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《河南大学》 2014年
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安络小皮伞液体发酵条件的优化及其活性的研究

张晶晶  
【摘要】:安络小皮伞菌是我国传统的药用真菌,不仅在药用方面有很好的功效,在食用和保健方面有很高的价值,因此,对小皮伞菌液体深层发酵及其药理活性的研究具有重要的意义和价值。 本实验通过单因素实验和正交试验对小皮伞菌发酵条件进行优化,在此基础上对小皮伞菌进行胞内外多糖抗氧化活性的测定,并运用小鼠实验分析了小皮伞菌发酵提取物镇痛、镇静的药理作用。主要研究内容及结果如下: 1.以提高安络小皮伞菌生物量为目的,对小皮伞菌培养基及其发酵条件进行系统的优化。对C源和N源种类进行筛选,在此基础上对其浓度进行优化,通过正交试验对小皮伞菌培养基成分进行优化,最终确立了最优培养基为玉米粉:3%、麸皮:3%、MgSO4:0.1%、KH2PO4:0.3%、VB1:10mg、水:1000mL;通过对小皮伞菌液体发酵时间、温度、转速及其培养基的初始pH、接种量、装液量进行筛选,确立了最适发酵条件为:发酵时间:6d、温度:25℃、转速:150r/min、初始pH:5、接种量:9%、装液量:90mL。 2.通过发酵获得安络小皮伞菌丝体及发酵液,采取醇沉法提取发酵滤液胞外多糖,采用水提醇沉法提取菌丝体胞内多糖,以抗坏血酸为对照,通过体外实验研究安络小皮伞胞外多糖、胞内多糖对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除作用,评定其抗氧化性能。结果表明安络小皮伞胞外多糖、胞内多糖对羟基自由基、DPPH·均具有显著的清除作用,且清除羟基自由基能力胞内多糖胞外多糖,清除DPPH·能力胞外多糖胞内多糖,对·O-2有清除作用但不明显。三种不同的体外自由基清除体系证明了小皮伞菌多糖具有较强的抗氧化活性。 3.通过热板实验,测定给药后1h小鼠的痛阈,结果表明给药后小鼠热板痛阈值较给药前和生理盐水组相比延长,差异具有统计学意义,其中对照组和中浓度组效果更好,说明安络小皮伞菌具有镇痛作用。通过小鼠悬尾实验,对小鼠硝酸甘油造模后,小鼠静止时间缩短,与生理盐水组比较有差异,给药后小鼠静止时间延长,差异均具有统计学意义,其中安定组和安络小皮伞菌中浓度组更为明显,表明安络小皮伞菌具有镇静作用。 4.通过毒理实验,给小鼠灌胃剂量相当于临床用药200倍的小皮伞菌发酵提取物,3天内,小鼠均未出现活动异常、死亡等现象;实验组与对照组比较,小鼠体重增长无显著差异,结果表明小皮伞菌无明显的毒副作用。
【学位授予单位】:河南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:TQ920.6;TQ464

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