼠孕期行为学表现相关联; (4)运用微透析联合高效液相色谱电化学法检测21、80日龄仔鼠海马组织中单胺类、氨基酸类神经递质的含量,并分析其与仔鼠情志和认知发育情况的相关性。结果1.孕期恐伤肾模型制各: (1)旷场实验中,模型组孕鼠的垂直得分与水平得分均较对照组孕鼠低,清洁次数少,排便粒数多,差异有统计学意义(JF)0.05),清洁次数和粪便粒数的造模时间与刺激因素之间存在交互作用,而垂直得分与水平得分的造模时间与刺激因素之间均不存在交互作用; (2)糖水偏好实验,模型组孕鼠的糖水偏好值随着造模时间的推移不断降低,差异有统计学意义(P0.05);(3)悬尾实验中,随着造模时间的推移模型组孕鼠悬尾实验空中静止时间增多,差异有统计学意义(P0.05),孕鼠在空中静止的时间与刺激因素之间存在交互作用(P0.05);(4) Morris水迷宫实验中,模型组孕鼠的第1、2、3日平均逃避潜伏期均较对照组孕鼠延长,游泳速度缓慢,跨台次数少,20%边缘区域停留时间延长,差异有统计学意义(JP0.05); (5)模型组孕鼠的血浆ACTH、GC水平较对照组升高,差异有统计学意义(P0.05); (6)模型组孕鼠产仔数较对照组减少,差异有统计学意义(P0.05)。2.各组仔鼠一般发育情况及神经发育情况的比较:模型组仔鼠出牙、被毛、出现感觉反射、四肢放置反射、负向趋地性、步态反射的时间均较对照组仔鼠晚,差异有统计学意义(P0.05),而在张耳、开眼、翻身、出现听觉惊跳反射、四肢抓握反射方面无差异(P0.05)。3.不同日龄仔鼠行为学得分的比较: (1)旷场实验中,模型组21、80日龄仔鼠较对照组同日龄仔鼠垂直得分、水平得分低,差异有统计学意义(P0.05),而在大便粒数、清洁次数方面无差异(P0.05);(2)2 1、80日龄模型组仔鼠糖水消耗量、糖水偏好值均较对照组同日龄仔鼠减小,差异有统计学意义(P0.05);(3)21、80日龄模型组仔鼠悬尾实验空中停止挣扎的时间较对照组同日龄仔鼠长,差异有统计学意义(P0.05);(4)21、80日龄对照组仔鼠平均逃避潜伏期较同日龄模型组短,20%边缘区域停留时间短,游泳速度快,跨台次数多,差异有统计学意义(P0.05)。4.不同日龄仔鼠ACTH、GC的分泌情况:21、80日龄模型组仔鼠血浆中ACTH、GC水平均较对照组同日龄仔鼠升高明显,差异有统计学意义(P0.05)。5.不同日龄仔鼠海马区单胺类神经递质及其代谢产物含量的比较:(1)21日龄模型组仔鼠海马组织中L-DOPA、5-HT的水平各个灌流时间点均较对照组低,差异有统计‘学意义(P0.05),80日龄仔鼠之间无差异(P0.05);(2)21、80日龄模型组仔鼠海马组织中NE、EP、DOPAC、 DA、HVA的水平各个灌流时间点皆较对照组低,差异有统计学意义(JF)0.05)。6.不同日龄仔鼠海马区氨基酸类神经递质含量的比较: (1)21、80日龄模型组仔鼠海马组织中GLU、GLY的含量各个灌流时间点均较对照组高,GABA则相反,差异有统计学意义(P0.05);(2)21日龄模型组仔鼠海马组织中的ASP水平各个灌流时间点皆较照组高,差异有统计学意义(P0.05),而80日龄时此指标则无明显差异(P0.05)。7.相关性分析: (1)21、80日龄仔鼠的平均逃避潜伏期与母鼠平均逃避潜伏期、跨台次数存在正相关,与母鼠GC、ACTH的含量存在负相关关系,差异有统计学意义(P0.05); (2)21日龄仔鼠海马区单胺类神经递质及其代谢产物EP、DOPAC、DA、HVA、5-HT与其平均逃避潜伏期、跨台次数、垂直得分、水平得分、糖水偏好值存在正相关,与20%边缘区域停留时间、空中停止挣扎的时间存在负相关关系,差异有统计学意义(P0.05); (3)21日龄仔鼠海马区氨基酸类神经递质GLU、GLY与其平均逃避潜伏期、跨台次数、垂直得分、水平得分、糖水偏好值存在负相关,与其20%边缘区域停留时间、空中停止挣扎的时间存在正相关,差异有统计学意义(P0.05),而ASP与其相关关系则相反。结论1.运用旁观电击法制备的孕期恐伤肾模型在行为学、ACTH、GC等方面均表现出较高的应激状态,可以用于恐伤肾模型的制备2.孕期恐伤肾对其仔鼠情志和认知发育有影响;3.仔鼠海马组织中单胺类、氨基酸类神经递质的含量与其情志和认知发育关系密切
