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《武汉大学》 2004年
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微量热法研究生物大分子及草酸钙模拟生物矿化

李霞  
【摘要】:本文利用微量热法的一些基本原理和方法,借助于LKB-2107BA7CH型微量热计,首先对Na~+,K~+-ATP_(ase)酶促反应的热动力学进行了研究,并借助比色法对底物抑制进行了研究;其次,对牛血清白蛋白与稀土离子结合作用的热力学性质进行了研究,并借助光谱法对牛血清白蛋白与药物小分子的相互作用进行了研究;最后,将微量热与结构分析、形貌分析的研究手段相结合,对草酸钙的模拟生物矿化进行了的研究,具体工作如下: 一、Na~+,K~+-ATPase酶促反应的微量热研究及ATP抑制的研究 1、首次用微量热方法研究了模拟生理条件下(T=310.15K,pH=7.4,[ATP]为毫摩尔级)Na~+,K~+-ATPase催化ATP水解的酶促反应,用对比进度法得出给定实验条件下酶促反应的米氏常数Km值为0.479±0.020mM和最大反应速率V_(max)值为0.681±0.026μmol P_i·min~(-1)·mg protein~(1),并用比色法得到了一致的K_m和V_(max)值; 2、通过对不同初始底物浓度下酶促反应的微量热研究,得到310.15K、pH7.4时Na~+,K~+-ATPase酶促反应的表观摩尔反应焓△_rH_m值为-40.514±0-9kJ·mol~(-1); 3、进行了酶稀释效应的研究,结果表明Na~+,K~+-ATPase预稀释会对酶促反应产生一定的影响,酶过分预稀释将导致其严重失活,使Na~+,K~+-ATPase酶促反应不能顺利进行,推测可能是酶的活性结构遭到了破坏; 4、在模拟生理条件下(T=310.15 K,pH=7.4,[ATP]为毫摩尔级),就ATP对Na~+,K~+-ATPase酶促反应的抑制动力学进行了较深入地研究;研究结果表明,MgATP复合物才是给定条件下Na~+,K~+-ATPase酶促反应的唯一底物,而ATP是一个竞争性抑制剂,抑制常数K_i真值为0.253mM。 二、牛血清白蛋白同稀土离子/药物结合作用的研究 1、在LKB-2107热导式微量热仪上系统研究了模拟生理条件(310.15K,pH6.7,0.1mol/LNaCl)下,一系列三价稀土离子(RE~(3+))同牛血清白蛋白BSA相互作用的热力学性质;依据量热结果,首次直接给出了RE~(3+)在BSA上的高亲和力与低亲和力两类结合位点的结合位点数(n1,n2)和摩尔反应焓(△_rH_(ml),△_rH_(m2));结果表明结合反应的焓变为正值,说明稀土与BSA的配合是熵驱动反应。而且,进一步采用荧光光谱法得到了相同条件下,一系列RE~(3+)同BSA的强结合位点数n1和表观络合常数lgK_1;利用紫外差示光谱法对RE~(3+)与BSA的结合部位进行了表征。 2、依诺沙星enoxacin[1-ethyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-
【学位授予单位】:武汉大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:O621.25

【引证文献】
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【参考文献】
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8 梁毅,汪存信,邹国林,屈松生,吴元欣,李定或;微量热法研究黄嘌呤氧化酶反应[J];高等学校化学学报;1997年04期
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【共引文献】
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8 高继红;杨天林;;2,2,2-胺三乙酰-苄胺及其稀土配合物的合成·表征与荧光性质研究[J];安徽农业科学;2008年22期
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2 陆广农;李小龙;杨柳;唐宁;;四个氮支链氮杂冠醚的铕(Ⅲ)、铽(Ⅲ)配合物的合成及表征[A];甘肃省化学会第二十五届年会、第七届甘肃省中学化学教学经验交流会论文集[C];2007年
3 阮敏;赵玥萍;张琼瑶;叶勇;;氨基酸席夫碱的生物活性研究实验[A];湖北省化学化工学会第十一届分析化学专业年会论文集[C];2007年
