收藏本站
《华中科技大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

没食子酰基-β-右旋葡萄糖对帕金森病细胞模型的保护作用及其机制

陈宏  
【摘要】:第一部分PGG对抗MPP+孵育所致PC12细胞的氧化应激反应 摘要目的:研究1,2,3,4,6-五-氧位-没食子酰基-β-右旋葡萄糖(1,2,3,4, 6-penta-O-galloy-β-D-glucose, PGG)诱导PC12细胞中血红素加氧酶(heme oxygenase,HO-1)的产生及HO-1对抗MPP+孵育PC12所产生的氧化应激反应。方法:用不同浓度的(0、5、20、50、80、100μM) PGG处理经过神经营养因子(nerve growth factor—NGF)孵育一周的PC12细胞10小时,以及用30μM的PGG处理经过NGF孵育过一周的PC12不同时间。观察HO-1mRNA变化时所用的时间点为0、3、6、12、18、24h,观察HO-1蛋白变化时所用的时间点为-0、5、10、15、20、30h;通过免疫印迹法(Western blotting)、RT-PCR、活性氧试剂盒检测以及MTT方法观察PC12细胞中HO-1 mRNA和蛋白的合成与PGG作用浓度与作用时间的关系,PC12细胞中HO-1活力与PGG作用浓度与作用时间的关系,以及PGG对抗由于孵育MPP+所致的对PC12细胞产生的氧化应激反应。结果:PGG能促进PC12细胞中HO-1mRNA和蛋白的合成,HO-1mRNA和蛋白的合成呈浓度和时间依赖性,在PGG作用10h下,20gM的PGG便能增加HO-1mRNA和蛋白的合成,50μMPGG作用下HO-1mRNA和蛋白的合成呈现高峰,之后HO-1mRNA和蛋白合成量下降,但仍高于20μM PGG作用时HO-1mRNA和蛋白的合成量;在30μMPGG作用下,PC12细胞中HO-1mRNA和蛋白的合成均呈时间依赖性,HO-1mRNA在6h时合成增多,12h达高峰,HO-1蛋白在10h时合成增多,15时达高峰,高峰后的时间点HO-1mRNA合成量仍大于6h点时HO-1mRNA合成量,蛋白的合成量仍大于10h点时的HO-1的蛋白量。HO-1的活性变化也呈现浓度与时间依赖性,其趋势与HO-1蛋白表达的浓度与时间依赖性一致。定量与定性上均观察到PGG抑制活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的产生。结论:PGG促进PC12细胞中HO-1mRNA和蛋白的合成,在PGG的作用下,PC12细胞中HO-1mRNA和蛋白的合成呈现浓度和时间依赖性,HO-1的活力变化也呈现浓度和时间依赖性。PGG可通过诱导HO-1的产生对抗MPP+对PC12产生的氧化应激反应。 第二部分PGG对ERKl/2信号通路诱导HO-1的影响 目的:本部分研究细胞外信号调节酶1/2(extracellular singnal-regulated kinase, ERK1/2)信号通路在1,2,3,4,6-五-氧位-没食子酰基(1,2,3,4,6-penta-O-galloy-β-D-glucose,PGG)诱导PC12细胞中HO-1产生中的作用。方法:将细胞分成不同的组别,用PGG、MPP+,PD98059以及ZnPP处理PC12细胞,通过Western blotting和MTT方法,观察药物处理前后PC12细胞中ERK1/2磷酸化程度,Nrf2核转位、HO-1的表达以及细胞活力的变化。结果:PGG可促进PC12细胞中ERK1/2磷酸化增高,增高的ERK1/2磷酸化可促进PC12细胞细胞浆中的Nrf2向细胞核转位,从而促进了HO-1的合成增多,达到保护MPP+所损害的PC12细胞的作用;PD98059可通过抑制ERK1/2磷酸化而部分的抑制PC12细胞的中HO-1的表达,从而部分抑制了PGG对MPP+所损伤的PC12的保护作用。结论:ERK1/2信号通路在PGG保护MPP+损害PC12细胞中发挥重要的作用。 第三部分PGG对PI3K/AKT信号通路诱导HO-1的影响 目的:本部分研究磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)/蛋白激酶AKT(phosphatidylinositol-3 kinase/protein AKT, PI3K/AKT)信号通路在PGG促进HO-1表达中的作用。方法:将细胞分成不同的组别,用PGG、MPP+, LY294002以及ZnPP处理PC12细胞,通过Western blotting和MTT方法,观察PC12细胞中AKT磷酸化程度、Nrf2核转位程度、HO-1的表达以及细胞活力的变化。结果:PGG可促进PC12细胞中AKT磷酸化增高,增高的AKT磷酸化可促进PC12细胞胞浆中的Nrf2向细胞核转位,从而促进了HO-1的合成增多,达到保护MPP+所损害的PC12细胞的作用;LY294002可通过抑制AKT磷酸化而部分的抑制PC12细胞的中HO-1的表达,从而部分抑制了PGG对MPP+所损伤的PC12的保护作用。并且LY294002与PD98059联合作用能完全阻断Nrf2的核转位与HO-1的表达,但无法完全消除PGG对与MPP+孵育PC12细胞的保护作用。结论:PI3K/AKT信号通路在PGG保护MPP+损害PC12细胞中发挥重要的作用。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R742.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 贾晓晶;张秦玲;侯吉光;翟成伟;董素光;Wolf-Dieter Rausch;王铁君;;谷氨酸对小鼠胚胎中脑原代细胞培养中多巴胺能神经元损伤的时程效应[J];吉林大学学报(医学版);2010年06期
