收藏本站
《华中科技大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

siRNA靶向沉默HPA基因对人膀胱癌BIU-87细胞的生物学及HPA相关基因的影响

郭炬  
【摘要】:第一部分siRNA靶向沉默HPA基因对人膀胱癌BIU-87细胞的生物学及HPA相关基因的影响 实验一 HPA-siRNA序列设计合成和其对膀胱癌BIU-87细胞靶基因的沉默效应检测 目的:设计合成针对人肝素酶基因(HPA)的小干扰RNA(siRNA)序列,并检测其对人膀胱癌BIU-87细胞靶基因的沉默效应。 方法:针对人肝素酶基因mRNA序列件设计并化学方法合成4对肝素酶siRNA及1对阴性对照序列,采用脂质体2000将其转染人膀胱癌BIU-87细胞,RT-PCR、Real-time q-PC检测细胞HPAmRNA, Western blot检测细胞HPA蛋白表达,并筛选出最有效的siRNA序列。 结果:四对siRNA均能不同程度沉默HPA基因的表达,以针对1496-1514bp靶点的HPA-siH4干扰效果最好,PCR和Western blot结果示能有效降低BIU-87细胞HPA mRNA (P0.05)和蛋白(P0.05)的表达水平。 结论:成功设计和合成了沉默人肝素酶基因的小干扰RNA序列,有效地降低了BIU-87细胞mRNA和蛋白的表达,为进一步研究奠定了基础。 实验二 siRNA靶向沉默HPA基因后对VEGF、MMP-9基因和人膀胱癌BIU-87细胞生物学的影响 目的:观察小干扰RNA沉默HPA基因对人膀胱癌BIU-87细胞生物学及基因血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。 方法:用脂质体2000将前期研究筛选的HPA-siH4转染至人膀胱癌BIU-87细胞株内,PCR、蛋白免疫印迹法分别检测HPA两种相关基因VEGF、MMP-9 mRNA和蛋白的表达水平;细胞克隆形成实验,Transwell,小管形成实验分别检测干扰后BIU-87细胞增殖、侵袭、肿瘤血管生成能力。 结果:HPA-siH4沉默靶基因后能有效降低BIU-87细胞VEGF (P0.05)和MMP-9(P0.01)两种基因mRNA和蛋白的表达水平;与对照组对比,干扰后BIU-87细胞增殖能力(P0.05)、侵袭能力(P0.01)和成血管作用(P0.01)均有下降。 结论:靶向HPA的siRNA有效沉默人膀胱癌BIU-87细胞HPA基因,并下调了与肿瘤进展密切相关的VEGF和MMP-9,能明显抑制BIU-87细胞恶性生物学行为。 第二部分腹腔镜隐睾下降固定术与开放隐睾下降固术治疗NPT疗效的meta分析 目的:采用Meta分析的方法来研究对比腹腔镜下隐睾下降固定术和传统开放手术治疗NPT的临床效果,为临床治疗NPT术式的选择提供依据。 方法:从Medline、Embase、Ovid、Web of Science以及Cochrane数据库检索2010年8月以前的腹腔镜下隐睾下降固定术(Laparoscopic orchiopexy, LO)与开放隐睾下降固定术(Open orchiopexy,00)进行随机对照研究(RCTs)或临床对照研究(OCSs)的相关文献,并将其整理进行Meta分析。 结果:在搜索到的226个相关文献中,两个随机对照研究及五个临床对比研究文献被纳入,其中包括了173例行LO术及261例行OO术的病例。结果显示,行LO术的病例住院时间与行OO术的病例相比显著缩短(加权均数差(WMD)=-0.66;95%CI=-0.95~-0.37)。然而两者在手术时间(WMD=4.02;95% CI=-9.89~17.93;P=0.57)、术后恢复进食(WMD=-2.29;95% CI=-6.78~2.20;P=0.32)或术后恢复完全活动时间(WMD=-9.71;95% CI=-27.84~8.42;P=0.29)、复发率(优势比(OR)=0.60;95%可信区间(CI)=0.13~2.72;P=0.51)、睾丸存活率(OR=1.61;95% CI=0.30~8.52;P=0.58)、手术成功率(OR=1.41;95% CI=0.44~4.46;P=0.56)、睾丸萎缩(OR=1.70;95% CI=0.49~5.98;P=0.40).无明显统计学差异。 结论:虽然LO术式在缩短住院时间上有优势,但是它在治疗NPT方面与OO术式相比没有明显优越性。然而由于发表偏倚(publish bias),还需要更多的随机对照试验研究来探讨LO术治疗NPT患儿的效果。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R737.14

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 江长琴;梁朝朝;叶元平;张贤生;郝宗耀;周骏;樊松;葛魏巍;张桃福;;荧光原位杂交技术在膀胱肿瘤诊断中的应用[J];临床泌尿外科杂志;2008年12期
