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肾癌组织中热休克蛋白gp96-肽复合物体外免疫效应检测

殷勇  
【摘要】:目的:肾癌是泌尿系统常见肿瘤之一,具有高转移性,强免疫性的特点。晚期肾癌的治疗是临床难点之一。新近研究表明,从肿瘤组织中提取的热休克蛋白(Heat shock protein HSP),特别是HSPgp96-肽复合物,能够激发特异性抗肿瘤免疫反应,应用自身肿瘤提取的HSPgp96-肽复合物免疫晚期癌症患者的Ⅲ期临床试验已经在全世界约80家医疗单位开展,并取得一定疗效,然而关于肾癌治疗中gp96-肽复合物疫苗真正起作用的单纯多肽具体成分和活性尚不清楚,。我们从人肾癌组织中提取HSPgp96-肽复合物后,在体外检测HSPgp96-肽复合物和单纯多肽对r-干扰素(INF-r)刺激的免疫效应,探讨其作用机理,为进一步了解抗原肽结构、相关作用机理及发展人工免疫治疗奠定基础。 方法:收集2001年至2004年我院诊断肾癌并行根治性肾切除术的肾组织标本12例,外伤急诊行肾切除术的肾标本5例,采用三步蛋白纯化法提取HSPgp96-肽复合物后,在体外应用酶联免疫斑点法(Elispot法)检测HSPgp96-肽复合物和单纯多肽对r-干扰素(INF-r)刺激的免疫效应 结果:(1)纯化所得蛋白用特异Western blotting鉴定,证实该蛋白确系HSPgp96;(2)肿瘤组中HSPgp96-肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数均明显高于正常对照组(p0.01);(3)肿瘤组中HSPgp96-肽复合物产生γ-干扰素效应T细胞频数最高,与同组其他刺激物及正常对照组的HSPgp96-肽复合物相比差异有显著性意义(p0.01)。 结论:肾肿瘤组织中提取的HSPgp96-肽复合物的量明显多于从正常肾组织中提取的量,可认为肾肿瘤中的HSPgp96含量高于正常肾;肾肿瘤组织中提取的HSPgp96-肽复合物具有明显的最强体外免疫效应。


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