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《华中科技大学》 2011年
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黄芩苷对小鼠巨细胞病毒肝炎的治疗作用及其机制研究

黄永建  
【摘要】:[目的] 1)在小鼠巨细胞病毒肝炎模型证实黄芩苷的治疗作用和抗病毒效应; 2)探寻黄芩苷诱导抗CMV免疫的作用及其可能环节和机制。 【方法】 1)黄芩苷的肝毒性实验:根据成人的中效剂量计算小鼠用药剂量为60 mg/kg,按等倍递加方式设计药物剂量梯度为60 mg/kg、120 mg/kg、240 mg/kg和480 mg/kg。正常小鼠腹腔注射不同剂量黄芩苷,每天1次,连续14天后检测小鼠血清谷丙转氨酶水平及肝组织病理变化,观察黄芩苷肝毒性作用; 2)动物模型建立:按照徐翼的方法,选择4.5周龄BALB/c小鼠腹腔接种在免疫抑制小鼠体内增毒的MCMV Smith株,建立MCMV播散性感染模型。在MCMV接种后24小时开始给予黄芩苷腹腔注射60mg/kg,每天1次,共14天;设立安慰剂对照组和正常对照组; 3)肝病变评估:于给药后3、7和14天观察肝脏组织病变,用肝组织病变活动性积分(HAI)评估肝组织病变,同时检测血清sALT反映肝细胞功能变化; 4)病毒学评估:用蚀斑法测定黄芩苷治疗14天唾液腺组织内感染性病毒量,并与安慰剂对照组比较; 5)Th1/Th2类细胞因子表达:分别于给药后3、7和14天取小鼠脾细胞,经刀豆素、灭活MCMV刺激体外培养48小时,收集脾细胞培养上清液,用双抗体夹心ELISA法检测上清中Th1类细胞因子IFN-γ水平,设立不加刺激物对照组。同时检测各时间点小鼠血清中Th2类细胞因子IL-4水平; 6)Th1和Th2细胞特异性转录因子TBX21和GATA-3蛋白表达:按上述时间点提取脾组织蛋白,用Western blot法检测Th1和Th2细胞特异性转录因子TBX21和GATA-3表达强度,设立内参蛋白,以校正值K进行半定量分析。 【结果】 1)黄芩苷的肝毒性作用:60mg/kg,120mg/kg,240 mg/kg和480 mg/kg腹腔注射黄芩苷共14天,未见小鼠死亡,未出现其他异常反应。各组小鼠血清ALT水平与正常对照组相比无明显差异,肝脏切片亦无明显异常病理变化; 2)肝功能改变:与正常对照组相比,安慰剂对照组小鼠ALT水平在3天时明显升高,7天时达高峰,14天时下降。与安慰剂组相比,黄芩苷治疗组ALT水平在3天时即有明显下降,7天时进一步下降,14天时接近正常; 3)肝组织病理改变:安慰剂对照组肝组织HAI均值在第3天达高峰,以后逐渐下降;黄芩苷治疗组肝组织HAI均值也在第3天达高峰,但肝损害明显轻于安慰剂对照组,以后肝病变逐渐减轻,在第7天和14天时HAI均值都显著低于安慰剂对照组; 4)唾液腺感染性病毒量变化:黄芩苷治疗14天时,小鼠唾液腺的感染性病毒量明显低于安慰剂对照组; 5)Th1类细胞因子表达:黄芩苷治疗组和安慰剂对照组脾细胞上清中IFN-γ都在7天时达高峰,在3天、7天和14天时都高于正常对照组水平,有统计学差异。与安慰剂组比较,黄芩苷治疗组在3天和7天时都显著高于安慰剂对照组,但到14天时,黄芩苷治疗组已明显低于安慰剂组; 6)Th2类细胞因子表达:安慰剂对照组3天时血清IL-4显著低于正常对照组,第7天升至正常水平;到第14天显著高于正常对照组。黄芩苷治疗组IL-4水平在3天时亦明显低于正常对照组;第7天达高峰,略高于正常对照组,但明显高于安慰剂组;第14天仍略高于正常对照组,但明显低于安慰剂组。 7)TBX21蛋白表达:安慰剂对照组3天时TBX21蛋白表达略低于正常对照组;但7天和14天时都明显高于正常对照组;黄芩苷治疗组3天时TBX21蛋白表达显著高于正常对照组及安慰剂组;7天时达高峰,14天时略有下降,亦都明显高于正常对照组,但与安慰剂组接近; 8)GATA-3蛋白表达:安慰剂组和黄芩苷治疗组3天时GATA-3蛋白表达都显著低于正常对照组;但在7天和14天时都接近正常对照组表达水平,而黄芩苷治疗组与安慰剂组之间比较无明显差异。 