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《武汉大学》 2009年
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脱氢表雄酮对血管内皮细胞功能影响及其机制的研究

夏尊恩  
【摘要】:背景: 性激素在心血管疾病中的作用很早就引起人们的兴趣,人们发现女性的冠心病发病率明显较男性低,提示人们考虑雌激素具有心脏保护作用。围绕雌激素对心血管保护作用的研究成为众多学者争相探索的热点,己有大量的研究报道试图阐明其保护机制。雌激素对女性具有保护作用,那么男性体内的雄激素是否也具有心血管保护作用自然成为人们思考的一个课题。但雄激素对心血管疾病影响的研究结论不一。 流行病学调查显示,即使考虑其他发病危险因素后,男性性别仍然是一个独立的心血管疾病发病危险因子。但是,迄今为止没有直接的证据显示雄激素可以使冠心病和心肌梗死的发病率增高。相反,已有的研究报告显示,体内雄激素水平与男性冠状动脉狭窄的严重程度和心肌梗死发生率之间呈负相关。新近的研究发现,雄激素可以通过影响脂质代谢、动脉血管张力、血管内皮功能以及凝血及纤溶系统等方面在心血管疾病的发生、发展方面挥作用。脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)作为性激素的前体,是人体中含量最多的类固醇激素,大多数研究表明其对男性具有抗动脉粥样硬化的作用。 内皮的损伤是动脉粥样硬化斑块形成的起始环节,内皮细胞的异常增殖和凋亡以及多种炎症因子参与了内皮的损伤。最新的研究证实,炎性细胞因子CD40和CD40L在动脉粥样硬化发生发展过程中起到了激活炎症细胞、启动炎症反应的作用,是介导内皮细胞炎症反应的重要介质。当血管内皮因各种因素受损后,单核细胞表面的CD40立即与受损血管内皮细胞表面的CD40L结合,进一步促进内皮细胞表达多种粘附分子,从而介导单核细胞的滚动、粘附、迁移和聚集,促进斑块的形成。 目的: 鉴于脱氢表雄酮对内皮细胞的增殖凋亡及其炎症因子表达的研究较少,本研究旨在细胞水平观察脱氢表雄酮对人脐静脉内皮细胞增殖凋亡的影响,继而探讨脱氢表雄酮对内皮细胞炎症因子表达的调控作用,拟初步探索脱氢表雄酮对内皮细胞保护的可能作用机制,为脱氢表雄酮对心血管的保护作用提供部分理论依据。 方法: 1.原代培养人脐静脉内皮细胞,采用第3-6代细胞,使用10-9~10-6mol/L的DHEA对内皮细胞刺激24 h或10-7mol/L的DHEA作用内皮细胞0、24 h、36 h、48 h、72 h,MTT法检测DHEA对内皮细胞生长增殖的影响,流式细胞术检测内皮细胞生长周期和DNA含量的变化。 2.采用第3-6代血管内皮细胞,给予10mg/ml TNF-α诱导细胞凋亡,使用不同浓度DHEA干预,通过AnnexinⅤ-FITC和PI双标流式细胞仪检测细胞凋亡率,以Hoechst 33342染色,荧光显微镜观察细胞核形态的改变。 3.内皮细胞分离、培养成功后,以100 ng/ml INF-γ刺激,同时加入不同浓度的DHEA培养24h后,提取总RNA, RT-PCR法检测CD40和CD40L的mRNA表达,流式细胞术检测内皮细胞表面CD40和CD40L的蛋白表达,同时裂解细胞提取蛋白,考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白浓度,使用Western Blot法检测ERK1/2的表达。 4.采用第3-6代血管内皮细胞,给予1μg/ml CD40L刺激,加入不同浓度的DHEA培养24 h后,RT-PCR法检测ET-1、eNOS、E-selectin和ICAM-1的mRNA表达,Western Blot检测内皮细胞E-selectin和ICAM-1的蛋白表达,以Griess反应测定上清液中NO浓度。 结果: 1.10-9mol/L的DHEA对内皮细胞的增殖无明显影响,而10-8-10-6mol/L的DHEA则抑制内皮细胞的增殖。 2. DHEA能减少TNF-α诱导的细胞凋亡,并呈剂量依赖性。 3. INF-γ刺激内皮细胞表达CD40和CD40L, DHEA下调INF-γ诱导的内皮细胞表面CD40/CD40L的表达,同时对INF-γ刺激下的CD40/CD40LmRNA的表达有抑制作用,并且呈剂量依赖性。同时DHEA抑制INF-γ诱导的内皮细胞ERK1/2蛋白磷酸化表达。 4.CD40L能诱导内皮细胞ET-1、E-selectin和ICAM-1的mRNA和蛋白表达,而DHEA抑制CD40L诱导的炎症因子的合成和释放,并且呈剂量依赖性。 结论: 1. DHEA抑制内皮细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性。同时DHEA能下调TNF-α诱导的细胞凋亡。 2. DHEA抑制血管内皮细胞多种炎症因子的mRNA和蛋白表达,促进NO的合成释放,对内皮细胞具有一定的保护作用。
【学位授予单位】:武汉大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R541.4

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1 吕红松,吴赛珠;雄激素变化与衰老[J];第一军医大学学报;2001年05期
2 江恩利;赵霞;;CD40-CD40L与肿瘤[J];四川肿瘤防治;2006年01期
3 梁文飚,邱玉华,孙静,李大为,施勤,陈永井,郁建锋,于葛华,张学光;B7-1 mAb对B系淋巴瘤Raji细胞的生长抑制和凋亡诱导作用[J];上海免疫学杂志;2003年02期
4 史文元,唐朝克,杨永宗;CD40-CD40L与斑块的不稳定性[J];生命的化学;2004年03期
5 庄羽美,黄建安,朱华亭,周璇,马泓冰,王凤鸣,Elisabeth Monchatre,Léna Edelman,张学光;可溶性CD40酶联检测试剂盒的研制及其检测的临床意义[J];中国免疫学杂志;2004年08期
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7 吴红兵;CD40配体重组腺病毒联合5-Fu抗肿瘤效应的实验研究[D];四川大学;2006年
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9 张峻;抗血小板药物及CD40-CD40L信号系统对动脉粥样硬化影响的实验研究[D];中国协和医科大学;2006年
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2 戚春建;CD40信号对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响及其分子机制[D];苏州大学;2003年
3 魏枫;sCD80-Linker-sCD40L融合基因腺病毒载体的构建及鉴定[D];天津医科大学;2004年
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2 周英,宋雪芳,阮秋蓉;脱氢表雄酮对氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞表达VCAM-1的影响[J];华中科技大学学报(医学版);2005年04期
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1 章志丹;穆恩;肇冬梅;马晓春;;肺内源性和肺外源性急性呼吸窘迫综合征家兔的实验对比研究[A];第三届重症医学大会论文汇编[C];2009年
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1 束梅英 张骁;脱氢表雄酮不只是激素之母[N];医药经济报;2001年
2 武警总医院急救医学中心主任 王立祥孙鲲 整理;控制ARDS要五早[N];健康报;2008年
3 姜萍;损其心者调 其营卫 中药防治心绞痛机制被证实[N];中国医药报;2006年
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5 杨然;络风宁1号方治疗不稳定性心绞痛的临床观察及其对巨噬细胞炎症因子的影响[D];北京中医药大学;2013年
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