大鼠脂肪干细胞体外诱导成平滑肌样细胞的实验研究
【摘要】:【目的】
研究大鼠脂肪干细胞(ADSCs)体外单层培养条件下诱导分化为平滑肌样细胞的可行性。
【方法】
从SD大鼠的腹股沟脂肪垫分离获取脂肪干细胞,测定其生长曲线。取第4代细胞用成脂诱导液诱导分化,并用油红O染色鉴定。取第4代细胞用成骨诱导液诱导分化,并用Von Kossa染色鉴定。取第4代细胞用含有β-巯基乙醇的成平滑肌诱导液诱导,并用免疫组化的方法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。
【结果】
脂肪干细胞成梭形和多角形,体外生长迅速,生长曲线表明传代2天后细胞进入对数生长期。第4代脂肪干细胞,成脂诱导后,油红O染色证实细胞内存在脂滴;成骨诱导后,Von Kossa染色证实有钙化结节。脂肪干细胞诱导平滑肌样细胞免疫组化结果,含β-巯基乙醇诱导液诱导组和未诱导组细胞α-SMA的表达阳性率分别为(29.80±6.89)%、(2.89±1.24)%。诱导组细胞α-SMA的表达阳性率高于未诱导组,差异有统计学意义(P0.01)。
【结论】
脂肪干细胞经诱导后出现明显的平滑肌细胞特征,可成为平滑肌相关疾病在组织工程研究上新的种子细胞来源。
【关键词】:脂肪干细胞 诱导 体外 平滑肌细胞 大鼠 【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R329
【目录】:
- 中英文缩略词表5-6
- 摘要6-7
- ABSTRACT7-8
- 前言8-10
- 第一部分 大鼠脂肪干细胞的原代分离培养10-14
- 材料与方法10-13
- 结果13-14
- 第二部分 大鼠脂肪干细胞的鉴定14-19
- 材料与方法14-17
- 结果17-19
- 第三部分 大鼠脂肪干细胞诱导成平滑肌样细胞19-24
- 材料与方法19-22
- 结果22-24
- 讨论24-27
- 参考文献27-30
- 附录一30-32
- 附录二32-33
- 综述33-44
- 参考文献40-44
- 致谢44
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