2 张开舒;徐忠华;姜虹;阎磊;周尊林;王荣;刘海南;范医东;刘照旭;郑宝钟;亓天伟;;siRNA沉默膀胱癌肝素酶基因对T24细胞增殖及MMP-2表达的影响[J];山东大学学报(医学版);2008年06期
3 赖潭;涂响安;胡斌;郑克立;丘少鹏;邓春华;;膀胱癌乙酰肝素酶mRNA的表达检测及其意义[J];实用癌症杂志;2008年03期
4 陈陵,杨仕明,房殿春,王东旭;肝素酶:抗肿瘤转移的新靶点[J];世界华人消化杂志;2004年02期
5 王深明 ,朱彩霞 ,黎志勋 ,王劲松 ,林颖;乳腺癌血行转移与血管生成相关因子相关性研究[J];中华实验外科杂志;2005年05期
6 赵勇,金讯波,吕家驹,孙鹏,王慕文,蒋绍博;乙酰肝素酶在膀胱癌中的表达及其与肿瘤血管形成的关系[J];中华实验外科杂志;2005年08期
7 Clara Luz Sampieri;Sol de la Pea;Mariana Ochoa-Lara;Roberto Zenteno-Cuevas;Kenneth León-Córdoba;;Expression of matrix metalloproteinases 2 and 9 in human gastric cancer and superficial gastritis[J];World Journal of Gastroenterology;2010年12期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 江长琴;梁朝朝;张贤生;郝宗耀;周骏;张翼飞;樊松;;膀胱癌的诊断与治疗[J];安徽医药;2011年11期
2 杨青;李俊;;膀胱癌尿脱落细胞学检查与尿液肿瘤标志物研究进展[J];安徽医药;2012年04期
3 刘秋英;孟庆勇;;半叶马尾藻多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制[J];癌症;2005年12期
4 童旭辉,蒋志文;乙酰肝素酶的生理特性及与肿瘤转移的关系[J];蚌埠医学院学报;2005年04期
5 王殿栋;何涛;;HIF-1和VEGF在肿瘤血管形成中的研究进展[J];包头医学院学报;2007年06期
6 刘家旋;陈利生;李天煜;;结直肠癌中p33ING1与VEGF蛋白的表达及其临床意义[J];结直肠肛门外科;2009年04期
7 刘家旋;陈利生;张小龙;郭云;甘嘉亮;;VEGF-C与VEGF-D蛋白的表达对结直肠癌淋巴结转移的影响[J];结直肠肛门外科;2010年06期
8 李楠,徐采朴,刘为纹,宋波;TIMP-2基因转染在裸鼠胃癌中Ⅳ型胶原酶及Ⅳ型胶原改变的研究[J];第三军医大学学报;1998年04期
9 陈陵;李志宏;杨仕明;李晶晶;蔡永国;房殿春;罗元辉;王东旭;;人肝素酶基因正反义荧光真核表达载体的构建及肝癌细胞转染[J];第三军医大学学报;2006年01期
10 熊震;汤旭东;房殿春;陈婷;余松涛;陈陵;罗元辉;杨仕明;;人肝素酶RNAi序列的筛选及鉴定[J];第三军医大学学报;2007年20期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘锐;CDCP1在肺癌的表达及RNA干扰对肺癌细胞生长的影响[D];吉林大学;2011年
2 刘英霞;三氧化二砷(As_2O_3)抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移作用机理研究[D];兰州大学;2011年
3 郭柏鸿;应用SSH和cDNA基因芯片技术筛查和鉴定膀胱癌尿脱落细胞特异性基因[D];兰州大学;2010年
4 陈清江;Nanog在食管癌中的表达及意义[D];郑州大学;2011年
5 莫开菊;葛仙米多糖的分离提取及功能性质研究[D];华中农业大学;2011年
6 华东;TLR4信号通路介导的前列腺癌侵袭转移的研究[D];苏州大学;2011年
7 尹光明;肝素酶、b-FGF及uPA在膀胱癌中的表达及意义[D];中南大学;2003年
8 王振宁;LCM技术体系的建立及胃癌转移相关基因的筛查[D];中国医科大学;2002年
9 于红;钝顶螺旋藻多糖抗病毒及抗肿瘤作用的研究[D];中国海洋大学;2003年
10 陈奎生;乙酰肝素酶与食管鳞癌浸润转移的关系及体内外抑制乙酰肝素酶蛋白、基因表达的实验研究[D];郑州大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭振营;胃癌中Claudin-1、MMP-2的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
2 卢万里;CXCR-4和MMP-2在非小细胞肺癌中的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
3 陈妍琼;KiSS-1、MMP-2和MVD在不同食管病变组织中的表达及其相关性研究[D];郑州大学;2010年
4 简娜提·阿不力孜;VEGF、P27和CyclinD1在乳腺癌中的表达及意义[D];新疆医科大学;2010年
