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《华中科技大学》 2011年
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肿瘤干细胞标志物usp22在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

魏卓  
【摘要】:目的研究泛素特异肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)在膀胱移行细胞癌组织及细胞中的基因及蛋白表达,并分析在膀胱癌组织和细胞中表达的差异情况,结合临床资料,探讨其可能的因果关系,进而得出相关性意义。 方法分析收集自2008年12月至2009年5月华中科技大学附属协和医院泌尿外科膀胱癌手术切除的肿瘤标本43例,其恶性度及病理分期都经过病理报告证实无误,正常膀胱组织31例,取材于癌旁远端的正常粘膜组织,其中男性患者30人,女性患者13人,年龄约在41-77岁之间,平均57.6岁,取材均是肉眼明显可分辨的癌组织,并远离肿瘤的切缘,防止因电刀高温引起的周围组织变性,患者在接受手术前均未接受放疗或者化疗。通过免疫组织化学法检测病例标本的usp22蛋白表达;及该院中心实验室保存低分化的EJ膀胱癌细胞,用Trizol抽提其RNA,蛋白裂解液获得蛋白,并和膀胱癌组织一起做检测,经逆转录及实时定量聚合酶链反应检测不同类型标本和细胞中usp22的表达;;观察不同类别标本的数据差异并与临床资料相结合,进行相关性分析;设计特异性siRNA通过转染沉默EJ细胞usp22基因,观察对照组和实验组的细胞生长传代增值情况后做出分析。 结果泛素特异肽酶22 mRNA在人正常膀胱组织中表达量很低,在膀胱移行细胞癌中表达明显升高,具有显著的差异性(p0.01),在低度恶性的组织中其表达要低于中高度恶性组织中的表达(p0.05).免疫组织化学显示膀胱移行细胞癌组织泛素特异肽酶22阳性率为87.5%(36/43),高于正常膀胱黏膜组织35.4%(11/31),P0.05,且随着恶性度的增加,阳性率升高。在但是与性别年龄等因素无关(p0.05);活的膀胱癌细胞株中有同样类似的表达,恶性度较高的EJ细胞中mRNA表达也和3期膀胱癌细胞相似. 结论泛素特异肽酶22作为一种潜在的肿瘤干细胞标记物,可能上调了膀胱组织中某些基因的表达,进而引起正常细胞的恶变,在膀胱癌的发生和发展过程中有可能起着重要的作用;它在膀胱组织中的表达同恶性度或分级成正相关,有望成为判断病情发展的有用指标,同时很有可能成为该肿瘤早期诊断的重要指标,并成为研制抗肿瘤新药中的一个可用靶点。但其作用机制还需要进一步的研究来证实。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R737.14

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