收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

创伤脓毒症中Th17细胞/CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞失衡的研究

陈驾君  
【摘要】:【目的】研究创伤脓毒症过程中Th17细胞与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞平衡及相关细胞因子的变化情况,以及糖皮质激素/糖皮质激素受体对脓毒症Th17/Treg的调控作用,丰富对创伤脓毒症后免疫功能紊乱发生机制的认识,并为探索调节创伤脓毒症后免疫功能紊乱的措施提供新的治疗靶点。 【方法】临床研究:收集2010年9月至2011年1月间我院创伤外科收治的35例创伤患者(其中13例并发脓毒症、22例未并发脓毒症)以及9例健康志愿者进行临床研究。主要研究内容包括:(1)分离外周血淋巴细胞后流式细胞技术检测Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例;(2)实时荧光定量PCR(real-time qPCR)检测Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA水平表达、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞特异性转录因子Foxp3 mRNA水平表达;(3)分离外周血清检测C反应蛋白和相关细胞因子(IL-4,IL-6,IL-10,IL-17,IL-23, INF-γ,TGF-β)含量,结合临床资料加以分析。 动物实验:利用Balb/C小鼠建立盲肠结扎穿孔脓毒症模型。将实验动物分为脓毒症组、干预组、假手术组及对照组,干预组在脓毒症组的基础上使用糖皮质激素受体阻滞剂RU486干预;观察指标包括(1)脓毒症过程中不同时相小鼠脾脏淋巴细胞Th17细胞和Treg细胞比例;(2)脾脏细胞特征性的转录因子RORγt和Foxp3的mRNA水平表达;(3)血清细胞因子含量(IL-2.4.6.10.17.INF-γ.TGF-p等);(4)脓毒症后迟发型超敏反应程度。 【结果】临床研究:创伤脓毒症组住院天数和病死率均高于严重创伤组(P0.05);严重创伤组外周血Th17细胞比例较健康对照组稍高但差异无统计学意义,创伤脓毒症组外周血Th17细胞比例明显高于其它两组(P0.01);外周血Treg细胞比例,严重创伤组及创伤脓毒症组均较健康对照组高(P0.01),严重创伤组与创伤脓毒症组间差异无统计学意义;外周血Th17/Treg细胞比值创伤脓毒症组较其它两组高(P0.01),严重创伤组与健康对照组比较略低(P0.05);创伤脓毒症组的RORyt mRNA水平表达均高于其它两组(P0.01),健康对照组与严重创伤组间差异无统计学意义;Foxp3 mRNA水平表达,创伤脓毒症组及严重创伤组均较健康对照组高(P0.01),其中创伤脓毒症组较严重创伤组稍高(P0.05);创伤脓毒症组血清TGF-β,IL-6及IL-23含量均明显高于健康对照组(P0.01);严重创伤组血清TGF-β和IL-6含量明显高于健康对照组,而血清IL-23含量与健康对照组相比差异无统计学意义;创伤脓毒症组与严重创伤组比较血清TGF-β含量无明显差异,而血清IL-6,IL-23含量明显高于后者(P0.01);创伤脓毒症组外周血IL-17含量明显高于严重创伤组及健康对照组(P0.01),其余两组差异无统计学意义;创伤脓毒症组及严重创伤组外周血IL-10含量明显高于健康对照组(P0.01),创伤脓毒症组与严重创伤组比较IL-10含量前者高于后者(P0.01);脓毒症组及创伤组血清CRP含量均明显高于对照组(P0.01),脓毒症组略高于创伤组(P0.05);血清INF-γ含量创伤组低于对照组(P0.05),脓毒症组更低(P0.01);血清IL-4含量创伤脓毒症组较其它两组略高(P0.05),其余两组差异无统计学意义。 动物实验:建模后第1天脓毒症组、RU干预组及假手术组Th17细胞比例与对照组比较均升高(P0.01);随后脓毒症组与RU干预组Th17细胞比例继续上升,第3天达到顶峰,假手术组较前无明显变化;第7天脓毒症组及RU干预组Th17细胞比例下降,与假手术组间差异变小(P0.05);第14天各组Th17细胞比例差异无统计学意义。脓毒症组与RU干预组间比较差异无统计学意义。建模后第1天,脓毒症组和RU干预组Treg细胞比例均较对照组及假手术组明显升高(P0.01),第3天时略有下降,第3天后不断增高;脓毒症组和RU干预组之间比较,脓毒症组Treg细胞比例较RU干预组高,在1d,3d时相P0.05;假手术组与对照组比较,比例稍高,但差异无统计学意义。脓毒症组和RU干预组第3天Th17/Treg比值较正常升高(P0.01),而第14天较对照组低,但差异无统计学意义(P0.05);两组间比较RU干预组比值较高但各时相均无统计学差异。建模后1天,脓毒症组、RU干预组脾脏细胞RORyt mRNA水平表达均较假手术组和正常对照组明显升高(P0.01),且在第3天达到峰值;随后下降,第7d和14d与假手术组无明显差异。脓毒症组与干预组比较,干预组在第1天,第3天更高(P0.05)。建模后脓毒症组,干预组及假手术组各时点Foxp3 mRNA水平表达均较对照组高(P0.01);三组间比较,第1天、第14天脓毒症组及RU干预组均明显高于假手术组(P0.01),第3天、第7天略有下降与假手术组差异变小;脓毒症组与干预组比较,前者略高于后者(P0.05)。 