5 李雪斌;螺旋藻硫酸多糖(SPS)提纯工艺优化及体外抗氧化和抗稻瘟霉活性研究[D];浙江大学;2010年
6 王旭峰;RECK和MMP-9在喉鳞癌中的表达及相关性研究[D];山西医科大学;2011年
7 李彩虹;PGC、PTEN、HER-2、CEA及CA72-4在霉菌性胃溃疡和溃疡型胃腺癌中的对比研究[D];中南大学;2011年
8 张艳;颈部副神经节瘤HIF-1a、VEGF的检测及其意义[D];天津医科大学;2011年
9 张伟静;MMP9-PEX原核表达、纯化与复性研究[D];辽宁医学院;2011年
10 马志远;RECK、MMP-2及MMP-9在肾透明细胞癌中的表达及意义[D];郑州大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 赵坡,吕亚莉,钟梅,王殿军;结肠直肠癌端粒酶、肝素酶表达升高与预后的关系[J];癌症;2001年06期
2 赵国范,孙锐,刘武英,吕纯义;膀胱癌的血管内皮细胞生长因子表达、微血管计数及其临床意义[J];中华实验外科杂志;1999年01期
3 孙慧,战忠利,吴洁,李雯,齐立强,宁连胜;人乳腺癌和癌旁组织中血管内皮生长因子与微血管密度的表达及其临床意义[J];中华实验外科杂志;2002年01期
4 任小龙,朱任之,王丽京,周丹霞,李东海,陈浩;胃癌组织乙酰肝素酶mRNA表达及其意义[J];中华实验外科杂志;2003年09期
5 张友磊,傅志仁,陈学云,杨佳荟,王元和,沈茜;乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株侵袭力的抑制作用[J];中华实验外科杂志;2004年03期
6 刘颖斌,陈晓鹏,彭淑牖,方河清,吴育连,彭承宏,史留斌,白明东,许斌,王建伟,邓贵龙;肝细胞性肝癌中乙酰肝素酶与nm23-H1的表达及其临床意义[J];中华医学杂志;2002年22期
7 张友磊,傅志仁,张军,王元和,沈茜;乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株MDA435侵袭力的抑制作用[J];中华医学杂志;2003年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 倪勤;RNA干扰技术防治病毒性肝炎的研究[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2003年04期
2 李光明,谢青,史毅,李定国,金由辛;siRNA对HSC结缔组织生长因子的抑制作用[J];上海第二医科大学学报;2005年02期
3 燕春艳;RNA干扰技术研究进展[J];实用医药杂志;2003年09期
4 马鹏鹏,葛晔华,郭睿,马静,陈平,薛社普,韩代书;小分子干扰RNA(siRNA)表达载体沉默靶基因的研究[J];解剖学报;2004年06期
5 郭述良,罗永艾;RNA干扰及其在呼吸系统疾病研究中的应用[J];国外医学.内科学分册;2004年12期
6 赵洪波,张嘉宁;RNA干扰技术的应用[J];大连医科大学学报;2003年04期
7 范怡敏,耿飞,吴兴中;RNAi的机制及RNAi技术的应用[J];医学综述;2004年04期
8 王占黎,卢景芬,张亮仁,张礼和;RNA干扰与药物的研究进展[J];国外医学.药学分册;2004年04期
9 熊洁,陈宝安;RNA干扰技术在白血病研究中的应用前景[J];国外医学.肿瘤学分册;2004年11期
10 胡晓霞,李力;RNA干扰技术及在妇科肿瘤研究中的应用[J];国外医学.妇产科学分册;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邓清华;刘国文;刘磊;王建国;朱晓岩;李小兵;王哲;;siRNA特异性抑制犊牛原代肝细胞SREBP-1c基因的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(上册)[C];2011年
2 季爱民;苏丹;车鸥;李文适;孙靓;张忠义;杨彬;;壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究(英文)[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
3 黄伟;吕明;金明姬;杨长青;高钟镐;;mPEG-PCL-g-PEI聚合物的合成及其siRNA递送性能[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
4 陈宇;郑海涛;杨力建;陈少华;沈琦;刘思初;李萡;李扬秋;;靶向抑制PPP2R5C基因的siRNA的筛选[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
5 刘政;邱广斌;;MYCT-1基因特异的siRNA对GES-1细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
