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《河南大学》 2016年
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黑莓籽和赤芍抗血栓作用机制研究

谢平耀  
【摘要】:本论文由三章组成。第一章综述血栓形成机理及抗血栓药物的研究进展。第二章论述黑莓籽的体外凝血四项指标的研究、纤溶活性和尿激酶纤溶抑制活性研究以及体内的抗血栓作用及其作用机制研究。第三章论述赤芍及其活性成分的抗血栓作用及作用机制研究。第一章血栓形成及抗血栓药物研究进展综述血栓形成的机理:(1)心血管功能的损伤;(2)血小板的粘附聚集和凝血系统的激活;(3)血流状态的改变,如血流缓慢或停滞、涡流的形成等。介绍抗血栓药物的研究进展,包括抗凝血药、抗血小板聚集药和溶栓药。第二章黑莓籽抗血栓作用机制研究本章分为四节。第一节,首次采用体外活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)对黑莓籽进行体外凝血活性研究。结果显示,黑莓籽乙醇总浸膏、石油醚部位、正丁醇部位以及分离得到的8个化合物(十六烷酸、1α,2α,3β,19α-四羟基-12-烯-28-乌苏酸、委陵菜酸、熊果酸、9(Z)-octadecenamide、suavissimoside R1、pomolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl ester和3,5,7,2',5'-pentahydroxy-flavan)均具有良好的体外抗凝血活性。而黑莓籽乙酸乙酯部位以及蔷薇酸和齐墩果酸具有一定的体外促凝血活性。第二节,通过建立纤溶途径抑制模型,采用纤维蛋白原-琼脂糖平板法首次对黑莓籽提取物及分离得到的10个化合物的体外纤溶活性和尿激酶激活的纤溶途径抑制活性进行研究。结果显示,黑莓籽乙醇总浸膏和正丁醇部位具有一定的体外纤溶活性;黑莓籽乙醇总浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及10个化合物均对尿激酶激活的纤溶途径有抑制作用。第三节,采用皮下注射盐酸肾上腺素结合冰水浴的方法制备大鼠的急性血瘀模型。通过大鼠急性血瘀模型首次对黑莓籽的体内抗血栓活性及抗血栓作用机制进行研究。试验结果表明,黑莓籽乙醇总浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性。且它们降低急性血瘀模型大鼠全血粘度(whole blood viscosity,WBV)可能是通过降低红细胞压积(packed cell volume,PCV),降低血浆粘度(plasma viscosity,PV)可能是通过降低红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR);通过内源性凝血途径、外源性凝血途径、凝血共同途径以及降低血浆中纤维蛋白原的含量来抑制血液的凝固,从而达到抗血栓的效果;通过降低内皮素(endothelin-1,ET-1)和升高一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)的含量来抑制血栓的形成;黑莓籽乙醇总浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位通过降低急性血瘀模型大鼠血清中血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)和升高6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-Keto-PGF1α)的含量来抑制血栓的形成,黑莓籽正丁醇部位通过降低急性血瘀模型大鼠血清中TXB2的含量来抑制血栓的形成,且黑莓籽提取物对6-Keto-PGF1α/TXB2的平衡具有良好的调节作用。第四节,采用大鼠急性血瘀模型首次对熊果酸的体内抗血栓活性及抗血栓作用机制进行研究。试验结果表明,熊果酸具有良好的抗血栓活性,且熊果酸降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通过降低PCV,降低PV可能是通过降低ESR;通过内源性凝血途径、外源性凝血途径、凝血共同途径以及降低血浆中纤维蛋白原的含量来抑制血液的凝固,从而达到抗血栓的效果;通过降低ET-1的含量来抑制血栓的形成;通过降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α以及维持6-Keto-PGF1α/TXB2的动态平衡来抑制血栓的形成且熊果酸是黑莓籽抗血栓的活性成分之一。第三章赤芍抗血栓作用机制研究本章分为两节。第一节,采用急性血瘀模型首次对赤芍乙醇总浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位进行体内抗血栓作用及其作用机制研究。试验结果表明:赤芍乙醇总浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性,且它们降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通过降低PCV,降低PV可能是通过降低ESR;通过内源性凝血途径、外源性凝血途径、凝血共同途径以及降低血浆中纤维蛋白原的含量来抑制血液的凝固,从而达到抗血栓的效果;赤芍乙醇总浸膏和乙酸乙酯部位通过降低ET-1和升高e NOS的含量来抑制血栓的形成,正丁醇部位通过升高e NOS的含量来抑制血栓的形成;赤芍乙醇总浸膏和正丁醇部位通过降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α来抑制血栓的形成,乙酸乙酯部位通过降低TXB2的含量来抑制血栓的形成,且它们对6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。第二节,采用大鼠的急性血瘀模型首次对从赤芍中分离得到的4个化合物(原儿茶酸、芍药内酯苷、芍药苷和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖)进行体内抗血栓作用及其作用机制研究。试验结果表明,原儿茶酸、芍药内酯苷、芍药苷和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖均有良好的抗血栓活性,且它们降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通过降低PCV,降低PV可能是通过降低ESR;通过内源性凝血途径、外源性凝血途径、凝血共同途径以及降低血浆中纤维蛋白原的含量来抑制血液的凝固,从而达到抗血栓的效果;芍药苷和芍药内酯苷通过降低ET-1和升高e NOS的含量来抑制血栓的形成,原儿茶酸和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖通过升高e NOS的含量来抑制血栓的形成。芍药内酯苷和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖通过降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α来抑制血栓的形成,原儿茶酸和芍药苷通过升高6-Keto-PGF1α来抑制血栓的形成;且它们对6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。原儿茶酸,芍药内酯苷、芍药苷和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖是赤芍抗血栓的主要活性成分。
【学位授予单位】:河南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R285.5

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