脓毒症组及RU干预组在第3天血清IL-17含量明显高于假手术组及对照组(P0.01),此后回落,第7d、14d各组间差异无统计学意义;脓毒症组与干预组比较干预组第3天稍高于脓毒症组(P0.05)。脓毒症组、干预组及假手术组IL-10含量均升高,脓毒症组及干预组均明显高于假手术组(P0.01);其中第3天脓毒症组及干预组都有少许下降,但仍高于假手术组(P0.01)。建模后脓毒症组,干预组及假手术组血清IL-10均高于对照组,其中脓毒症组及干预组高于假手术组,脓毒症组与干预组比较差异无统计学意义。脓毒症组和RU干预组在第1天,第3天血清IL-6含量明显高于假手术组和对照组(P0.01),两组间比较RU干预组在第3天时相高于脓毒症组(P0.01)。脓毒症组和RU干预组IL-2含量较对照组及假手术组高(P0.05),脓毒症组及RU干预组在第3天时相较其它时相略低(P0.05),脓毒症组及干预组两组间比较差异无统计学意义。血清INF-γ含量脓毒症组,干预组及假手术组均高于对照组(P0.05),第1天干预组较脓毒症组高,而后两者差异无统计学意义。血清IL-4含量ELISA检测结果显示,各组间差异无统计学意义。DTH实验结果表明,假手术组和对照组间差异无统计学意义;脓毒症组及RU干预组DTH反应较对照组及假手术组弱(P0.01),同时脓毒症组与RU干预组比较其反应更弱(P0.05)。 【结论】临床研究和动物实验研究均表明Thl7细胞参与创伤脓毒症中的炎症反应,Treg细胞参与脓毒症中的抗炎反应并维持迁延的免疫抑制状态;脓毒症时发生Th17/Treg失衡,是脓毒症后免疫功能紊乱的重要机制。GC/GR参与引起脓毒症中Th17细胞/Treg细胞失衡,拮抗GR可部分逆转脓毒症后免疫抑制。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 孙诚谊;白细胞介素6(IL-6)是严重腹腔脓毒症的预后指标(英)[J];国外医学.外科学分册;1995年03期
2 倪元红,叶向红,黎介寿;霉菌性中心静脉导管脓毒症(附12例报告)[J];肠外与肠内营养;1998年01期
3 李红云!1000037北京,姚咏明!1000037北京,施志国!1000037北京,于燕!1000037北京,董宁!1000037北京,盛志勇!1000037北京;金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体对烫伤脓毒症大鼠脏器功能的影响[J];中华医学杂志;2000年11期
4 孙建良;脓毒症时全身和局部氧供与氧耗的变化[J];国外医学.麻醉学与复苏分册;2000年02期
5 黄安林;脓毒症相关概念的变化及其意义[J];中华医院感染学杂志;2001年05期
6 尹会男,柴家科;Toll样受体/核因子κB信号通路与脓毒症的研究进展[J];中华实验外科杂志;2003年11期
7 曹国海;脓毒症中的胰岛素抵抗力[J];国外医学.外科学分册;2003年05期
8 田萍,王青丽,赵良,杨兴易;重症监护病房脓毒症患者降钙素原的临床研究[J];中华急诊医学杂志;2003年11期
9 姚咏明,盛志勇;金黄色葡萄球菌外毒素与脓毒症及多器官损害[J];中华创伤杂志;2004年12期
10 蒋丽;大黄对脓毒症大鼠核因子-κB活化的抑制作用[J];中国中西医结合急救杂志;2004年06期
11 夏燕亮,刘昕;丹参对大鼠脓毒症急性肺损伤发生中TNF-α的影响及对肺的保护作用[J];中药药理与临床;2004年06期
12 杨新利,钱素云;脓毒性脑病发病机制研究进展[J];国外医学.儿科学分册;2005年03期
13 任清华;科研新闻速递[J];中国危重病急救医学;2005年08期
14 孙海梅;况铣;魏宏建;;小剂量多巴胺在脓毒症中的应用研究进展[J];中国综合临床;2006年02期
15 张健;霍正禄;何建;;活化蛋白C与脓毒症[J];中国急救医学;2006年01期
16 赵有成;南琼;柯青;魏宏建;段勇;;脓毒症患者血清IL-6水平检测的临床评价[J];中国医师杂志;2006年05期
17 田光;陆江阳;;树突状细胞在脓毒症中病理变化的研究进展[J];感染.炎症.修复;2006年04期
18 苑志勇;邢金燕;徐敏;孙运波;;术后高密度脂蛋白水平及变化与脓毒症研究[J];中国病理生理杂志;2010年10期
19 董家鸿,黄志强,王敖川,韩本立,蔡景修;实验性胆源性脓毒症时肝脏代谢反应及其调控机制的改变[J];第三军医大学学报;1994年01期
20 陈鲳;急性肛门直肠脓毒症用手术来评价对预测肛瘘比微生物学分析好(英)[J];国外医学.外科学分册;1994年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 雒云祥;周领;任新生;;脓毒症与肠屏障功能障碍研究现状[A];2010全国中西医结合危重病、急救医学学术会议论文汇编[C];2010年
2 王新华;周荣斌;冬兰;王玉红;周高速;吴航宇;张源波;张平;;老年脓毒症的临床特点及免疫病理[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
3 刘清泉;;中医对脓毒症的认识及辩证体系的研究[A];2004年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2004年