【结论】 1)使用高达8倍中效剂量的黄芩苷对小鼠肝脏组织无毒副作用,表明黄芩苷是一种安全的中药制剂; 2)在整体水平,黄芩苷能显著减轻MCMV感染所致肝组织病理损害,促进sALT恢复正常,减少机体唾液腺内感染性病毒量。证明黄芩苷在体内具有抗巨细胞病毒效应,并对MCMV肝炎有治疗作用; 3)在MCMV急性感染早期,机体主要启动Th1介导的细胞免疫来快速清除病毒; 4)黄芩苷在MCMV急性感染早期可明显上调TBX21蛋白表达进而促进Th1细胞免疫应答而有利于机体清除病毒,并对MCMV诱导的Th1/Th2细胞网络改变有一定调节作用。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

【参考文献】
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1 徐翼,汪世灏,方峰;大蒜新素对MCMV感染小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子水平的影响[J];安徽中医学院学报;2004年04期
2 李素婷,梅立新,杨鹤梅,佟继铭;黄芩茎叶总黄酮对实验性大鼠肝纤维化的影响[J];辽宁中医杂志;2004年10期
3 蔡仙德,谭剑萍,穆维同;黄芩甙对小鼠体液免疫的调节作用[J];南京铁道医学院学报;1995年03期
4 罗志晓,李成章,曹正国;黄芩苷对牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞上ICAM-1表达调节的研究[J];口腔医学研究;2004年02期
5 单庆文;王琳琳;云翔;梁淡湄;;婴儿巨细胞病毒感染相关胆汁淤积性肝炎[J];实用儿科临床杂志;2007年10期
6 张建春,张华,施瑛,胡浩;黄芩苷的研究近况[J];时珍国医国药;2005年03期
7 吴建军,刘贵育,陈贵海,候舒,方草晖,王明丽;双黄连对人巨细胞病毒感染小鼠肝组织病毒DNA载量影响[J];中国药理学通报;2005年05期
8 方峰,董永绥;巨细胞病毒和巨细胞病毒感染的诊断[J];中华儿科杂志;1999年07期
9 徐翼;方峰;陈志敏;罗社声;王财富;祝国红;徐迎春;蓝引乐;;巨细胞病毒感染对小鼠心肌组织T_H1/T_H2类细胞因子及其特异性转录因子T-bet/GATA-3表达的影响[J];中华微生物学和免疫学杂志;2006年09期
10 徐翼,方峰,董永绥,向稚丹,甄宏,李革;大蒜新素对MCMV感染小鼠转录因子T-bet和GATA-3基因表达的影响[J];中华微生物学和免疫学杂志;2004年12期
【共引文献】
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1 裘炯良,常艳,朱心强;用多终点体内试验法研究硫丹的雌激素活性[J];癌变畸变突变;1999年05期
2 单保恩,郭兰涛,董青,马洪;Syk对三氧化二砷诱导脑瘤细胞周期阻滞的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年06期
3 单保恩;刘东青;梁文杰;张静;李巧霞;;北豆根提取物PE2成分的体内抗肿瘤作用及其免疫学调节机制研究[J];癌变.畸变.突变;2006年05期
4 林飞;妊娠终止药在生殖毒性试验中的设计方案[J];癌变畸变突变;1997年01期
5 陈勤,陶夏平;葆春精胶囊补肾壮阳的实验研究[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年03期
6 倪家源,王晓明,何文英;灵芝孢子粉胶囊对脾虚证肿瘤放化疗病人临床疗效的研究[J];安徽中医临床杂志;1997年06期