【关键词】:恐伤肾 情志和认知 单胺类神经递质 氨基酸类神经递质
【学位授予单位】:河南中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R714.2
【目录】:
  • 缩略词对照表6-7
  • 摘要7-10
  • Abstract10-14
  • 前言14-16
  • 实验一 孕期恐伤肾对母代及子代情志和认知发育近远期影响的行为学研究16-34
  • 1 实验目的16
  • 2 材料与方法16-19
  • 2.1 实验材料16-17
  • 2.2 实验内容和方法17-19
  • 3 统计方法19-20
  • 4 结果20-34
  • 4.1 一般情况20
  • 4.2 恐伤肾模型评价20-25
  • 4.3 仔鼠的发育情况25-27
  • 4.4 孕期恐伤肾对不同日龄仔鼠情志与认知发育的影响27-31
  • 4.5 相关性分析31-34
  • 实验二 运用微透析技术探讨恐伤孕鼠对其子代海马单胺类神经递质及其代谢产物分泌的影响34-51
  • 1 实验目的34
  • 2 材料与方法34-37
  • 2.1 实验材料34-35
  • 2.2 实验内容与方法35-37
  • 3 统计方法37
  • 4 结果37-51
  • 4.1 探针回收率及植入位置的确定37-38
  • 4.2 HPLC-ECD测定单胺类神经递质的方法学评价38-40
  • 4.3 不同日龄仔鼠海马区单胺类神经递质及其代谢产物的水平40-49
  • 4.4 不同日龄仔鼠情志和认知发育的行为学参数与其海马区单胺类神经递质及其代谢产物含量的相关性分析49-51
  • 实验三 运用微透析技术探讨恐伤孕鼠对其子代海马氨基酸类神经递质分泌的影响51-60
  • 1 实验目的51
  • 2 材料与方法51-52
  • 2.1 实验材料51
  • 2.2 实验内容与方法51-52
  • 3 统计方法52
  • 4 结果52-60
  • 4.1 探针回收率的确定52
  • 4.2 HPLC-ECD测定氨基酸类神经递质的方法学评价52-54
  • 4.3 不同日龄仔鼠海马组织细胞外液中氨基酸类神经递质的水平54-58
  • 4.4 不同日龄仔鼠情志和认知发育的行为学参数与其海马区氨基酸类神经递质含量的相关性分析58-60
  • 讨论60-70
  • 结论70-71
  • 参考文献71-77
  • 致谢77-78
  • 附录178-84
  • 参考文献81-84
  • 附录284

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刁桂杰;敖占柱;;镁离子对孕鼠妊娠期高血压模型血浆内皮素的影响[J];齐齐哈尔医学院学报;2008年16期
2 马成斌,庄依亮,许元初,杨幼明;硫酸镁对妊高征孕鼠重要器官的影响[J];泰山医学院学报;1999年03期
3 赵长峰,姜会敏;锰对镉致孕鼠毒性的拮抗作用研究[J];中国公共卫生;2001年08期
4 俞丽丽,李力,陈鸣,胡厚祥,祝之明;寒冷刺激对孕鼠肾素-血管紧张素系统的影响[J];环境与健康杂志;2004年02期
5 刁桂杰;林永富;吴德荣;胡继娅;白正勇;杨峥;李淼;盘小娟;;低镁在孕鼠妊娠期高血压疾病发病的相关性研究[J];中国优生与遗传杂志;2007年12期
6 滕红;慢性一氧化氮阻滞导致孕鼠妊高征改变及三种血管活性介质变化[J];国外医学.妇产科学分册;1998年06期
7 吕慧敏,周湘艳,李莉,张志兴;氚在孕鼠体内的分布和向胎鼠转移特点的研究[J];中华放射医学与防护杂志;1994年02期
8 肖建平,王海琦,郭红,徐昌芬,葛环;雌激素与孕鼠肝内胆汁淤积症实验研究[J];右江民族医学院学报;2003年04期
