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《武汉大学》 2005年
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大黄抗柯萨奇病毒B3型有效成份的筛选

孙慧  
【摘要】:目的:将不同产地的中药大黄(大黄a和大黄b)分别用不同的方法提取分离各 自的活性成分,再筛选这些药物成分抗柯萨奇病毒B3的有效成分,并观察其抗病毒 效果。方法:将大黄a用4种方法分离提取:方法1、方法2、方法3和方法4;大黄 b用3种方法分离提取:方法1、方法2和方法4;分离提取后,中药大黄a和b共分 离得到35种成份。药效学实验部分主要通过观察病毒所致的特异性细胞病变效应和 MTT染色法,观察药物成分加入细胞后对细胞的毒性作用,以及药物对病毒吸附后在 Hep-2细胞内增殖的过程中所起的作用,通过计算每种药物成分的细胞存活率和病毒 抑制率,根据相应的量效曲线分别求得50%细胞毒性浓度(TC_(50))、50%病毒抑制浓 度(IC_(50))和治疗指数(treatment index, TI),以此为标准,衡量不同成分的细胞毒性 强弱和抗病毒效果。比较不同产地以及不同方法提取的大黄成分抗柯萨奇病毒的效果, 并初步探讨其中2种有效成分可能的抗病毒机制。结果:对2种产地的大黄(大黄a 和大黄b)的35种成分进行体外抗柯萨奇病毒B3有效成分的筛选,根据药物体外抑 制病毒增殖的TI(治疗指数)的不同,可将它们归为4类:高效低毒:TI5的有 1a-4,2a-5,4a-1,4a-2,4a-3,4b-5;有效有毒:2TI5的有2a-2,2a-5,3a-2,1b-2,2b-1,2b-6, 4a-5,4a-6,4b-1,4b-2,4b-6;低效有毒:TI2的有1a-3,2a-1,2a-3,2a-4,3a-1, 3a-4,1b-3,1b-4,2b-2,2b-3,2b-4,4b-3,4a-4;无效:TI1的有1a-1,1a-2,3a-3,1b-1,4b-4。对 不同产地的大黄提取物抗柯萨奇病毒B3效果的比较发现,在方法2中,大黄b的提 取成分抗病毒效果要比大黄a好;而方法4中,大黄a的提取成分抗病毒效果好于大 黄b;可见中药大黄的不同产地对其品质和抗病毒活性有较大影响,说明对不同产地 的大黄应选择不同的提取方法,大黄a适合用方法4提取,而大黄b则适合用方法2 提取。对用不同方法提取的相同大黄的成份抗柯萨奇病毒B3的效果进行比较发现, 相同大黄的不同提取成分抗柯萨奇病毒的作用会受到提取方法的影响,不同成分需要 用各自适宜的方法提取,用方法4提取大黄a的成份1~3效果较好;用方法1提取大 黄a的成分4效果较好;因此针对不同的目标成分采用适合的方法有助于发挥出药物 成分的最大抗病毒效果。对大黄a和大黄b的2种成分抗病毒机制的研究结果显示, 药物抑制病毒的主要环节是病毒进入细胞后在胞内增殖的阶段。
【学位授予单位】:武汉大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R284.1

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