7 冯平安,贾德云,刘超,王静;老鹳草抗炎作用的研究[J];中医药临床杂志;2003年06期
8 梁文珍,刘道芳;紫参颗粒治疗围绝经期综合征实验研究[J];中医药临床杂志;2004年02期
9 范玉坤;化滞灵治疗高脂血症动脉粥样硬化的实验研究[J];中医药临床杂志;2005年05期
10 张部昌,赵帜平,邢军,袁华玲,李布青;丹皮多糖的提取纯化及其药理作用初步研究[J];安徽农业科学;1995年04期
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1 王国栋;王竹;韩军花;何梅;杨月欣;;植物甾醇对实验大鼠血脂调节的影响[A];中国营养学会论文汇编之二[C];2007年
2 赵力超;刘欣;陈永泉;;荸荠产粉废浆中功能组分功能效果的研究[A];第三届“益生菌、益生元与健康研讨会”论文集[C];2004年
3 潘华新;王培训;周联;曹柳英;梁瑞燕;;两种雷公藤多苷片抗炎、免疫抑制作用的对比研究[A];第三届全国中医药免疫学术研讨会论文汇编[C];2006年
4 王萧;胡世兴;林少春;郭学军;邹移海;;光明液对视网膜光损害模型大鼠的疗效观察[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
5 张大维;邴国强;李萍;杨东华;于艳波;刘占军;郭超;徐彩云;;实验动物屏障环境常用消毒药品刺激性及毒性实验(五)—2%过氧乙酸吸入毒性实验[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
6 姜延;王韶兵;王丽;段江涛;;参乌冠心颗粒剂对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响[A];中华中医药学会心病学分会成立暨第八次全国学术年会论文精粹[C];2006年
7 毛静远;王恒和;魏广力;葛永彬;李彬;王强;张运;李红;常延平;吴慧轩;王贤良;李明;郭永铁;;不同剂量参附注射液对心衰大鼠地高辛组织浓度的影响[A];第九次全国中医心病学术研讨会论文精选[C];2007年
8 索菲娅;黄培佑;李强;邬利娅·伊明;;孜然挥发油的急性毒性及对实验性胃溃疡的作用研究[A];第四届全国民族医药学术交流暨《中国民族医药杂志》创刊10周年庆典大会论文集[C];2005年
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4 邝枣园;肺炎衣原体对血管内皮细胞的损伤及黄芩苷的保护作用[D];广州中医药大学;2005年
5 张永锋;益气活血健脾补肾法对小鼠结肠炎防治作用及机制的研究[D];湖北中医学院;2005年
6 胡克武;甲肿方治疗非毒性甲状腺肿的临床疗效与机理研究[D];广州中医药大学;2000年
7 袁捷;双氢青蒿复方配伍抗疟的优越性及其作用机理初步探讨[D];广州中医药大学;2000年
8 梁伟;蟾毒灵脂质体的研究[D];上海医药工业研究院;2000年
9 胡秀芳;茶儿茶素对肾炎的药效及其机理研究[D];浙江大学;2001年
10 曹炜;蜂胶产品加工工艺研究及其生物功能评价[D];陕西师范大学;2001年
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1 鲍继奎;进展型脑梗死与人巨细胞病毒激活感染相关性的血清学研究[D];河北医科大学;2004年
2 张喜莲;针刺加熄风胶囊治疗小儿癫痫强直--阵挛性发作的临床及实验研究[D];天津中医学院;2000年
3 郭仲之;养胃合剂减轻荷瘤小鼠化疗毒副作用的实验研究[D];暨南大学;2000年
4 孙玉峰;水线草的药理作用及其相关的物质基础研究[D];广州中医药大学;2000年
5 郭力恒;补肾益心片改善高血压病人生活质量的临床与实验研究[D];广州中医药大学;2000年