2 姚谦明;徐如祥;姜晓丹;;转基因治疗帕金森病的研究进展[J];中华神经医学杂志;2006年02期
3 孟慧,孙静慧;帕金森病的药物治疗[J];第四军医大学学报;2005年11期
4 邵明;;帕金森病的现代治疗与进展[J];神经损伤与功能重建;2007年06期
5 张磊;张思瑾;徐晓恒;;帕金森病的遗传学研究进展[J];神经损伤与功能重建;2009年06期
6 叶晓来;王瑛;陈生弟;;帕金森病的相关因素[J];国际神经病学神经外科学杂志;2006年05期
7 林泉峰;李俊燕;;帕金森病治疗的进展[J];中国实用神经疾病杂志;2010年05期
8 陈鑫;牛平;;泛素-蛋白酶体系统在帕金森病中的作用[J];解剖科学进展;2010年04期
9 何得宾;尹寿玉;;帕金森病的药物研究现状及进展[J];牡丹江医学院学报;2008年03期
10 陈健;;PD的病因[J];山东医药;2009年31期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谭泽龙;陈淼;曹海军;钱明江;王洪敏;谢海辉;;血红素加氧酶-1对急性肺损伤大鼠肺形态学的影响[J];广东医学;2011年09期
2 陈坤;朱崇惠;马敏麟;;维生素B_(12)注射液长程治疗帕金森病运动障碍的疗效观察[J];中国医药科学;2012年22期
3 张华;朱颖军;;丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症关系的研究进展[J];国际妇产科学杂志;2013年03期
4 李冰;贾晔然;魏文婷;陈淼;张红璇;;缺氧诱导因子-1α基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系[J];广东医学;2013年11期
5 王建红;范才文;田晶;张小玲;潘红杰;罗琴;;五没食子酰葡萄糖(PGG)诱导鼻咽癌细胞凋亡[J];华夏医学;2013年03期
6 单培佳;周颖奇;杨扬;宫峰;;帕金森病治疗研究进展[J];海军医学杂志;2007年04期
7 卢慧芳;王红;高钰琳;;居家帕金森病患者家属照顾者的生活质量调查及分析[J];护理管理杂志;2011年03期
8 林泉峰;李俊燕;;帕金森病治疗的进展[J];中国实用神经疾病杂志;2010年05期
9 马国平;牟英君;;帕金森病52例的护理体会[J];菏泽医学专科学校学报;2006年02期
10 ;A brief review on current progress in neuroscience in China[J];Science China(Life Sciences);2011年12期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 刘云鹤;苗珍花;李震;成海燕;刘阿庆;许文斌;温明菲;尚磊;陈璐;韩景献;于建春;;快速老化小鼠SAM-P/8出现类帕金森病现象[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
2 鲍远程;余元勋;汪鸿浩;吴鹏;蒋怀周;;帕金森病Parkin,LRRK2基因序列变异研究[A];中国优生优育协会第四届全国学术论文报告会暨基因科学高峰论坛论文专辑[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王爱萍;可持续多巴胺能刺激治疗帕金森病的罗替戈汀微球的研究[D];吉林大学;2012年
2 高慧明;脑内炎症介导的帕金森病:病因和发病机制研究[D];大连医科大学;2003年
3 徐琲琲;人参皂苷-Re对帕金森病模型小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用机制的研究[D];沈阳药科大学;2004年
4 吴强;ERK1/2、p38MAPK在鱼藤酮中毒诱导的神经细胞凋亡和iNOS表达中的作用研究[D];第三军医大学;2005年
5 李霞;百草枯对黑质多巴胺系统的损伤及何首乌的神经保护作用[D];沈阳药科大学;2005年
6 杨梅;抗帕Ⅰ号方剂治疗帕金森病机制的实验研究[D];华中科技大学;2006年
7 刘飙;激活素和bFGF对神经干细胞向神经细胞定向分化诱导作用的研究[D];吉林大学;2007年
8 喻红辉;Egr-1 siRNA抑制吗啡戒断后PC12细胞Egr-1基因表达及细胞凋亡[D];华中科技大学;2007年
9 李军艳;赵冠英教授补肾活血法治疗帕金森病的临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