4 卢中秋;李萌芳;梁欢;邱俏檬;杨光田;周铁丽;洪广亮;;创伤弧菌脓毒症大鼠肝组织凋亡相关基因动态表达及抗菌药物的干预[A];2010全国中西医结合危重病、急救医学学术会议论文汇编[C];2010年
5 赵淳;;脓毒症的中西医结合诊治[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
6 王军宇;李春盛;;脓毒症患者急性肾损伤早期的标志物[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
7 盛志勇;;脓毒症研究新认识[A];“2008灾害创伤与急救新进展”学术交流会学术论文集[C];2008年
8 刘清泉;刘红旭;任爱民;江其敏;;血必净注射液治疗脓毒症(瘀毒互结证)随机、平行对照、多中心临床研究[A];2004年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2004年
9 赵擎宇;贾清颜;苏全冠;M WEIGAND;E MARTIN;;影响脓毒症病人生存的临床因素分析[A];2004年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2004年
10 方向明;;中国重症脓毒症的临床诊治[A];2009年浙江省麻醉学学术会议论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈驾君;创伤脓毒症中Th17细胞/CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞失衡的研究[D];华中科技大学;2011年
2 陈驾君;创伤脓毒症中Th17细胞/CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞失衡的研究[D];华中科技大学;2011年
3 虞立霞;基于候选基因的肝癌、鼻咽癌和脓毒症的遗传关联研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
4 李岩;淋巴液引流技术改进及脓毒症大鼠淋巴液的代谢组学研究[D];第二军医大学;2011年
5 谢三祥;Th1和Th17细胞在口腔扁平苔藓中的致病机制的初步研究[D];华中科技大学;2012年
6 刘绍泽;广谱抗生素压力下脓毒症大鼠肠道菌群变化及耐药基因播散的实验研究[D];第二军医大学;2010年
7 王涛;新的内毒素结合蛋白CRISPLD2在脓毒症中的表达及其意义[D];第二军医大学;2012年
8 薄禄龙;抗CTLA-4抗体对脓毒症小鼠免疫功能及生存率影响的研究[D];第二军医大学;2011年
9 万琳琳;系统性硬皮病患者临床分型、皮肤表现和Th17细胞的研究[D];复旦大学;2010年
10 陈德昌;大黄对肠源性脓毒症防治的基础与临床研究[D];第二军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周莹;PD-1/PD-L1途径在脓毒症T淋巴细胞和单核细胞中的作用及机制研究[D];第二军医大学;2010年
2 王强;脓毒症大鼠JAK/STAT信号通路活化及其与肿瘤坏死因子-α表达的关系[D];第四军医大学;2004年
3 卢骁;低分子肝素抗炎性凝血效应对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用[D];第二军医大学;2010年
4 赵浩东;盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠早期肝脏血管内皮细胞和肝损伤变化及其相关性研究[D];安徽医科大学;2011年
5 陈朴;乌司他丁对重症脓毒血症的疗效及作用机制的研究[D];浙江大学;2004年
6 吴洁莹;氯胺酮及胰岛素增敏剂对腹腔感染脓毒症小鼠的作用[D];暨南大学;2002年
7 王伟荣;肺炎相关性脓毒症的临床特点及中医证候研究[D];广州中医药大学;2011年
8 孔怡淳;血清前降钙素在危重病中对脓毒症的早期诊断作用[D];天津医科大学;2002年
9 杨治力;甲状腺激素对脓毒症大鼠肠屏障保护作用的研究[D];中南大学;2003年
10 黄华经;清气凉营汤治疗脓毒症的研究[D];广州中医药大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陶锦琰;脓毒症的克星——齐格里斯[N];中国医药报;2001年
2 首都医科大学附属北京朝阳医院急诊科主任 李春盛;脓毒症需采用综合治疗策略[N];中国医药报;2009年
3 北京中医药大学东直门医院急诊科;基于四个环节辨治脓毒症[N];中国医药报;2009年
4 本报记者 任壮;聚焦脓毒症治疗策略[N];中国中医药报;2010年
5 张献怀;中药血必净防治脓毒症机制初步揭示[N];健康报;2010年
6 张献怀;中药血必净防治脓毒症机制被揭示[N];中国中医药报;2010年
7 特约记者 石谙丁;小儿脓毒症抗菌要领(二)[N];医药经济报;2011年
8 特约记者 石谙丁;小儿脓毒症抗菌要领(一)[N];医药经济报;2011年
9 ;误解与事实[N];中国医药报;2003年
10 尹东;中西医结合提高脓毒症防治水平[N];健康报;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978