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《新乡医学院》 2016年
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高迁移率族蛋白1对小鼠脂肪细胞自噬的影响

冯欢欢  
【摘要】:背景近年来,随着全球肥胖人数的逐年上升,肥胖及其相关的代谢性疾病已成为影响人类健康的主要疾病之一。有研究表明,肥胖可导致脂肪组织或全身的慢性低度炎症已达成共识,但其发生机制还未阐明。高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)是一个重要的炎症介质,与慢性炎症的发生发展密切相关。自噬作为一种广泛存在于真核细胞中的生命现象,它可以发挥细胞的保护机制,来对抗慢性炎症对脂肪细胞的损伤;但目前关于HMGB1、脂肪细胞和自噬的研究还未见报道,机制仍不清楚。目的探讨HMGB1对3T3-L1脂肪细胞自噬的影响,为进一步阐明其作用机制奠定基础。方法1.HE(haematoxylin-eosin,HE)染色:检测正常饮食小鼠与高脂饮食小鼠附睾脂肪组织,对比其脂肪细胞的变化;2.细胞转染:在3T3-L1前脂肪细胞中转染HMGB1si RNA,检测HMGB1的表达;3.Western blot:提取小鼠附睾脂肪组织和3T3-L1细胞的蛋白,检测HMGB1以及自噬相关蛋白LC3的表达;4.油红O染色:不同分化时期的3T3-L1脂肪细胞,观察其脂滴的表达量。结果1.HE染色结果显示,正常饮食小鼠的附睾脂肪组织与高脂饮食的相比,发现高脂饮食小鼠的脂肪细胞体积变大;2.Western结果显示,正常饮食小鼠的附睾脂肪组织与高脂饮食的相比,发现高脂饮食小鼠体内炎症因子HMGB1表达升高(均P0.05),与此同时,在高脂饮食小的脂肪组织中自噬蛋白,LC3-II/I表达量增多(均P0.00);3.与对照组相比,当使用不同浓度重组人HMGB1蛋白刺激3T3-L1前脂肪细胞后,自噬蛋白LC3-II/I比值增加(均P0.01);4.si HMGB1沉默3T3-L1前脂肪细胞中的HMGB1后,LC3-II/I比值则显著减少(P0.01);5.对不同分化时期的脂肪细胞加入0.2μg/m L的重组人HMGB1之后,结果显示在第0、2和4 day时LC3-II/I蛋白表达增加(P0.05),而第8和10 day LC3-II/I蛋白表达减少(P0.05)。结论1.HMGB1与3T3-L1前脂肪细胞的自噬呈正相关;2.对分化不同时期的脂肪细胞,加入重组人HMGB1刺激之后,分化前期自噬增加,而后期自噬出现减少。
【学位授予单位】:新乡医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R589.2

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