9 滕红,朱宇,朱凤全;慢性阻滞一氧化氮合成致孕鼠妊娠高血压综合征样变化的研究[J];白求恩医科大学学报;1999年01期
10 张韵娴,张鹏宇,吴宁;优生宁对孕鼠姐妹染色单体交换作用的实验研究[J];中医药学报;2000年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 俞丽丽;李力;陈鸣;;寒冷刺激诱发孕鼠妊高征样的改变[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
2 赵长峰;姜会敏;韩国安;赵秀兰;韩雪梅;;铜对镉致孕鼠胚胎及肝、肾毒作用的拮抗研究[A];中国营养学会第八次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2000年
3 高希宝;朱振平;袁晓艳;史丽;;锌对镉致孕鼠体内微量元素分布改变的影响[A];中国微量元素科学研究会学术研讨会论文集[C];2004年
4 王欲;刘彩霞;;强迫游泳后孕鼠中枢ERα的表达[A];东北三省第四届妇产科学术会议论文汇编[C];2008年
5 杜美蓉;闫凤亭;李大金;;环孢素A诱导妊娠失败模型孕鼠外周母一胎免疫耐受[A];首届沪浙妇产科学术论坛暨2006年浙江省妇产科学学术年会论文汇编[C];2006年
6 夏俊波;朱婧;王利民;王娇莉;;孕鼠孕期1α,25-二羟维生素D3水平对仔鼠变应性气道炎症的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年
7 周京琳;李伟;石冰;徐斌;吴晓华;何苇;;C57BL6J孕鼠血浆在腭胚突发育过程中代谢轨迹分析[A];第七届全国唇腭裂学术会议论文集[C];2009年
8 张熙;张苏丽;杨光照;熊海燕;权琳;刘慧荣;;AT1抗体阳性孕鼠后代对代谢性疾病的易感性增加[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
9 黄楠;刘建;;FXR、IBABP在妊娠肝内胆汁淤积症孕鼠胆汁酸肠肝循环中作用机制的探讨[A];全国围产医学专题学术研讨会论文汇编[C];2007年
10 孙轶;杨慧敏;廖国仪;周冬;余灵;黄云祖;周天鸿;;叶酸缺乏孕鼠子代脑组织DNA甲基化水平的变化[A];中国优生优育协会第三届学术研讨会专辑[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 记者  毛黎;孕鼠越运动 小鼠越聪明[N];科技日报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘林青;H5N1流感病毒感染孕鼠的机制以及养禽业人员禽流感感染风险调查[D];中国农业大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王姝婷;植入期CS_2暴露致孕鼠自噬水平变化及膳食补充NCG对妊娠结局的影响[D];山东大学;2016年
2 万海娇;基于微透析等技术探讨恐伤孕鼠对其子代情志和认知发育的影响[D];河南中医药大学;2016年
3 王蕾蕾;三氯生对孕鼠妊娠结局的影响及初步机理探讨[D];兰州大学;2013年
4 杜边英;三聚氰胺对孕鼠泌尿生殖系统及胎盘功能的影响[D];山西医科大学;2011年
5 秦莹莹;罗汉果甜甙对妊娠糖尿病孕鼠血糖及胚胎发育影响[D];遵义医学院;2013年
6 王欲;强迫游泳后孕鼠中枢ER_α的表达[D];中国医科大学;2008年
7 何佳;益卫汤抗孕鼠流感病毒的实验研究[D];湖北中医学院;2009年
8 王静;慢性温和应激对孕鼠脑海马区5-羟色胺及受体表达变化的影响[D];中国医科大学;2010年
9 兰易;FXR及其靶基因调节肝内胆汁淤积孕鼠胆汁酸代谢的分子机制研究[D];重庆医科大学;2008年
10 黄婷;孕鼠体内高胆酸水平对胎鼠肺组织形态的影响[D];中南大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026