10 陈正平;多巴胺转运蛋白示踪药物~(18)F-FECNT的制备与临床前药理研究[D];江南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘英涛;一种NMDA受体显像剂—~(99)Tc~m-N-ethyl-N_2S_2-Memantine的研究[D];江南大学;2010年
2 Djakpo Odilon (奥德伦);2种中药——五倍子和黄连的抗群体感应与抗病原菌作用的研究[D];江南大学;2010年
3 王小翠;内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究[D];西南大学;2011年
4 王艳;醌氧化还原酶NQO1对多巴胺细胞的保护作用及其对帕金森氏病防治作用的研究[D];华东师范大学;2011年
5 陈容前;西地那非-H_2S释放剂(ACS6)对同型半胱氨酸损伤PC12细胞的拮抗作用及机制[D];南华大学;2011年
6 董三军;新疆维吾尔族白细胞介素13基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性关联研究[D];新疆医科大学;2011年
7 邢学良;经颅磁电刺激对帕金森病影响的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2011年
8 张越;酒精中毒对大鼠脑组织α-Syn表达变化的影响[D];河南科技大学;2011年
9 石大禹;五没食子酰基葡萄糖抑制卵巢癌细胞增殖及其机制的研究[D];广东药学院;2011年
10 张彬彬;经鼻给予多巴胺对MPTP小鼠和正常大鼠的影响[D];第四军医大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪瀚;鲍远程;张波;杨文明;陈怀珍;;抗震止痉胶囊对帕金森大鼠儿茶酚胺类神经递质含量的影响[J];中医药临床杂志;2007年02期
2 鲍远程,周厚广,汪瀚,张波,陈怀珍,杨文明,王晓旸,徐国存,童建兵,王艳昕,杨兴涛;抗震止痉胶囊联合还原型谷胱甘肽治疗帕金森病的实验研究[J];安徽医学;2002年05期
3 刘丹,蒋知新,张清华,衣志勇,王彦亭,黄又彭,赖晓辉,董建群,张振馨;帕金森病与饮茶的病例对照研究[J];中华神经医学杂志;2004年03期
4 金澎,徐如祥,姜晓丹,邹雨汐,蔡颖谦,杜谋选;成人骨髓源性神经干细胞的致瘤性研究[J];中华神经医学杂志;2005年01期
5 郭再玉,姜晓丹,徐如祥,张世忠,徐强,邹雨汐,杜谋选,蔡颖谦;骨髓基质细胞源性神经干细胞体外分化及电生理特性的研究[J];中华神经医学杂志;2005年06期
6 曹非,童萼塘,孙圣刚;帕金森病与细胞凋亡[J];国外医学(内科学分册);2000年02期
7 徐严明,刘焯霖;帕金森病的致病基因[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2000年04期
8 杨卉,曹学兵,黄振秀,孙圣刚;铁与帕金森病相关性研究的近况[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2000年04期
9 邹春林,孙异临;MPTP与帕金森病小鼠模型的研究进展[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2000年06期
10 黄世杰;钙拮抗剂对帕金森病的神经保护作用[J];国外医学.药学分册;2000年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄志强;;乙型单胺氧化酶与帕金森病[J];国外医学.内科学分册;1991年08期
2 胡开华;帕金森病妇女经前期的类恶性综合征[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;1994年05期
3 周宝玉;总是“侵犯”老年人的帕金森病[J];中国健康月刊;1997年09期
4 陈卓鹏;帕金森病一家系报告[J];中国实用内科杂志;1999年06期
5 文诗广,陈伟群,蒋云,夏来晓,许贤豪;帕金森病患者姿势平衡障碍的定量评定[J];现代康复;2000年02期
6 黄柒金,徐如祥,张世忠,张旺明;帕金森病立体定向治疗并发症的防治[J];立体定向和功能性神经外科杂志;2002年02期
7 李冰华,黎锦如,陈玲,潘勇辉,刘焯霖;帕金森病患者认知功能障碍临床分析[J];现代神经疾病杂志;2002年05期
8 申露;辅酶Q10能减慢帕金森病的发展[J];中华医学信息导报;2002年22期
9 张宇清,李勇杰;帕金森病的外科治疗[J];解放军保健医学杂志;2002年03期
10 苗江永;帕金森病与炎症反应[J];脑与神经疾病杂志;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 雒晓东;孙玉芝;;帕病1号治疗少动和强直型帕金森病的临床试验研究[A];2005全国中医脑病学术研讨会论文汇编[C];2005年