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7 孙学刚;定心方和丹参酮ⅡA防治心律失常的一氧化氮机制研究[D];第一军医大学;2000年
8 郑燕华;胃热清胶囊治疗消化性溃疡的实验和临床研究[D];福建中医学院;2000年
9 徐明智;口服偏钒酸钠对糖尿病ICR小鼠体内葡萄糖磷酸化作用的影响[D];浙江大学;2001年
10 高美丽;太白参不同部位对小鼠抗氧化及运动能力影响的研究[D];陕西师范大学;2001年
【二级参考文献】
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1 陈光福,虞佩兰,金立明,杨于嘉,刘运生,陶永光;黄芩甙、川芎嗪对兔感染性脑水肿与磷脂酶A_2的作用[J];中国当代儿科杂志;1999年03期
2 赵越平,雷其云,苏永芝,苏士银,蒋永培;黄芩中黄芩甙不同提取方法的比较[J];第四军医大学学报;1996年06期
3 吴伟森;黄建美;连楚南;;婴儿巨细胞病毒肝炎的临床研究[J];河北医学;2006年06期
4 俞燕,杨于嘉,陶永光,尹飞;黄芩甙、地塞米松对大鼠感染性脑水肿细胞因子的影响[J];湖南医科大学学报;2000年06期
5 周晓红,甄彦君,冯敬坤;黄芩研究进展[J];河北中医药学报;2000年03期
6 周晓红,翟佳,凌亦凌,黄善生,甄彦君,冯靖坤;黄芩甙抗内毒素休克的实验研究[J];河北中医药学报;2001年01期
7 张红雨;黄酮类抗氧化剂结构活性关系的理论解释[J];中国科学B辑;1999年01期
8 王晓娟,曹红,程斌 ,陈晓慧;高效液相色谱法测定湿热颗粒中黄芩苷的含量[J];解放军药学学报;2003年03期
9 韩喻美;Fura-2荧光测定中药有效成分对神经细胞内Ca~(2+)浓度的变化[J];江西医学院学报;1996年04期
10 王伟,张涛,赵明镜,钟蓓,吕希莹,崔巍,张学中,王硕仁,郭维琴;5种中药黄酮对血管平滑肌细胞凋亡的交互作用[J];北京中医药大学学报;2000年04期
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9 宋红英,刘放;反相高效液相色谱法测定黄芩及其制剂中黄芩苷含量[J];药学实践杂志;2002年05期
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1 王超云;黄芩苷对脑损伤有保护作用[N];中国医药报;2004年
2 冯友根;黄芩苷对缺血心肌的保护作用[N];中国医药报;2003年
3 程书权;黄芩的药理作用[N];中国中医药报;2002年
4 徐丽荣;马世彬;李澎涛;唐启盛;清开灵于细胞黏附环节发挥作用[N];中国医药报;2004年
5 沈群 罗佳波;重视中药复方药动学研究的特殊性[N];中国医药报;2005年
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10 程书权;中药化学成分抗内毒素研究现状[N];中国医药报;2004年
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1 黄永建;黄芩苷对小鼠巨细胞病毒肝炎的治疗作用及其机制研究[D];华中科技大学;2011年
2 邱家章;黄芩苷抗金黄色葡萄球菌α-溶血素作用靶位的确证[D];吉林大学;2012年
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8 刘养凤;黄芩苷抗癫痫发生及神经保护的实验研究[D];第四军医大学;2012年
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1 宋姗姗;黄芩苷对小鼠肠道菌群的影响[D];广州中医药大学;2010年
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