4 施阳;许东芳;吴四华;沈智慧;周先安;何其庄;;镧-噻吩甲酰三氟丙酮-联咪唑三元配合物的合成、表征及其生物活性研究[A];上海市化学化工学会2009年度学术年会论文集[C];2009年
5 沈智慧;许东芳;何其庄;施阳;吴四华;;稀土钼酸2-氨基-4,6-二甲基嘧啶三元配合物的合成、表征及其生物活性研究[A];上海市化学化工学会2009年度学术年会论文集[C];2009年
6 吴晓红;肖文敏;周家宏;顾晓天;陆天虹;;竹红菌甲素与血红蛋白相互作用的光谱研究[A];江苏省计量测试学会2005年论文集[C];2005年
7 吴晓红;肖文敏;周家宏;顾晓天;冯玉英;;竹红菌甲素和肌红蛋白相互作用的光谱研究[A];江苏省计量测试学会2005年论文集[C];2005年
8 李叶菊;于升学;;稀土盐在装饰性钛合金阳极氧化中的作用及性能影响[A];2009年全国电子电镀及表面处理学术交流会论文集[C];2009年
9 郝树萱;李干佐;李英;;表面活性剂形成的缔合体系微观结构的~2H-NMR法研究[A];第八届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];1994年
10 冯江华;李晓晶;裴奉奎;;长期服用硝酸镧对大鼠机体影响的~1H NMR研究[A];第十一届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2000年
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3 章江洪;电镀锌稀土转化膜工艺及机理研究[D];昆明理工大学;2010年
4 高惠民;云母颜料制备及其机理研究[D];武汉理工大学;2010年
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6 尚永辉;主—客体分子间相互作用的光电分析及人工神经网络预估研究[D];西北大学;2011年
7 何西利;模型蛋白与中药活性成分发光行为研究与应用[D];西北大学;2011年
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10 徐旻;氧氟沙星酰腙配合物的结构、抗氧化活性及与生物大分子的相互作用[D];兰州大学;2011年
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3 易敏;钨酸盐基荧光粉的制备及性能研究[D];广西师范学院;2010年
4 陈晓英;喜树碱与生物大分子相互作用的光谱研究[D];郑州大学;2010年
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6 苗委然;铕、铽掺杂的下转换发光材料的制备及性能研究[D];郑州大学;2010年
7 张颖;四种药物的毛细管电泳电化学发光法分析[D];郑州大学;2010年
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10 刘强;纳米LaPO_4:Eu~(3+)制备及发光性能研究[D];中国海洋大学;2010年
【同被引文献】
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1 李秀艳,魏德洲,郑龙熙;含砷金精矿生物预氧化过程中细菌吸附的作用[J];东北大学学报;2000年06期
2 李晓晶,冯江华,张善荣,裴奉奎,陈曦,聂毓秀;稀土对大鼠代谢产物影响的核磁共振研究[J];分析化学;2000年12期
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5 黎维中;蓝卓越;;微生物冶金进展及其在西部矿业开发中的应用前景[J];中国工程科学;2005年S1期
6 梁毅,汪存信,邹国林,屈松生,吴元欣,李定或;微量热法研究黄嘌呤氧化酶反应[J];高等学校化学学报;1997年04期
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2 傅建华;硫化铜矿浸矿细菌超微结构与吸附机理及SFORase的纯化[D];中南大学;2004年
3 蓝蓉;含醇缔合体系的理论、实验和分子模拟研究[D];浙江大学;2005年
4 董红;醇、酯二元混合体系的过量焓的测定、关联和理论计算[D];浙江大学;2007年
5 李胜迎;醇+(酮、离子液体)二元体系的过量焓测定、关联和COSMO-type模型的应用[D];浙江大学;2008年
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1 关海燕;嗜酸氧化硫硫杆菌浸出低品位磷矿及其机理[D];武汉科技大学;2010年
