收藏本站
《河南师范大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

circ137调节正常大鼠肝细胞株BRL-3A增殖的机理研究

李莉菲  
【摘要】:环状RNA(circular RNA,circRNA)是继miRNA和lncRNA之后新发现的一种新型非编码RNA分子,在哺乳动物细胞中具有多样性,且广泛地分布,circRNA没有自由的5'端和3'端,首尾相接形成闭合的环状结构。根据circRNA的序列在基因组DNA中的位置,circRNA被分为三大类:外显子circRNA、内含子circRNA和外显子内含子circRNA。目前的研究发现,circRNA的功能主要有以下几种:miRNA的海绵作用,与蛋白质互作,合成新的多肽,形成融合circRNA,以及调节基因转录水平和剪接过程等。已有研究表明,circRNA与多种肿瘤、动脉粥样硬化等许多人类疾病都密切相关,而大鼠肝再生中有关circRNA的研究目前还尚未发现。本课题首先以大鼠肝再生早期0h、2h和6h三个时间点为实验材料,通过RNA高通量测序技术检测三个时间点circRNA的种类及表达变化,结果表明在大鼠肝再生早期阶段有159种差异表达的circRNA,对应116种来源基因;通过两种方法从中筛选出可能发挥关键作用的circRNA,并通过qRT-PCR技术验证其在大鼠肝再生过程中的表达情况,最终有6个circRNA被挑选出来可能在大鼠肝再生早期发挥关键作用;为进一步研究circRNA在大鼠肝再生中的调节机制,circ137被挑选出做深入的机理研究;本文主要采用过表达或干涉内源性circRNA分子的方式,使用MTT、流式细胞数、qRT-PCR和Western blot等技术检测干预BRL-3A细胞中circ137的表达量对其细胞活力、周期和增殖等造成的影响,结果表明,由于circ137在BRL-3A细胞中本身含量较高,因此慢病毒包装法过表达circ137没有效果;然后又通过转染干涉片段的方法降低内源性circ137表达量,结果表明,与对照相比,自转染干涉片段后48h,BRL-3A细胞的活性降低,细胞分布在S期和G2/M期的比例显著降低,而分布在G1期的比例增加,CCNA2和CCND1等的表达量也明显降低,说明细胞周期受到阻滞;同时MYC和JUN等细胞增殖相关基因表达水平也明显降低,而凋亡相关基因CASP3和CASP9等表达水平显著增加,说明circ137表达量降低后,抑制了细胞增殖。综上,circ137可促进BRL-3A细胞的增殖。为了进一步探究circ137促进BRL-3A细胞增殖的分子机理,本课题又做了初步的探究;circ137是外显子型circRNA,且预测其有mi R-16-5p的结合位点,已有报道证明miR-16-5p参与调节肝再生过程,因此我们做出科学假设,circ137主要是通过与mi R-16-5p互作调节BRL-3A细胞的增殖作用。我们又通过一系列方法证明与circ137互作的miRNA。首先,结合公司预测、查阅文献和qRT-PCR检测,筛选出可能与circ137结合的miRNA,然后,通过RNA pulldown实验进一步检测,结果表明,在BRL-3A细胞中,circ137表达量降低时,mi R-16-5p和miR-100-5p的表达量降升高;而RNA pulldown实验证实circ137和miR-100-5p、mi R-16-5p可能存在互作关系,因此,可初步推测,circ137可与mi R-100-5p和miR-16-5p发生互作。综述所述,circ137有促进细胞增殖的作用,circ137可能是通过与miR-100-5p和mi R-16-5p互作,抑制miR-100-5p和miR-16-5p发挥其功能,进而促进BRL-3A细胞的增殖。
【学位授予单位】:河南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:Q952