6 陈卫华;王跃闽;;Cb1-b特异性siRNA载体的筛选验证[A];华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会论文汇编[C];2011年
7 刘芳蕾;周勇;应可净;;肺癌PLK1基因多态性及siRNA干预的研究[A];2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
8 薛利军;曹明媚;秦照玲;潘欣;戚中田;;siRNA抑制结核分枝杆菌侵袭相关基因mcela在体外培养的人细胞内的表达[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
9 章如新;;P物质siRNA在变应性鼻炎中的作用机制研究[A];世界中联耳鼻喉口腔专业委员会换届大会及第三次学术年会暨中华中医药学会耳鼻喉科分会第十七次学术交流会暨广东省中医及中西医结合学会耳鼻喉科学术交流会论文汇编[C];2011年
10 李平;刘苹;陈星云;赵艳;彭艳;陈磊;周元国;;大鼠c-ski基因siRNA真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的干扰效果观察[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 余志平;打开功能基因组学与未来治疗学的大门[N];中国医药报;2004年
2 庄北宁;防治非典,专家称找到基因“新药”[N];新华每日电讯;2005年
3 杨霞;防治SARS药研发获阶段性成果[N];中国医药报;2004年
4 聂翠蓉编译;RNAi:生物技术的蓝月亮[N];科技日报;2003年
5 曾崇君;奇尔根核酸业务试水MBO[N];医药经济报;2004年
6 本报特约撰稿人 陆志城;RNA干扰技术遭遇“缺陷危机”[N];医药经济报;2003年
7 记者 毛黎;美开发出癌症治疗新技术[N];科技日报;2009年
8 张荔子;乳腺癌基因特异性药物曙光初现[N];健康报;2004年
9 杨霞;广东SARS防治药物研究取得阶段成果[N];中国医药报;2004年
10 倪永华;让基因保持沉默[N];科技日报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭炬;siRNA靶向沉默HPA基因对人膀胱癌BIU-87细胞的生物学及HPA相关基因的影响[D];华中科技大学;2011年
2 胡平方;纤溶酶原激活物抑制剂-1 siRNA治疗实验性肝纤维化[D];第二军医大学;2010年
3 蔡磊;携带Survivin特异性siRNA的完全人源性肝癌单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白对肝癌凋亡的影响研究[D];第四军医大学;2010年
4 张伟;H5N1亚型高致病性禽流感病毒siRNA靶向制剂的研究[D];中国协和医科大学;2010年
5 徐向上;Aptamer-protamine-siRNA复合物在肿瘤靶向治疗中的作用研究[D];华中科技大学;2010年
6 韩璐;豆科植物蒺藜苜蓿发育相关基因[D];山东大学;2010年
7 王哲文;后发性白内障的发病机制研究[D];吉林大学;2006年
8 向飞宇;心衰的机制与干细胞治疗基础研究[D];复旦大学;2009年
9 张彦萍;纤溶酶原激活物抑制剂-1siRNA抗博来霉素诱导的大鼠肺纤维化作用及机制[D];河北医科大学;2011年
10 万黎;Galectin-3特异性siRNA对肺癌肿瘤干细胞生物学功能影响的研究[D];华中科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑亚婷;应用siRNA技术抑制铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM表达的研究[D];昆明医学院;2010年
2 贾丽洁;ICP27特异性siRNA抑制HSV-1病毒复制的实验研究[D];郑州大学;2010年
3 付振宇;siRNA沉默HIF-1α基因对人前列腺癌PC3细胞生物学性状的影响[D];苏州大学;2010年
4 韦德芳;利用pSOS-HUS系统筛选靶向乙肝病毒X基因的siRNA的研究[D];重庆医科大学;2010年
5 马婧薇;ASGPR介导的靶向siRNA抑制HBV的复制与表达[D];华中科技大学;2009年
6 方首镕;siRNA干扰MDR1逆转舌癌耐药性表型的实验研究[D];广西医科大学;2011年
7 李杰;抑制PKM2的siRNA协同抑制CCND1的作用机制研究[D];安徽医科大学;2011年
8 王涵;应用siRNA技术下调Survivin抑制鼻咽癌细胞生长的研究[D];昆明医学院;2010年
9 索涛莉;靶向Hsp90β siRNA对Jurkat细胞生长抑制及化疗敏感性影响的研究[D];重庆医科大学;2010年
10 汤容;siRNA抑制人卵巢癌SW626细胞CXCR4基因的研究[D];重庆医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026