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【二级参考文献】
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9 樊春梅,马书林,郭德威,陈敬堂;二价金属离子与L-蛋氨酸反应的热力学研究[J];高等学校化学学报;1986年06期
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6 冯小强;李小芳;杨声;伏国庆;;低聚壳聚糖钐配合物的制备及其与牛血清白蛋白的作用[J];分析仪器;2011年01期
7 孙绍发;刘洁;宋功武;;荧光光谱法研究铁(Ⅲ)存在下依诺沙星与牛血清白蛋白的相互作用[J];分析科学学报;2007年02期
8 李晓晶,王志强,陈继,张树功;稀土离子(Ⅲ)与牛血清白蛋白作用的紫外光谱[J];应用化学;1998年01期
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7 徐国兴;黄焱;彭亦茹;;四磺基酞菁钴及其与牛血清白蛋白的结合作用的研究[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
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9 王亚平;程芳琴;董川;;荧光法研究对二甲酚酞与牛血清白蛋白的结合作用[A];第八届全国发光分析暨动力学分析学术研讨会论文集[C];2005年
10 杨林;曹莹;高红丽;陈竞男;;β-桐酸和牛血清白蛋白超分子相互作用机理及热力学研究[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
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2 卫一鸣;溶媒配伍亦有道[N];医药经济报;2007年
3 本报记者 朴淑瑜 唐婷;王颖霞:细心耕耘在稀土世界[N];科技日报;2007年
4 国家药品监督管理局药品评价中心 孙忠实;这星那星该用哪个星[N];健康报;2000年
5 卫长虹;合理应用氟喹诺酮类药物[N];医药经济报;2006年
6 陈锦屏;“茶碱药”遇“抗菌药”需减量[N];健康时报;2007年
7 本报记者  李明春;是非多宝鱼 该何去何从?[N];中国海洋报;2006年
8 隆旺夫;藜蒿不耐贮 保鲜可增值[N];湖南科技报;2006年
9 苗蓓 汤晓晨;药品降价,百姓得啥实惠[N];南通日报;2007年
10 本报记者  洪天语;解读武汉远大制药特殊生产力[N];医药经济报;2006年
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1 李霞;微量热法研究生物大分子及草酸钙模拟生物矿化[D];武汉大学;2004年
2 刘晓瑭;共掺体系中稀土离子间的电子转移及光谱特性研究[D];东北师范大学;2005年
3 张金苏;晶体中稀土离子f-f跃迁光谱强度的研究[D];中国科学院研究生院(长春光学精密机械与物理研究所);2010年
4 尚永辉;主—客体分子间相互作用的光电分析及人工神经网络预估研究[D];西北大学;2011年
5 顾国贞;阿瓦斯汀(Avastin)和曲安奈德(TA)对兔眼葡萄膜炎治疗的疗效观察[D];吉林大学;2009年
6 谢修银;热动力学研究酶促反应的激活与抑制[D];武汉大学;2004年
7 薛绍武;稀土对保卫、叶肉细胞钾通道以及气孔、蒸腾作用的影响[D];山西大学;2005年
8 彭爱华;多孔硅基光电子材料的制备和性能研究[D];兰州大学;2006年
9 谢燕婷;锂离子电池正极材料—稀土离子掺杂的尖晶石型LiMn_2O_4的合成及电化学性能的表征[D];兰州大学;2006年
10 卫艳丽;基于蛋白质内源荧光磷光的分子识别作用研究[D];山西大学;2006年
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1 李宏宇;头孢曲松稀土配合物的合成、表征及活性研究[D];山西医科大学;2007年
2 任国发;牛血清白蛋白的电化学研究及信息分析[D];河北师范大学;2005年
3 李凯;卡铂白蛋白微球的制备及体外性质研究[D];昆明医学院;2005年
4 金艳红;印染织品和废水中直接染料的色谱与荧光分析研究[D];南昌大学;2010年
5 刘丽珍;水溶性酞菁金属配合物的合成及其与牛血清白蛋白的相互作用[D];福建师范大学;2005年
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