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《武汉大学》 2010年
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脑钠肽后适应对兔心肌缺血再灌注损伤的影响及机制研究

吴兵  
【摘要】: 目的: 1.观察脑钠肽后适应对兔心肌缺血再灌注后心梗面积和氧化应激的影响。 2.观察脑钠肽后适应对兔心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响和机制。 方法: 将27只家兔随机分为3组:假手术组(n=9),对照组(n=9),BNP组(n=9)。假手术组只开胸而不结扎冠状动脉。对照组与BNP组动物开胸手术结扎左回旋支,建立急性心肌缺血模型。缺血45min后松开结扎,再灌注180min。再灌注前5分钟分别在耳缘静脉内注射生理盐水与BNP,持续整个再灌注期。全程观察血流动力学及心电变化。每组取5只家兔分别在结扎前、缺血45min、再灌注60min、再灌注180min,4个时间点取血行心肌酶检查。测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、和丙二醛(MDA)含量。每组取4只家兔心脏做左室梗死面积测定,采用Evan'sblue和TTC双染色法测定心肌相对梗死面积(梗死面积占缺血危险区的百分比)。取梗死边缘区组织做TUNEL染色,测定组织caspase-3活性,West bolt方法测定Bcl-2、Bax和pGSK-3p/GSK-3p的表达。 结果: 缺血再灌注使对照组CK、LDH均显著增高,BNP组明显减少这些心肌酶的升高。缺血再灌注组相对梗死面积为16.2±3.1%,BNP组相对梗死面积为9.0±2.2%,较对照组明显减少。与假手术组相比,缺血再灌注组的MDA浓度升高,SOD活性降低。与缺血再灌注组比较,BNP组抑制了MDA的升高和SOD的降低,差异有显著性。BNP组和对照组均可见到TUNEL染色阳性凋亡细胞,两组凋亡指数分别为4.7±1.9%和12.9±2.5%,BNP组心肌细胞凋亡明显减少。与假手术组相比,缺血再灌注组Caspase-3活性增加,Bax的表达增加,Bcl-2的表达降低。与缺血再灌注组相比,BNP组Caspase-3活性明显降低了,降低Bax的表达增加,减少了Bcl-2的表达降低;BNP组GSK-3β的磷酸化水平明显升高。 结论: 1.再灌注时给予BNP可抑制缺血再灌注诱导的氧化应激损害,减少心肌细胞破坏、缩小心肌梗死面积,具有心肌保护作用。2.BNP后适应明显的抑制了Caspase-3的活性和细胞凋亡的发生,其机制与调节Bcl-2表达增加以及Bax蛋白表达减低有关。BNP的抑制细胞凋亡作用与GSK-3β的磷酸化有关。
【学位授予单位】:武汉大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R541.4

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