2 刘波;陈俊;刘岘;龙玉;陈志光;李宁娜;;利用静息态脑功能成像技术研究帕金森病脑默认状态网络[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年
3 于向东;孟庆刚;赵国华;陈彪;;中医药治疗帕金森病的概况[A];第四次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2004年
4 张海娜;胡国华;陈秋惠;韩艳秋;张颖;孙亚娟;张医之;;Lactacystin诱导PC12细胞致帕金森病的实验研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
5 周明珠;刘振国;干静;陈伟;;恩他卡朋添加治疗帕金森病症状波动的系统评价[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
6 张捷;;选择性丘脑腹外侧核及苍白球毁损术治疗帕金森病的随访观察[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
7 张捷;;选择性丘脑腹外侧核及苍白球毁损术治疗帕金森病随访观察[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
8 马云枝;李社芳;;中西医结合治疗帕金森病60例疗效观察[A];第三届全国中西医结合神经系统疾病学术会议论文集[C];2000年
9 马启明;杜连平;;中西医结合治疗帕金森病42例临床观察[A];第三届全国中西医结合神经系统疾病学术会议论文集[C];2000年
10 唐澍;赵桂萍;赵玉宾;;帕金森病眼球跟踪试验分析[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 叶平生 通讯员 肖颂华;帕金森病患者 最好多喝茶水[N];广州日报;2004年
2 ;怎样促进帕金森病患者康复[N];家庭医生报;2005年
3 新华;南京启用“细胞刀”治疗帕金森病[N];医药经济报;2000年
4 马成功 指导专家/湖南中医药大学第一附属医院神经内分泌科主任 周德生 宣武医院功能神经外科副主任医师 张宇清;帕金森病 中老年人“第三杀手”[N];上海中医药报;2009年
5 刘振国;焦虑抑郁可能是帕金森病先兆[N];农村医药报(汉);2009年
6 北京世纪坛医院神经内科 屠建莹;帕金森病患者康复十法[N];健康报;2009年
7 记者 靖九江;应重视帕金森病早期治疗方案的选择[N];中国医药报;2010年
8 健康时报记者 刘永晓;半数帕金森患者没就诊[N];健康时报;2010年
9 岳丽颖;唐都医院提出个体化手术治疗帕金森病新策略[N];中国医药报;2010年
10 记者 李天舒;帕金森病发病机制有新解[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 任海刚;帕金森病和癌症相关蛋白DJ-1在自噬和线粒体的功能研究[D];中国科学技术大学;2010年
2 陈冬;帕金森病相关蛋白Parkin对自噬调节的研究[D];中国科学技术大学;2010年
3 李超;多巴胺受体激动剂在帕金森模型中的神经保护机制研究[D];山东大学;2010年
4 王涛;普利醇抗帕金森病的药效学及其机制研究[D];中国协和医科大学;2009年
5 陈宏;没食子酰基-β-右旋葡萄糖对帕金森病细胞模型的保护作用及其机制[D];华中科技大学;2011年
6 洪雁;帕金森病相关基因研究[D];天津医科大学;2003年
7 刘韬;蛋白酶体抑制剂诱导的帕金森病细胞模型早期的蛋白质组学研究[D];吉林大学;2010年
8 赵晓萍;帕金森病的易患基因研究[D];第二军医大学;2004年
9 杨莉芹;治疗帕金森病的不同药物对多巴胺能系统的影响以及对PC12细胞的体外干预[D];复旦大学;2005年
10 李敏;补肾活血法治疗帕金森病的临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王志永;针刺督脉学对帕金森病小鼠脑线粒体功能的影响[D];北京中医药大学;2010年
2 张红英;帕金森病运动并发症风险因素分析[D];山东大学;2010年
3 孙启英;GBA基因突变与中国人群帕金森病相关性研究[D];中南大学;2010年
4 王薇;应用电生理技术评价帕金森病的自主神经功能及运动单位数目[D];苏州大学;2004年
5 吴镇喆;针刺治疗帕金森病的文献研究[D];湖北中医学院;2005年
6 尚晓静;头皮针对帕金森病患者中枢神经影响的fMRI研究[D];广州中医药大学;2010年
7 马晓伟;低频重复经颅磁刺激治疗帕金森病的疗效研究[D];河北医科大学;2010年
8 黄帅;GFRα1在帕金森病动物模型中表达量的变化及其基因的克隆与表达[D];吉林农业大学;2011年
9 赵燕燕;PARK16基因多态性与PD相关性研究及初诊PD非运动症状情况[D];南京医科大学;2011年
10 肖颖;α_2-巨球蛋白基因多态性与帕金森病和特发性震颤的关系[D];天津医科大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026