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《华中科技大学》 2011年
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表达IL-17的正义质粒对小鼠铜绿假单胞菌肺部感染防御机制的研究

徐西琳  
【摘要】:[目的]:白介素-17(IL-17)是近年来发现的一种细胞因子,可通过诱导C-X-C趋化因子的释放促进呼吸道内中性粒细胞募集和激活,在肺部感染中具有重要的防御作用。本研究以小鼠急性铜绿假单胞菌肺部感染为研究对象,检测IL-17及细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)的水平,来阐明IL-17在铜绿假单胞菌肺部感染中的防御作用;在此基础上构建表达IL-17的正义质粒,通过气道给予表达IL-17的质粒来探讨IL-17免疫治疗铜绿假单胞菌肺部感染的相关机制,为IL-17治疗铜绿假单胞菌肺部感染的临床免疫治疗提供理论和实践的基础。 [方法]:1.建立急性铜绿假单胞菌肺部感染小鼠模型,进行肺组织切片光镜观察病理变化,了解肺部炎症及组织损伤,收集动物的支气管肺泡灌洗液、外周血和肺组织,采用Real time PCR检测IL-17mRNA的表达,ELISA检测IL-17及细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)的表达水平,以及支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数。 2,构建表达IL-17的正义质粒并经气道滴入IL-17的质粒后检测IL-17及细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)的表达水平,以及肺泡灌洗液中性粒细胞计数。 3,经气道滴入表达IL-17的质粒48小时后气道再滴入铜绿假单胞菌,观察铜绿假单胞菌肺部感染小鼠6小时后的细菌计数、细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)的表达水平,并观察小鼠的生存率。 [结果]:1.通过气道滴入铜绿假单胞菌成功建立小鼠铜绿假单胞菌急性肺部感染的模型,并检测到IL-17及细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)水平增高。 2.通过气道滴注表达IL-17的正义质粒后小鼠肺部IL-17及细胞炎性因子(IL-1β、MIP-2和G-CSF)水平增高,而且中性粒细胞计数也显著增加。 3.在铜绿假单胞菌急性肺部感染前预先经气管注入表达IL-17的正义质粒使IL-17高表达,导致气道局部产生IL-1β、MIP-2、G-CSF增多,细菌的清除能力及生存率也显著提高。 [结论]:IL-17在铜绿假单胞菌急性肺部感染小鼠的局部免疫反应中起一定作用。其机制可能通过增加早期中性粒细胞募集到感染部位来实现的。IL-17有望成为治疗铜绿假单胞菌感染的新靶位。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R563.1

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