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 毕振宇;武斌;刘阳;丁自海;杨宇超;欧阳钧;;Wistar大鼠舌部毛细血管铸型结构[J];解剖学杂志;2016年05期
2 宋歌;吕月涛;狄林林;宗文纳;陈伯旺;;早期肠内营养对重症肺炎大鼠免疫功能的影响分析[J];中国医学前沿杂志(电子版);2017年01期
3 叶敏;陈达柔;陈宇中;杜少冰;杜展鑫;李玉凤;唐珮瑜;杨昌山;朱晓琴;;右美托咪定后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J];临床医学工程;2017年02期
4 王雅乐;李文泉;姚凤云;;黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究[J];光明中医;2017年10期
5 关智宇;;三七总皂甙对骨折大鼠血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达水平影响的研究[J];临床医药文献电子杂志;2017年51期
6 王帅;贾琦珍;陈根元;程勇;张玲;马春晖;;小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响[J];福建农林大学学报(自然科学版);2016年01期
7 周挺;夏菁;李增攀;徐丽艳;韩文文;方建江;;法舒地尔对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用[J];浙江实用医学;2016年01期
8 王亚东;李东朋;郭德伟;宋及时;李红伟;钱伟强;杨波;;富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用[J];吉林大学学报(医学版);2016年05期
9 郑国祥;于强;;白虎汤对全身炎症反应综合征大鼠炎症因子的影响[J];四川中医;2015年01期
10 符晖;王桥生;方志雄;刘雁;周斌;彭忠田;梁咸章;;辛伐他汀预处理对大鼠神经源性肺水肿的作用及其机制[J];中国动脉硬化杂志;2015年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 禹玉洪;张国伟;杨晓宁;李燕舞;王汝俊;巫燕莉;;丁桂儿脐贴联合用药对幼龄大鼠厌食模型的影响[A];“好医生杯”中药制剂创新与发展论坛论文集(下)[C];2013年
2 唐洪梅;席萍;吴敏;蔡庆群;;石菖蒲不同部位对大鼠脑电图的影响[A];中华中医药学会制剂分会学术交流会论文汇编[C];2003年
3 李晓宇;刘皋林;Hyvernat Laure;曾妮;周佳纯;高君伟;郭彦坤;孙搏;;荷叶碱大鼠体内药代动力学研究[A];第九届全国药物和化学异物代谢学术会议论文集[C];2009年
4 廖沙;段毅涛;孟繁华;郭继芬;张振清;阮金秀;;芒果苷在大鼠体内的口服吸收与转化初探[A];第九届全国药物和化学异物代谢学术会议论文集[C];2009年
5 崔荣军;;足部反射疗法对Ⅱ型糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响[A];经典荟萃——纪念建国六十周年中华反射疗法优秀论文选编[C];2009年
6 尹音;孙振宇;胡敏;李冬霞;;持续性高正加速度对大鼠颞颌关节损伤的作用[A];第八届全国颞下颌关节病学及(牙合)学大会论文汇编[C];2011年
7 文文;赖国祥;郑和平;张亚彬;姚丽青;;反复铜绿假单胞菌感染诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
8 王玮娜;李奕;彭吉云;李葆明;;大鼠眶额皮层在“付出越多,得到越多”行为任务中的作用[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年
9 何小舟;许贤林;徐仁芳;范敏;;ACTH对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年
10 祝總骧;楊靜霞;鮑克琴;崔素英;文允鎰;鄭肖釗;紀豁然;杜如竹;;高血壓發病機制的研究 三、正常及高血壓大鼠組織及血漿中兒茶酚胺含量變化的初步觀察[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生理)[C];1964年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 张梦然;源自人体细胞的肠道成功移植给大鼠[N];科技日报;2017年
2 记者 冯卫东;大鼠研究显示孕期压力或可代代相传[N];科技日报;2014年
3 本报记者 王夕;曹晓华:制造聪明老鼠[N];北京科技报;2009年
4 记者 王洁明;成功克隆大鼠 我学者获国际奖[N];新华每日电讯;2004年
5 ;关木通对大鼠致癌性的实验研究[N];中国医药报;2003年
6 ;针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用[N];中国医药报;2003年
7 胡世云 范武庆;单味中草药干预脏器纤维化研究进展[N];中国医药报;2003年
8 张天行;克隆大鼠意义重大[N];中国医药报;2003年
9 ;中药研究专辑(27)[N];中国中医药报;2003年
10 辛 奋;“体外培育牛黄”研发访谈录[N];中国中医药报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨诚;Pim-3对COPD气道平滑肌细胞增殖的影响及其在COPD大鼠中的潜在治疗靶点作用[D];南方医科大学;2018年
2 付茜;二甲双胍对GK大鼠心房结构和小电导钙激活钾通道治疗作用的研究[D];中国医科大学;2018年
3 杨文奇;ERS介导的细胞凋亡对高糖诱导的大鼠在体/离体心肌细胞缺血缺氧的作用及机制研究[D];中国医科大学;2018年
4 宋丹丹;体外循环对大鼠心肌损伤的影响及富氢水通过PI3K/Akt信号通路的心肌保护作用机制的研究[D];中国医科大学;2018年
5 潘广锐;sFGL2抑制大鼠肝移植急性排斥反应的机制研究[D];重庆医科大学;2018年
6 罗薇;G-CSF对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经血管再生的影响[D];南方医科大学;2018年
7 郑石磊;PTSD大鼠内侧前额皮质自噬相关基因Beclin-1和LC3及p62/SQSTM1表达的研究[D];中国医科大学;2018年
8 赵之恭;外侧缰核内Per2基因的节律性表达及其对大鼠抑郁行为的影响和机制探讨[D];吉林大学;2016年
9 卞艺斐;马齿苋对实验性肠炎大鼠的保护作用及其机制研究[D];中国农业大学;2018年
10 白方会;正天丸和川芎嗪对偏头痛模型大鼠三叉神经血管系统神经递质表达的影响[D];南方医科大学;2016年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 金伟中;出生前尼古丁暴露对新生大鼠orexin A呼吸调节作用的影响[D];复旦大学;2009年
2 李明航;全反式维甲酸对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的保护作用及对JNK/P38信号通路的影响[D];重庆医科大学;2018年
3 欧玲伶;重组人源细胞珠蛋白治疗大鼠高血脂和动脉粥样硬化及机制[D];南方医科大学;2015年
4 张孟爽;益生菌制剂VSL#3对DSS大鼠结肠炎TLR4-NF-κB通路调节作用的研究[D];昆明医科大学;2018年
5 武睿超;CaMKⅡ在大鼠DCD肝移植术后细胞及线粒体凋亡中的初步研究[D];昆明医科大学;2018年
6 徐梦云;持续间歇性低氧对大鼠动脉内膜及心脏影响的研究[D];昆明医科大学;2018年
7 孙霞;火针点刺对急性痛风性关节炎湿热蕴结型大鼠的抗炎机制研究[D];湖南中医药大学;2018年
8 林椠;痛风康宁方对急性痛风性关节炎大鼠血清炎症因子及氧化应激的影响[D];华北理工大学;2018年
9 王晨斌;痛风康宁方对急性痛风性关节炎大鼠影响的实验研究[D];华北理工大学;2018年
10 郑丛丛;运动改善糖尿病足溃疡合并外周动脉病变患者血供及促进糖尿病后肢缺血大鼠血管生成的研究[D];天津医科大学;2013年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026